脊椎 損傷에 對한 臨床的 考察

高福鉉 충남대학교 대학원 1977 論文集 Vol.8 No.-

The spinal injuries were reported by relatively low incidence than other fracture and dislocation in the body. However, the rate of spine injury tend to increase year by year as the rate of traffic accident and industrial accident have been increased. Author have experienced 332 cases of various type of injuries of spine from Jan. 1968 to July 1976. They were analysed as follow. 1) Out of 268 patient, males were 187 cases (70%) and female 81(30%), among them 74.6% of cases were between 20 to 40 years of age. About 38.1% of cases of the spinal injury were caused by industrial accident. 2) The most common fracture site in the spinal segment were between 12th thoracic spine and 2nd lumbar spine (63.4%) and most common types of spine injury was simple wedge fracture (72.4%). 3) 26 cases (9.6%) were complicated by paraplegia.

척추 손상에 대한 임상적 고찰

고복현,윤승호 충남대학교 의과대학 지역사회의학연구소 1976 충남의대잡지 Vol.3 No.2

The spinal injuries were reported by relatively low incidents than other fracture and dislocation in the body. However, the rate of spine injury tend to increase year by year as the rate of traffic accident and industrial accident have been increased. Author have experienced 332 cases of various type of injuries of spine from Jan, 1968 to July 1976, They were analysed as follow. 1. Out of 268 patient, males were 187 cases(70%) and female 81(30%), among them 74.6% of cases were between 20 to 40 years of age. About 38.1% of cases of the spinal injury were caused by industrial accident. 2. The most common fracture site in the spinal segment were between 12th thoracic spine and 2nd lumbarspine(63.4%) and most common types of spine injury was simple wedge fracture(72.4%). 3. 26 cases (9.6%) were complicated by paraplegia.

2010년 노동정책 방향 및 고용지원사업

고복현 충남발전연구원 2010 충남경제 Vol.2010 No.3

백서(白鼠) 뇌조직(腦組織)에서 Morphine의 Saturable Binding에 미치는 전해질(電解質)의 영향(影響)

고복현,채수완,조규박,Ko, Bok-Hyun,Chae, Soo-Wan,Cho, Kyu-Park 대한약리학회 1982 대한약리학잡지 Vol.18 No.2

전해질농도(電解質濃度)를 달리하고 morphine, naloxone 또는 morphine+naloxone을 가(加)하거나 가(加)하지 않은 modified Krebs-Henseleit bicarbonate buffer용액(溶液)에 흰쥐의 뇌절편(腦切片)을 incubate하여 저온처리(低溫處理)와 media내(內) 전해질조성(電解質組成)이 $(^3H)-morphine$의 saturable binding에 미치는 영향(影響)을 관찰(觀察)하여 다음과 같은 성적(成績)을 얻었다. 1) 저온처리(低溫處理)는 $(^3H)-morphine$의 saturable binding을 현저(顯著)히 증가(增加)시켰고, maximal saturable binding은 증가(增加)시키나 $K_D$치(値)에는 영향(影響)을 미치지 못하였다. 2) 저온처리시(低溫處理時) media내 morphine과 naloxone은 $(^3H)-morphine$ 의 maximal saturable binding 과 $K_D$치(値)를 증가(增加) 시켰다. 3) 저온처리시(低溫處理時) media내(內) $K^+$감소(減少), $Mg^{++}$제거 또는$Mn^{++}$첨가(添加)는 $(^3H)-morphine$의 saturable binding을 현저(顯著)히 증가(增加)시켰고, $Na^+$감소(減少), $Ca^{++}$증가(增加)는 saturable binding에 영향(影響)을 미치지 못하였다. 4) 저온처리시(低溫處理時) media내(內) morphine에 의한 $(^3H)-morphine$의 saturable binding증가(增加)는 media내(內) $Na^+$감소(減少), $K^+$감소(減少), $Mg^{++}$제거 또는 $Mn^{++}$첨가(添加)로는 영향(影響) 받지 않았으나 $Ca^{++}$증가(增加)로 억제(抑制)되었고, media내(內) naloxone에 의한 saturable binding증가(增加)는 $Mn^{++}$첨가(添加)는 영향(影響)받지 않았으나 media내(內) $Na^+$감소(減少), $K^+$감소(減少), $Ca^{++}$증가(增加) 또는 $Mg^{++}$제거로 억제(抑制)되었다. 이상(以上) 실험성적(實驗成績)은 저온처리(低溫處理) 및 저온처리시(低溫處理時) media내(內) morphine 또는 naloxone이 opiate수용체(受容體)의 양적(量的)인 변동(變動)과 또는 친화력(親和力)의 변동(變動)을 유발(誘發)하며, media내(內) 전해질조성(電解質組成)이 이들 변동(變動)에 영향(影響)을 미침을 시사(示唆)한다. The binding in vitro of an opiate agonist, $(^3H)-morphine$, was studied using rat brain slices which were incubated in the modified Krebs-Henseleit bicarbonate buffer solution containing various concentrations of electrolytes with or without morphine, naloxone or morphine+naloxone at $4^{\circ}C$ for 24 hours. The binding of $(^3H)-morphine$ may be seperated into two component; one a saturable binding and the other nonsaturable. The saturable binding may be calculated from the differences in binding observed in the absence and presence of high concentration of morphine. The maximal saturable binding and $K_D$ value in the naive preparations were $0.32{\pm}0.02\;pmole/mg$ protein and $0.75{\pm}0.07\;nM$ respectively. The saturable binding of $(^3H)-morphine$ was significantly increased by low temperature-treatment, while $K_D$ value was not changed. Morphine in the incubation media significantly increased the saturable binding of $(^3H)-morphine$ and $K_D$ value. Naloxone also increased the maximal saturable binding of $(^3H)-morphine$ and $K_D$ value of the drug. Decrease of $K^+\;and\;Mg^{++}$, and addition of $Mn^{++}$ in the incubation media significantly increased the saturable binding of $(^3H)-morphine$, but decrease of $Na^+$and increase of $Ca^{++}$ in the incubation media did not influence the binding. The increment of the saturable binding of $(^3H)-morphine$ by nonlabeled morphine in the incubation media was notaffected by decrease of $Na^+,\;K^+\;or\;Mg^{++}$, or addition of $Mn^{++}$ into the incubation media, but was inhibited by increase of $Ca^{++}$ in the incubation media, while the increment of the saturable binding of $(^3H)-morphine$ was net observed by decrease of $Na^+,\;K^+\;or\;Mg^{++}$, or increase of $Ca^{++}$ in the incubation media. The above results indicate that change of opiate binding sites in quality, i.e. affinity, and quantity, i.e. number of binding sites, may occur by low temperature-treatment in the absence and presence of morphine or naloxone and that electrolytes play role of the changes of opiate binding sites.

Poland 症候群

고복현(Koh Bok Hyun),채한기(Chae Han Kee),이광진(Lee Kwang Jin),윤승호(Yune Seung Ho) 대한정형외과학회 1976 대한정형외과학회지 Vol.11 No.4

쥐 뇌의 Postsynaptic density분획에 존재하는 phosphotyrosine함유 단백질들의 검출

고복현,견일수,문일수 東國大學校醫學硏究所 1994 東國醫學 Vol.2 No.-

정보를 얻어 과정을 학습이라하고, 얻은 정보를 저항는 과정을 기억이라고 한다. 학습과 기억에 대한 생물학적 이해는 아직 미미하지만, 현재 알려진 바로는 사용빈도 및 사용형태에 따른 연접강도의 변화 즉 연접가소성에 의하여 정보가 저장된다. 기억형성과 관련된 연접가소성의 일종인 long-term potentiation (LTP)은 연접효율이 증가된 상태가 장기간 지속되는 현상으로서 장기기억의 연접기전으로 알려져있다. LTP의 형성에는 CaMKII, tyrosine kinase등의 효소가 필수적이다. 본 연구에서는 연접에서 가장 현저한 구조인 postsynaptic density (PSD)에 존재하는 phosphotyrosine 함유 단백질들의 분포를 조사하였다. PSD는 후신경세포막에 존재하는 고전자밀도소기관으로서 세포골격의 특수형태이며, 연접신호전달효율을 조절하는 역학을 한다. 쥐 뇌의 PSD분획 단백질들의 전기영동하여 분리하고, phosphotyrosine특히성 항체를 이용하여 immunoblot분석한 결과 PSD분획에서 15개의 phosphotyrosine함유 peptide를 확인할 수 있었다. 이들중 특히 180kD 크기의 peptide는 상대적으로 많은 phosphotyrosine을 함유하였다. 이 peptide는 NMDA수용체 2B (NR2B)의 항체에 의하여 면역침강되었다. 이러한 결과들은 PSD문획에는 여러 가지 단백질들이 tyrosine kinase에 의하여 인산화되면, 특히 180kD의 peptide는 주요 phosphotyrosine함유 단백질로서 NR2B임을 시사하며, tyroisne인산화에 의하여 그 기능이 조절됨을 시사한다. It is believed that information is stored as usage-dependent changes in the synaptic strength. One model of such synaptic plasticity is long-term potentiation (LTP), a persistent increase in synaptic efficacy. LTP is believed to be a synpatic mechanism underlying the long-term memory. The ?? influx through NMDA receptors, a subtype of glutamate receptors, is essential for induction of LTP. Although some kinases such as CaMKII nd tyrosine kinase are known to be essential for induction of LTP, the detailed understanding of signal transduction pathways downstream of ?? influx is far from completion. In this study we searched for phosphotyrosine-containing proteins in rat postsynaptic density (PSD) fractions. PSD is a dynamic, protein-rich cytosketal specialization tightly apposed to the postsynaptic membrane. PSD is thought to be involved in synaptic regulation. Phosphotyrosines provide binding sites for SH2 domains. Binding of SH2 domain-containing proteins trigger the next step of signal cascades. Westen blot analyses revealed that the PSD fraction contained many proteins recognized by phosphotyrosine-specific antibodies. This result implies that the signaling through tyrosine-phosphorylation may play important roles in synaptic regulation such as LTP formation.

N-octylglucoside (NOG)-soluble 110 kD protein of a rat Postsynaptic density fraction is a brain hexokinase

고복현,문일수 東國大學校醫學硏究所 1994 東國醫學 Vol.2 No.-

정보는 뇌에서 물질적인 형태로 지정된다. 이런 물질적인 형태의 성격에 대하여는 아직 알려진 바가 미미하지만, 사용빈도에 따른 연접강도의 수정에 의하여 연접에 정보가 저장된다고 신경생물학자들은 믿고 있다. 연접의 이러한 장기적인 수정의 일종인 long-term potentiation(LTP)은 연접효율이 증가된 상태가 장기간 유지되는 현상을 지칭한다. LTP를 이해하기 위하여는 연접의 구조를 분자수준에서 이해할 필요가 있다. 포유류 중추신경계내의 현저한 구조중 하나는 postsynaptic density(PSD)이다. PSD는 후신경세포막에 밀착해있는 역동적인 세포골격구조이다. PSD의 구성에 대한 정보가 거의 없음에도 불구하고 연접전세포막의 활동구역과 나란히 위치하고 LTP형성시 모양이 변화되는 것으로보아 연접에서의 신호전달을 조절하는 것으로 가정된다. 본 연구에서는 아미노산배열순서결정방법을 이용하여 분자량 110 kD의 PSD단백질(PSD-NOG110)을 동정하였다. 쥐의 전뇌에서 얻은 PSD분획을 약한 세척제인 N-octyl glucoside로 처리하였을 때 용해되는 것으로 보아 이 단백질은 PSD에 약하게 결합하고 있는 것으로 사료된다. 이 단백질을 trypsin처리하여 생성된 두 펩티드을 HPLC로 순수분리하여 이미노말단 아미노산결정방법을 이용하여 아미노산배열순서를 결정하였다. 이를 이용하여 단백질정보은행을 컴퓨터조회한 결과 이 단백질이 뇌 특이성 hexokinase임을 알았다. PSD내에 hexokinase가 많이 존재한다는 사실은 PSD가 에너지를 많이 필요로하는 역동적인 구조라는 개념을 지지한다. Information is stored in our brain as a physical entity. Although the physical nature of this physical entity is not understood clearly, neurobiologists generally agree that information is stored in the synapse by usage-dependent modification os the synpatic strengh. One from of such modification that last long periods is long-term potentiation (LTP). LTP is persistant increase in synaptic efficacy. In order to understand LTP, it is essential to characterize the synaptic structure at the molecular level. One of prominent structures in the mammalian central nervous system is postsynaptic densities(PSDs). PSD is a dynamic cytoskeletal structure that appears to adhere tightly to the postsynaptic membrane. Although its molecular composition is not understood well, PSD is thought to regulate synaptic transmission, because it is closely apposed to the presynaptic active zone and its morphology is changed upon LTP formation. In this study, we used protein sequencing technologies to identify a PSD protein of molecular weight about 110 kD, thus named PSD-NOG110. Rat forebrain PSD fractions were first extracted with a mild detergent, N-octyl glucoside. The 11- kD protein band was solubilized in this treatment indicating its loose association with the PSD. We have succeeded i sequencing two peptides generated by tryptic digestion and purified through HPLC. Computer analyses of the sequence information showed that the 110 kD protein is a brain-specific hexokinase. The presence of hexokinase in the PSD supports the concept that PSD is a highly energy-requiring and dynamic structure.

Transient global ischemia increases apoptosis and neurogenesis in rat dentate gyrus

Ko, Bok Hyun 東國大學校醫學硏究所 2003 東國醫學 Vol.10 No.2

흰쥐 치아이랑(dentate gyrus)의 과립세포들은 발생 중 뿐 만 아니라 성체에서도 형성되며 과립세포들에서의 세포자연사는 일생을 통하여 계속 진행된다는 것이 알려져 있다. 본 실험은 허혈로 초래되는 성체 흰쥐 치아이랑 과립세포들의 신경발생(neurogenesis)과 세포자연사(apoptosis) 그리고 이와 연관된 Bcl-2의 발현변화의 연관성을 알아보기 위하여 수행되었다. 본 실험에서는 또한 NMDA 수용체의 양적변화가 허혈로 초래되는 세포자연사 혹은 신경발생에 관여할 수 있다는 가설을 설정하였다. TUNEL 실험에서 허혈로 초래된 세포자연사는 치아이랑의 과립세포층 (granular zone)에서 주로 발생됨이 관찰되었고 proliferating cell nuclear antigen (PCNA), glial fibrillary acidic protein (GFAP), synapsin-α를 이용한 면역세포화학 실험을 통하여 신경발생은 주로 치아이랑의 과립세포하층 (subgranular zone)에서 발생한다는 것이 관찰되었다. Bcl-2 면역반응성의 점차적 증가는 치아이랑 과립세포하층에서의 신경발생시기와 일치하였으나 과립세포층의 세포자연사의 시기와는 일치하지 않았다. NR2A, NR2B의 anti-sense probe를 이용한 in situ hybridization에서는 허혈로 인한 NMDA 수용체의 유의한 감소가 치아이랑 과립세포들에서 관찰되었다. 이러한 결과들은 치아이랑 과립세포층의 세포자연사를 유도하는 허혈이 치아이랑에서의 신경발생의 직접적 자극이 될 수 있음을 제시한다. 또한 치아이랑 내 과립세포들의 자연사 여부는 과립세포들의 성숙정도와 관련이 있을 것으로 생각되며 이는 Bcl-2의 발현증가 여부와 밀접한 관련이 있을 것으로 생각된다. 마지막으로 본 실험은 허혈이 NMDA 수용체의 숫적 감소를 야기함으로서 치아이랑 과립세포하층에서의 신경발생을 촉진시킬 수 있는 가능성을 제시하였다. Granule neurons of the rat dentate gyrus (DG) are born in adulthood as well as during development. Apoptotic cell death also occurs normally in the population throughout the life of the rat brain. The present work was designed to determine whether the transient global ischemia can accelerate proliferation and apoptosis of DG granule cells which might be correlated with expression of Bcl-2 protein within the ischemic DG. We also hypothesized that the amount of functional N-methyl-D-aspartate (NMDA) receptor could be involved in ischemia-induced apoptosis or neurogenesis. TUNEL study revealed that significant apoptosis was in the granular zone (GZ) of the ischemic DG. However, immunocytochemical studies with proliferating cell nuclear antigen (PCNA), glial fibrillary acidic protein (GFAP) and synapsin-α demonstrated that neurogenesis occurred in subgranular zone (SGZ) of the ischemic DG. The gradual increase of the Bcl-2 expression is paralleled with neurogenesis in the SGZ but not with apoptosis in the GZ of the DG. In situ hybridization using the antisense probe to the NR2A and NR2B subunits revealed significant decrease of the functional NMDA receptors in the ischemic DG. These results suggest that neurogenesis in the DG may be stimulated by the ischemia which leads to the apoptotic cell death in the GZ of the DG. In addition, granule cell apoptosis in the DG depends on the expression of the Bcl-2 which determine the maturity of granule cells. Finally, we suggest the possibility that reduction of the dentate NMDA receptors by ischemia may be assocated with stimulation of neurogenesis in the SGZ of the DG.

Reactive Astrocytosis in Rat Hippocampal Formation Following Forebrain Ischemia

Ko, Bok Hyun,Kim, Jae-Gwang 東國大學校醫學硏究所 2004 東國醫學 Vol.11 No.2

본 실험은 흰쥐의 평균동맥압을 50 mmHg 정도로 낮춘 저혈압 상태에서 양쪽 온목동맥을 10분간 결찰하여 전반적 허혈을 초래 후 해마형성체에서 신경세포의 변화와 별아교세포의 GFAP의 발현변화를 연관하여 관찰하였다. Glial fibrillary acidic protein (GFAP) 항체의 염색은 면역조직화학법을 이용하였으며 신경세포의 괴사정도는 형태학적으로 판별하기 위하여 H&E 염색을 이용하였다. 허혈 후 8시간까지의 초기 허혈 후 단계에서 GFAP의 면역반응성은 대조군에 비해 미약한 증가를 보였으며 이는 형태학적으로 약간의 괴사세포가 존재하는 CA3와 DG 그리고 괴사세포가 관찰되지 않는 CA1과 subiculum에서 함께 관찰되었다. 이에 반해 허혈 후 4일째의 후기 허혈 후 단계에서의 GFAP 면역반응성의 의미있는 증가는 신경세포들의 대량괴사가 관찰되는 subiculum과 DG의 hilar 지역에서 국한되어 나타났다. 이러한 결과들은 후기 허혈 후 단계에서 신경세포들의 대량괴사가 관찰되는 지역에 국한되어 나타나는 형태학적으로 변형된 별아교세포들의 증식이 주위 신경세포의 손상에 기여할 수 있다는 것을 의미한다. In the present studies, changes of the glial fibrillary acidic protein (GFAP) expression in the astrocytes of the rat hippocampal formation were examined in response to the bilateral carotid artery occlusion for 10 minutes along with a decrease of mean arterial blood pressure (MABP) to 50 mmHg. Their relations to neuronal viability were also studied by H&E staining. In early postischemic period, mild increase of the GFAP expression was observed and this was not only confined to the mild-necrotic (CA3 and dentate gyrus) regions but also in the non-necrotic regions (CA1 and subiculum) at postischemic 8 h. In contrast, in late phase of the postischemia, a marked increase of the GFAP expression was only confined to the regions of massive necrosis such as subiculum and inner granular cell layer of dentate gyrus. Therefore, reactive astrocytosis with upregulation of the GFAP in the late postischemic period in the regions of massive necrosis may contribute to the damages in the neighboring neurons.

Sequencing of a 180 kDa Protein in the Rat Postsynaptic Density Fraction

Moon, Il Soo,Ko, Bok Hyun,Jin, Deuk Hee 東國大學校醫學硏究所 1995 東國醫學 Vol.3 No.-

신경세포들간의 신호전달은 연접이라고 불리는 특수한 접촉부위를 통하여 일어난다. 연접을 통한 신호전달의 효율은 고정된 것이 아니라 사용빈도와 사용형태에 따라 수정된다. 이러한 연접효율의 조절은 연접후요소가 중요한 역할을 한다. 연접후요소중 연접신호전달을 조절하는 기능을 갖는 중요한 구조는 PSD이다. 현재까지 분자생물학 및 면역학적인 방법을 이용하여 PSD내에 여러가지 신호전달물질이 있음이 밝혀졌다. 본 연구에서는 SDS-PAGE 및 최근에 개발된 아미노산배열순서결정방법을 이용하여 PSD에 존재하는 180 kDa 크기의 단백질(PSD-180)을 동정하였다. SDS-PAGE를 이용하여 PSD-180를 분리하고, Elutrap을 이용하여 electroelution하였는바 70%의 높은 수율을 보였다. PSD-180를 trypsin처리하고, 펲티드를 RP-HPLC로 분획하였다. 이들 분획중 3개를 순수분리하여 아미노산배열을 결정하고, 이를 이용하여 단백질정보은행에 조회한 결과 유사한 단백질을 발견하지 못하였다. 이는 PSD-180가 아직 보고되지 않은 새로운 단백질임을 시사한다. Nerve cells communicate through special contract sites called synapses. The efficiency of synaptic transmission is not fixed but modifiable depending on the frequency and pattern of usage. This synaptic regulation occurs at least in part by modulation of the postsynaptic elements. One synaptic structure which has a regulatory role in synaptic transmission is the postsynaptic density (PSD). Molecular and immunological studies have identified many regulatory proteins in the PSD. In the study, we have applied SDS-PAGE and recently developed protein microsequencing technologies to sequence an 180 kDa protein in the PSD fraction, termed PSD-180. The electroelution using an Elutrap device was very efficienct (70% yield). When the eluted protein was digested with trypsin and chromatographed on an reverse-phase HPLC column, it produced a very complex profile. Three peptides from HPLC peaks were purified and determined for amino acid sequences. Databank search did not match any known proteins indicating that PSD-180 is a new protein.