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Taxol의 방사면역측정을 위한 I-125 표지화합물 합성
오옥두,최창운,금준섭,박용석,이양호,편웅범 THE KOREAN SOCIETY FOR BIOMEDICAL LABORATORY SCIEN 1997 Journal of biomedical laboratory sciences Vol.3 No.2
Taxol은 diterpenoid구조를 가진 항암제로서, 난소암과 유방암에 탁월한 효과를 보이지만 다른 항암제와 마찬가지로 독성을 가지고 있어 약물의 체내 혈중농도를 모니터링하는 것이 필요하다. 약물의 혈중농도를 모니터링하는 방법은 HPLC법, ELISA법, RIA법 등이 있으나, RIA법이 민감도 측면에서 또한 간편하다는 점에서 장점이 있다. 본 연구에서는 I-125 표지항원을 이용한 방사 면역측정법을 확립하기 위해 먼저 taxol유도체를 합성하였다. 먼저 taxol의 C-13 탄소의 곁가지에 위치한 C-2'부분의 hydroxy기를 succinic anhydride와 반응시켜 2'-hemisuccinyltaxol(Ⅰ)을 합성(반응수율:80%)하였다. 또한 tyramine을 125I로 표지하고 gel chromatography를 통해 정제된 [125I]iodotyramine(Ⅱ)(반응수율:58%)을 얻었다. (Ⅰ)과 (Ⅱ)를 반응시켜 2'-[125I]iodotyramine-hemisuccinyltaxol (Ⅲ) (반응수율:96%)을 얻어 125I 표지항원으로 사용하였다. Taxol에 대한 항체를 획득하기 위해서 (Ⅰ)을 BSA에 접합반응시켜 2'-hemisuccinyltaxol-BSA접합체를 합성하였으며, 이것을 토끼에 면역주사하여 anti-taxol serum을 얻었다. 이 항체에 대한 역가 검정실험에서 1:20의 희석비에서 B/F(%)가 약 40%를 보였다. 이와 같은 결과는 2'-[125I]iodotyramine-hemisuccinyltaxol을 표지항원으로 한 taxol의 방사면역측정 방법으로 혈청내 taxol의 농도측정이 가능함을 제시해 준다. Taxol, an anticancer drug that has diterpenoid conformation, has been used as an effctive chemotherapeutical agent in the treatment of breast and ovarian cancers. Because of its toxicity like other anticancer drugs, monitoring the taxol level in serum is important procedure during cancer therapy. The various monitoring methods using HPLC, ELISA, and RIA have been adopted, and RIA technique is known to be superior than other methods in trems of sensitivity and convenience. In this study, in order to develope taxol RIA system using 125I labelled antigen, first of all we synthesized taxol derivatives. 2'-hemisuccinyltaxol was obtained with about 80% yield by esterification of taxol at C-2' hydroxyl group on C-13 carbon with succinic anhydride. [125I]iodotyramine was prepared with 58% labelling yield by radioiodination of tyramine and purified by gel chromatography. 2'-[125I]iodotyramine-hemisuccinyltaxol, 125I labelled antigen for taxol RIA, was synthesized with 96% yield from conjugation of 2'-hemisuccinyltaxol and [125I] iodotyramine. Anti-taxol serum was produced from the rabbit immunized with 2'-hemisuccinyltaxol-BSA synthesized by 2'-hemisuccinyltaxol and BSA. The antiserum titer was determined by RIA using 2'-[125I]iodotyramine-hemisuccinyltaxol. The titer of 1:20 was obtained with about 40% of B/T. The results suggest that taxol RIA using 125I labelled antigen can be applied to monitor the taxol level in serum.
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Taxol의 방사면역측정을 위한 I-125 표지화합물 합성
오옥두(Ok-Doo Awh),금준섭(Jun-Sub Kum),이양호(Yang-He Lee),박용석(Yong-Serk Park),편웅범(Woong-Beum Pyun),최창운(Chang-Hoon Choi) 대한의생명과학회 1997 Biomedical Science Letters Vol.3 No.2
Taxo은 diterpenoid구조를 가진 항암제로서, 난소암과 유방암에 탁월한 효과를 보이지만 다른 항암제와 마찬가지로 독성을 가지고 있어 약물의 체내 혈중농도를 모니터링하는 것이 필요하다. 약물의 혈중농도를 모니터링하는 방법은 HPLC법, ELISA법, RIA법 등이 있으나, RIA법이 민감도 측면에서 또한 간편하다는 점에서 장점이 있다. 본 연구에서는 I-125 표지항원을 이용한 방사면역측정법을 확립하기 위해 먼저 taxol유도체를 합성하였다. 먼저 taxol의 C-13 탄소의 곁가지에 위치한 C-2’부분의 hydroxy기를 succinic anhydride와 반응시켜 2'-hemisuccinyltaxol (Ⅰ)을 합성 (반응수율: 80%)하였다. 또한 tyramine을 ¹²?I로 표지하고 gel chromatography를 통해 정제된 [¹²?I]iodotyramine (Ⅱ) (반응수율: 58%)을 얻었다. (Ⅰ)과 (Ⅱ)를 반응시켜 2’-[¹²?I]iodotyramine-hemisuccinyltaxol (Ⅲ) (반응수율: 96%)을 얻어 ¹²?I 표지창원으로 사용하였다. Taxo에 대한 항체를 획득하기 위해서 (Ⅰ)을 BSA에 접합 반응시켜 2'-hemisuccinyltaxol-BSA접한체를 합성하였으며, 이것을 토끼에 면역주사하여 anti-taxol serum을 얻었다. 이 항체에 대한 역가 검정실험에서 1:20의 회석비에서 B/F(%)가 약 40%를 보였다. 이와 같은 결과는 2-[¹²?I]iodotyramine-hemisuccinyltaxol을 표지항원으로 한 taxol의 방사면역측정 방법으로 혈청내 taxol의 농도측정이 가능함을 제시 해 준다. Taxol, an anticancer drug that has diterpenoid conformation, has been used as an effective chemotherapeutical agent in the treatment of breast and ovarian cancers. Because of its toxicity like other anticancer drugs, monitoring the taxol level in serum is important procedure during cancer therapy. The various monitoring methods using HPLC, ELISA, and RIA have been adopted, and RIA technique is known to be superior than other methods in trems of sensitivity and convenience. In this study, in order to develope taxol RIA system using ¹²?I labelled antigen, first of all we synthesized taxol derivatives. 2'-hemisuccinyltaxol was obtained with about 80% yield by esterification of taxol at C-2' hydroxyl group on C-l3 carbon with succinic anhydride. [¹²?I] iodotyramine was prepared with 58% labelling yield by radioiodination of tyramine and purified by gel chromatography. 2'-[¹²?I]iodotyramine-hemisuccinyltaxol, ¹²?I labelled antigen for taxol RIA, was synthesized with 96% yield from conjugation of 2'-hemisuccinyltaxol and [¹²?I] iodotyramine. Anti-taxol serum was produced from the rabbit immunized with 2'-hemisuccinyltaxol-BSA synthesized by 2'-hemisuccinyltaxol and BSA. The antiserum titer was determined by RIA using 2'-[¹²?I]iodotyramine-hemisuccinyltaxol. The titer of 1:20 was obtained with about 40% of B/T. The results suggest that taxol RIA using ¹²?I labelled antigen can be applied to monitor the taxol level in serum.
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