Gambogic Acid Induced Apoptosis through Activation of Caspase-dependent Pathway in Aortic Smooth Muscle Cells

Dae-Kwang Kim(김대광),Tae-Jin Lee(이태진),Eun-Ae Kim(김은애),Ju Hwan Kang(강주환),Kyung Gon Kim(김경곤),Joo-Young Kim(김주영) 대한체질인류학회 2013 해부·생물인류학 (Anat Biol Anthropol) Vol.26 No.3

Gambogic acid (GA)는 강력한 항암효과를 가진다. 민무늬근육세포의 증식과 이동은 죽상동맥경화증의 발병기전에 있어 중요한 역할을 한다. 이 연구는 GA가 대동맥 민무늬근육세포에 대하여 세포사멸 효과가 있는지를 조사하였고, simvastatin에 비해 GA의 효과가 얼마나 유용한지를 연구하였다. 대동맥 민무늬근육세포는 4-6주 된 Sprague-Dawley 흰쥐에서 분리하였다. 이들 세포는 민무늬근육의 α-액틴 항체로 면역형광염색법으로 확인하였다. MTT 방법으로 GA와 simvastatin의 IC50을 결정하였다. 약제 각각의 IC50으로 24시간 처리한 후, 살아있는 세포영상 분석, 형광물질이 표지된 annexin V와 propium iodide로 이중염색하여 세포사멸 정도 분석을 각각 시행하였다. 또한, western blot으로 민무늬근육세포에서 PARP 및 procaspase-3의 감소와 PARP 및 procaspase-3의 분할을 보고, 세포사멸임을 검증하였다. GA의 IC50인 1 μM은 simvastatin의 IC50인 30 μM보다 낮았는데, 이는 IC50만으로 보았을 때 GA가 simvastatin 보다 더 강력한 약제임을 보여주었다. 또한 세포영상에서 약제종류와는 상관없이 약제처리 24시간 후, 처리하지 않은 대조군에 비해 세포의 수가 상당이 감소되었다. GA 처리군 (26.4±2.37%)에서 simvastatin 처리군 (8.3±1.54%)에 비해 세포사멸된 세포들이 더 높은 백분율을 나타냈다 (P?0.05, n=3). 또한 GA를 처리하면 PARP, procapase-3, 그리고 Mcl-1의 발현을 감소시켰지만, simvastatin을 처리 한 경우에는 없었다. z-VAD-fmk로 전처리 후, PARP와 procaspase-3의 분할 뿐만 아니라 GA에 의해 유도된 세포사멸이 감쇄되었다. GA에 의해 유발된 Mcl-1 단백질 발현의 감소는 z-VAD-fmk에 의해 복구되었다. 이들 결과는 GA에 의해 유도된 세포사멸이 caspase 의존성 경로를 통해 일어난다는 것을 의미한다. Gambogic acid (GA) has powerful apoptotic actions. The authors investigated whether GA has apoptotic effects on aortic smooth muscle cells, and compared its potency with that of simvastatin. Smooth muscle cells were isolated from the aortas of Sprague-Dawley rats (4-6 week). Cell purities were confirmed by IF staining using α-smooth muscle actin antibody. The IC50 values for cell death by GA and simvastatin were determined using a MTT assay, and the apoptotic effects of 1 μM GA or 30 μM simvastatin (concentrations correspond to IC50 values) were determined after 24 h of treatment using live cell images and by FITC annexin-V and propidium iodide double-staining. In addition, western blotting was used to evaluate apoptosis by quantifying reductions in the expression levels of the PARP and procaspase-3 as well as cleavages of PARP and procaspase-3 after treatment with 1 μM GA or 30 μM simvastatin. The IC50 of GA (1 μM) was lower than that of simvastatin (30 μM). Cell numbers were markedly reduced by both drugs in live cell images. GA (1 μM) produced a higher level of apoptosis than 30 μM simvastatin (26.4±2.37% vs. 8.3±1.54%, respectively; P?0.05, n=3) by FITC annexin-V & PI double-staining. In addition, 1 μM GA reduced the expressions of PARP, procaspase-3, and Mcl-1 in cells, whereas 30 μM simvastatin did not. Pretreatment with z-VAD-fmk attenuated GA-induced apoptosis and the cleavages of PARP and procaspase-3. The decreased level of Mcl-1 protein induced by GA treatment was recovered by z-VAD-fmk. These results indicate that GA-induced apoptosis was mediated by a caspase-dependent pathway.

사람 난소발생에 있어서 IGF2 유전자의 역할

박형태(Park Hyung Tae),김홍태(Kim Hong Tae),최보화(Choi Bo Hwa),김정란(Kim Jung Ran),김대광(Kim Dage Kwang),최인장(Choi In Jang),이인환(In Hwan lee),장성익(Chang Sung Ik) 대한체질인류학회 1996 해부·생물인류학 (Anat Biol Anthropol) Vol.9 No.2

간추림. 사람 난소 발생에 있어서 IGF2가 어떤 역항을 하는지를 알기 위하여 IGF2의 유전자 산물인 단백질에 대한 단 클론 항체를 이용하여 연역조직화학기법으로 각 난소조칙에 대한 IGF2 발현정도를 검색한 결과는 다음과 같다. 성숙난 소에서 특징적인 것은 난자에서 IGF2의 발현이 매우 높았으며 과립세포와 난포막세포 (theca cell)에서도 IGF2의 발현이 관찰되었으나 높지는 않았다. 반면에 일차성 난포에서의 난자에서는 IGF2의 발현이 있었지만 성숙난포에서처럼 높지 않았으며 난포세포에서는 IGF2의 발현이 관찰되지 않았다. 황체세포에서는 IGF2 발현이 애우 높았으나 기질세포와 상피세포에서는 IGF2의 발현이 전혀 없었다. 이런 결과로 미루어 보아 IGF2는 배란에 깊이 관여하고 황체호르몬 (progesterone) 분비를 촉진하는데 중요한 역할을 한다고 판단되며 난소암이 대부분 상피세포에서 기원되는데 비정상적 IGF2 발현이 난소암과 관련되는 것으로 생각된다.

각질가시세포종에서의 이형접합성소실과 Microsatellite의 불안정성에 대한 분석

하태원(Tae-Won Ha),한기환(Ki-Hwan Han),김대광(Dae-Kwang Kim) 대한해부학회 2005 Anatomy & Cell Biology Vol.38 No.1

유전성비살버섯증잘록창자곧창자암(hereditary non-polyposis colorectal cancer)과 일부 Muir-Torre 증후군에서는 DNA부조화복구유전자 (DNA mismatch repair gene)의 돌연변이로 microsatellite 불안정성(microsatellite instability, MIS)이라는 유전자의 불안정성이 나타난다. 각질가시세포종은 형태학적으로 피부의 편평세포암종과 유사하지만 수개월간의 빠른 성장이후 완전히 소실되는 양성 종양이다. Muir-Torre 증후군 환자에서 발생한 각질가시세포종에서 MIS가 발견되어 각질가시세포종의 발생에 DNA부조화복구유전자의 이상이 중요한 역할을 할 것으로 추정되었다. 산발성각질가시세포종의 발병기전으로서 MIS와 이형접합성소실(loss of heterozygosity, LOH)의 관여 여부를 알아보기 위하여 10명의 산발성각질가시세포종 환자를 대상으로 11개의 microsatellite 표지 (D2S286, D2S367, D3S1317, D5S346, D9S160, D9S171, D10S89, D10S185, D11S904, D17S261 및 D17S520)에서 MIS과 LOH를 조사해 보았다. MIS과 LOH는 D17S261과 D10S185 표지에서 각각 1례씩 발견되었다. 결론적으로 산발성각질가시세포종에서 MIS과 LOH는 각각 10% (1/10)의 낮은 빈도로 나타나서 MIS와 LOH는 산발성각질가시세포종의 발병기전으로 큰 역할을 하지 않는 것으로 생각된다. Tumors from patients with hereditary non-polyposis colorectal cancer (HNPCC) and from a subset of patients with the related Muir-Torre syndrome exhibit a type of a genetic instability, known as microsatellite instability (MIS), which results from mutations that inactivate DNA mismatch repair genes. Keratoacanthomas resemble squamous cell carcinoma but after a period of rapid growth over a few months they involute completely. The detection of MIS in a keratoacanthoma from a patient with Muir-Torre syndrome suggested that defective mismatch repair genes may play a role in the pathogenesis of these neoplasmas. In order to elucidate the significance of both MIS and loss of heterozygosity (LOH) in the pathogenesis of sporadic keratoacanthomas, the presents of MIS and LOH at 11 microsatellite markers (D2S286, D2S367, D3S1317, D5S346, D9S16, D9S171, D10S89, D10S185, D11S904, D17S261, and D17S520) were evaluated in randomly selected sporadic keratoacanthomas. MIS and LOH were found only in 1 of 10 cases at D17S261 and D10S185, respectively. In conclusion, the low frequency of MIS and LOH detected in this study suggests that neither MIS nor LOH appear to be significant in the induction of sporadic keratoacanthomas.

비만자를 위한 효과적인 체중조절 방법에 대한 문헌 연구

김태홍(Tae-Hong Kim),차상은(Shang-Eun Cha),김대광(Dae-Kwang Kim) 한국체육과학회 1998 한국체육과학회지 Vol.7 No.2

암화과정의 기전은 개인마다 다르다

장성익(Chang Sung Ik),김대광(Kim Dae Kwang),김홍태(Kim Hong Tae),이태성(Lee Tae Sung) 대한체질인류학회 1992 해부·생물인류학 (Anat Biol Anthropol) Vol.5 No.2

암화과정의 기전은 개인마다 다르다는 것을 증명하기 위하여 원 발성 난소암과 세포 주 및 원 발성 위암과 세포 주에 대한 세포-분자유선한식 실험을 한 결과를 요약하면 다음과 같다。난소암에서는 염색체가 모두 46 XX 였고 erb B2 가 제l7번 염색체에서 제9번 염색체로 전좌되어 증폭된 결과로 발생된 것도 있고 염색체가 t(l,7)(pter, q2l) 이며 N-ras 암유선자의 증폭된 원인인 것도 있었으며 염색체가 del(1p22) 및 d디(3q2l) 같은 결손 형으로 항암유전자의 비활성화가 원인이 되는 것도 있었다. 그리고 난소암 세포 주 에서는 다양한 수석, 형태학적 이상이 동반되면서 여러 가지 암유전가 활성화되어 있었고 원 발성 암과는 비교 될수 없는 이상을 나타내었다. 그러므로 암화과정 연구에 있어서 암세포 주를 대상으로 실험한 결과는 원 발성 암을 대신 할 수 없다는 것을 알았다. 원 발성 위암에서는 모두 결손 형이 특정이었지만 예마다 염색체 이상 부위가 각각 달랐다. [(del(lq4l), del(5q34), del(9q23), del(12q23)] 또 한 분자유전학식 결과도 세포유전학적 결과와 관계가 없었으며 erb B2 와 N-ras 의 활성화가 특징이었으나 이들 암유전자가 위치하는 염색체 부위에는 세포유전학적인 이상은 발견되지 않았다.

사람 난소암에 대한 암화과정의 기전과 암유전자의 활성화

서영욱(Suh Young Wook),이태성(Lee Tae Sung),장성익(Chang Sung Ik),김대광(Kim Dag Kwang),김홍태(Kim Hong Tae) 대한체질인류학회 1992 해부·생물인류학 (Anat Biol Anthropol) Vol.5 No.2

일차 성 난소암과 난소암 세포 주 (HTB 161)를 대상으로 세포유전학적 분석과 암유전자(erb B2, N ras 및 c myc)의 활성화 유무를 알기위하여 암세포를 배양하여 G-band법으로 염색체를 분석하였고 DNA in situ hybridization과 Southern blot를 시행한 결과는 다음과 같다. Case 1에서는 모든 염색체가 46.XX, HSR이었으며 erb B2가 증폭이 있었으며 case 3에서는 del(1) (p13,p22)가 주 염색체 이상이고 erb B2와 N ras의 증폭 및 c-myc은 모든 case에서 정상이었다. 세포 주에서는 다양한 염색체 이상을 나타내었고 암유전자도 erb B2와 N ras의 증폭 및 c-myc의 재배열이 있었다. 이상을 종합해 볼 때 난소암에서 암유전자 단독으로도 직접 암 화시킬 수 있고 염색체 이상과 관련된 암유전자의 활성화가 암화에 관계되기도 하며 염색체 결손 즉 항암유전자의 비활성화와 암유전자의 활성화가 암화과정에 관여되기도 한다고 생각된다. 결국 난소암에 있어서는 개체마다 그 암화과정의 기준이 모두 다르다고 생각한다.

스포츠에어로빅스 선수들의 몰입경험과 건강증진 생활양식에 관한 연구

윤보경(Yoon Boo-Kyung),김태홍(Kim Tae-Hong),김대광(Kim Dae-Kwang) 한국체육과학회 2002 한국체육과학회지 Vol.11 No.2

This study is to investigate flow experience and health promotion lifestyle of sports athletics. In order to help sports aerobics athletics in performing sports and the sports leaders in teaching the athletics. In order to achieve such purpose I had 111 sports aerobics athletics as the objects of investigation and used the flow experience of Chung, Yong Kak(1997) which was amended and supplemented and the questions on lifestyles for health promotion of Sea, Yon Ok(1995) through analyzing the hypothesis with sex, age, and athletics career as the background variable causes, flow experience as independent variable causes, and health promotion lifestyle as subordinate variable causes. The followings are the conclusions. 1) The result of analysis on the difference between flow experience and health promotion lifestyle according to special variable causes of population statistics science showed significance difference in age and athletics career in recognition flow and action flow, and in health promotion lifestyle there were the significant differences in health management, age, physical and nutrition management, human relations support and stress management while there were significant differences in physical power and nutrition management in athletics career. 2) The variable causes between flow experience and health promotion lifestyle, 2 variable causes there was low standard correlation and statistical significant result. 3) The effect of flow experience to health promotion lifestyle showed that flow experience affected to the realization of the self showing statistically significant explanation.

치과 진료인력의 업무 효율성 증대를 위한 시스템

최용근(Yong-Geun Choi),김귀옥(Kwi-Ok Kim),김대광(Tae-Kwang Kim),백승희(Seung-Hee Baek),박진희(Jin-Hee Park) 대한치과의사협회 2004 대한치과의사협회지 Vol.42 No.1

Trioxalatochromate(Ⅲ) 이온의 Polarographic Reduction에 對한 양이온의 영향

徐宗德,李哲熙,金大廣 영남이공대학 1972 論文集 Vol.1 No.-

Trioxalatochromate() ions are reduced to chrominum(0) in the univalent and the bivalent electrolyte solutions. The reduction potentials of these complex anions depend on the nature and the concentration of cations of electrolytes present in the solution, and shift to less negative potentials with increasing ionic charges of the cation and, at the constant ionic charge, with decreasing radii of the hydrated ion and increasing concentrations of the cation present.

뇌성마비환자에 발생한 다발성 동맥류

강영우,김형태,김홍,김형수,조원현,송완희,김대광 대한혈관외과학회 1999 Vascular Specialist International Vol.15 No.2

A 36-year-old man presented abrupt onset of epigastric pain with high fever for one week after pork meal. Extensive diagnostic studies including blood, urine and stool cultures and other inflammatory factors were done but only leukocytosis, 1: 160 for H Ag of widal test, and increased FDP were positive findings. Abdominal CT showed multifocal hepatic and splenic arterial aneurysms which grew very rapidly during these 10 days. Emergency exploration and ligation at either side of common hepatic artery and the proximal segment of right hepatic artery were done because of impending rupture. The histologic findings of the excised aneurysmal wall were diffuse infiltration of inflammatory cells and medial necrosis. Several other arterial aneurysms at right bracbial, left carotid and branch of superior mesenteric artery were identified on the follow up angiogram. Also noted right brachial artery thrombosis in aneurysmal dilatation site and this was treated by continuous intraarterial infusion of urokinase. Even though the patient had no endocarditis and no growth of blood culture, we consider this multiple artery aneurysms as an infected aneurysm by unknown bacteremia due to pork meal.