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전사인자 OsNAC58 과발현을 통한 벼 흰잎마름병 저항성 증진 벼
박상렬,김혜선,이경실,황덕주,배신철,안일평,이서현,김선태,Park, Sang Ryeol,Kim, Hye Seon,Lee, Kyong Sil,Hwang, Duk-Ju,Bae, Shin-Chul,Ahn, Il-Pyung,Lee, Seo Hyun,Kim, Sun Tae 한국식물생명공학회 2017 식물생명공학회지 Vol.44 No.2
벼는 중요한 식량작물이며 지속적으로 벼흰잎마름병균, 도열병균, 잎집무늬마름병균, 바이러스 등 여러 병원균에 의해 수확량이 영향을 받고 있다. 이들 중 Xanthomonas oryzae pv. oryzae (Xoo)에 의해 유발되는 벼흰잎마름병은 세계 벼 재배지역에 발병하여 막대한 피해를 주고 있어 문제가 되고 있다. 따라서 생물적/비생물적 스트레스 저항성에 관여한다고 알려져 있는 식물 특이 전사인자 중의 하나인 NAC(NAM, ATAF, and CUC) 전사인자를 이용하여 벼의 벼흰잎마름병에 대한 저항성을 증진시키고자 하였다. 본 연구에서는 벼에서 NAC 전사인자 중 하나인 OsNAC58 유전자를 분리해 냈으며 아미노산 서열을 바탕으로 분석해 본 결과이 유전자는 5개의 NAC전사인자 group 중에서도 stress와 많은 관련이 있다고 알려진 group III에 속하였다. 또한 세포 내 위치를 확인하기 위해 GFP와 융합한 단백질을 이용해 조사해 본 세포 내에서도 핵에 위치하는 것으로 조사되었다. OsNAC58 유전자의 생물학적 기능 분석을 위해 이 유전자를 과발현시킨 벼 형질전환체를 만들었다. 동진벼를 기준으로 보다 발현이 높은 13개 계통을 선발하였으며, 이들 계통에 벼흰잎마름병균을 접종하여 병저항성을 검정한 결과 동진벼에 비해 벼흰잎마름병에 대한 저항성이 크게 증대함을 보였다. 이것은 벼의 OsNAC58 유전자가 벼흰잎마름병균 침입 시 숙주인 벼 핵 내에서 벼의 병저항성 기작을 조절하여 나타난 결과로 추정된다. Bacterial blight in rice caused by Xanthomonas oryzae pv. oryzae (Xoo) greatly reduces the growth and productivity of this important food crop. Therefore, we sought to increase the resistance of rice to bacterial blight by using a NAC (NAM, ATAF, and CUC) transcription factor, one of the plant-specific transcription factors that is known to be involved in biotic/abiotic stress resistance. By isolating the OsNAC58 gene from rice and analyzing its biological functions related to Xoo resistance, phylogenetic analysis showed that OsNAC58 belongs to group III. To investigate the biological relationship between bacterial leaf blight (BLB) and OsNAC58 in rice, we constructed a vector for overexpression in rice and generated transgenic rice. The expression analysis resulting from use of RT-PCR showed that OsNAC58-overexpressed transgenic rice exhibited higher levels of OsNAC58 expression than wild types. Further, subcellular localization analysis using rice protoplasts showed that the 35S/OsNAC58-SmGFP fusion protein was localized in the nuclei. Thirteen OsNAC58-overexpressed transgenic rice lines, with high expression levels of OsNAC58, showed more resistant to Xoo than did the wild types. Together, these results suggest that the OsNAC58 gene of rice regulates the rice disease resistance mechanism in the nucleus upon invasion of the rice bacterial blight pathogen Xoo.
Isolation and Characterization of Rice OsHRL Gene Related to Bacterial Blight Resistance
박상렬,신동진,Min Gab Kim,Duk-Ju Hwang,Shin-Chul Bae,김정구,Bu Young Yi,Myung Ok Byun,문석준 한국식물병리학회 2010 Plant Pathology Journal Vol.26 No.4
The expression of HR-like lesion inducing gene of Oryza sativa (OsHRL) was slightly increased by Xanthomonas oryzae pv. oryzae (Xoo) infection. Transgenic rice plants over-expressing OsHRL gene were challenged with Xoo and the development of disease symptoms were examined to investigate the effect of OsHRL gene expression on plant defense responses. The over-expression of OsHRL increased disease resistance against Xoo compared with wild type plants.
전사인자 OsNAC58 과발현을 통한 벼 흰잎마름병 저항성 증진 벼
박상렬,김혜선,이경실,황덕주,배신철,안일평,이서현,김선태 한국식물생명공학회 2017 JOURNAL OF PLANT BIOTECHNOLOGY Vol.44 No.2
Bacterial blight in rice caused by Xanthomonas oryzae pv. oryzae (Xoo) greatly reduces the growth and productivity of this important food crop. Therefore, we sought to increase the resistance of rice to bacterial blight by using a NAC (NAM, ATAF, and CUC) transcription factor, one of the plant-specific transcription factors that is known to be involved in biotic/abiotic stress resistance. By isolating the OsNAC58 gene from rice and analyzing its biological functions related to Xoo resistance, phylogenetic analysis showed that OsNAC58 belongs to group III. To investigate the biological relationship between bacterial leaf blight (BLB) and OsNAC58 in rice, we constructed a vector for overexpression in rice and generated transgenic rice. The expression analysis resulting from use of RT-PCR showed that OsNAC58- overexpressed transgenic rice exhibited higher levels of OsNAC58 expression than wild types. Further, subcellular localization analysis using rice protoplasts showed that the 35S/OsNAC58-SmGFP fusion protein was localized in the nuclei. Thirteen OsNAC58-overexpressed transgenic rice lines, with high expression levels of OsNAC58, showed more resistant to Xoo than did the wild types. Together, these results suggest that the OsNAC58 gene of rice regulates the rice disease resistance mechanism in the nucleus upon invasion of the rice bacterial blight pathogen Xoo.
국화 흰녹병균 생태 및 생명공학적 진단에 대한 연구동향
박상렬,안일평,황덕주,장안철,임기병,배신철 한국화훼산업육성협회 2013 화훼연구 Vol.21 No.3
Chrysanthemum is an economically important horticultural crop in chrysanthemum-growing areas including Korea. White rust is the most dangerous disease caused by an obligate pathogen Puccinia horiana. Control of white rust is dependent on chemical treatment and other cultural practices. However, chemical control of disease results in appearance of resistant race of white rust pathogen. Hence, development of chrysanthemum cultivar resistant to white rust is the most desirable. Nevertheless, not much research has been done about white rust pathogen (e.g infection process, pathogen diversity, etc). In order to investigate the way of chrysanthemum to overcome white rust we reviewed literatures reported about white rust pathogen, especially in terms of disease/life cycle and ecology of P. horiana and disease assessment based on polymerase chain reaction in this study. This review will be helpful for disease control and molecular breeding of chrysanthemum resistant to white rust. 국화는 국내외적으로 주요 화훼작물이지만 국화 흰녹병은 안정적 생산에 큰 걸림돌이 되고 있다. 현재까지 국화 흰녹병 방제는 농약살포를 통한 화학적 방제와 다습한 재배환경을 개선하는 재배적 방제에 의존하고 있지만, 살균제 저항성을 갖는 새로운 병원균 출현으로 농약 살포를 통한 병 방제에는 한계가 있어 병 저항성 품종 개발이 절실하다. 흰녹병은 순활물기생균인 Puccinia horiana에 의해 발생하는 곰팡이 병으로 이로 인한 경제적 손실이 크지만, 다른 주요 작물병과 비교하여 상대적으로 연구가 미흡하다. 특히 병원균의 전파 경로와 병원성의 다양성(pathogenic diversity), 병원균 침입기작 및 기주식물과의 상호작용에 대한 전반적인 지식 부족으로 효과적 농약 살포 기준 설정과 병저항성 품종개발에 어려움이 있다. 따라서 본 논문에서는 이러한 과제를 해결하는데 기초자료를 제공하고자 각 연구분야별로 현재까지 발표된 연구결과를 정리하고 앞으로 요구되는 연구과제에 대하여 모색하여 보았다. 특히 효과적 약제처리 기준 설정과 병저항성 품종 개발의 출발점이 되는 흰녹병균의 생활사와 생태, 병원균 DNA 정보를 이용한 조기진단, 병원균의 병원형 등에 관해 현재까지의 연구결과들을 정리하였다. 앞으로 흰녹병균의 식물체 침입 기작에 관한 종합적 이해의 폭을 넓히고, 병원균 침입 시 식물체내에서 발병과 병저항성 유도 요인에 대한 분자 수준에서 연구가 진행된다면 흰녹병균 저항성 품종 육성 시기를 앞당길 수 있으리라 사료된다.
무름병균 Erwinia chrysanthemi PY35 의 CMCase isozymes 분리
박상렬,윤한대,조수정 한국농화학회 1999 Applied Biological Chemistry (Appl Biol Chem) Vol.42 No.3
Soft-rot bacterial pathogen, Erwinia sp., was isolated from Chinese cabbage tissue showing soft-rot symptom. This bacterial strain caused soft-rot to Chinese cabbage and potato, and identified as Erwinia chrysanthemi PY35(Ech PY35). Ech PY35 have extracellular CMCase, pectinase, pectate lyase, and protease activity, but not hemicellulase activity. The results of the microscopy showed that Chinese cabbage tissue and potato tissue were macerated by infection of Ech PY35. In analysis of the CMCases activity in the total protein of Ech PY35, three CMCases were detected as intracellular protein while two CMCases were as extracellular protein by CMC-SDS-PAGE direct stain method.
전사인자 OsNAC69-과발현을 통한 흰잎마름병 저항성 벼 제작
박상렬,차은미,문석준,신동진,황덕주,안일평,배신철 한국육종학회 2011 한국육종학회지 Vol.43 No.5
식물 특이 NAC (NAM, ATAF, and CUC) 전사인자는 식물 성장, 발달과 스트레스에 대한 저항성에 관여한다고 알려져 있다. 본 연구에서는 벼의 NAC 전사인자 중의 하나인 OsNAC69 유전자를 분리하였으며 유추된 아미노산 서열을 바탕으로 조사해본 결과 이 유전자는 NAC 전사인자의 5개 group 중에서 group II에 속하였다. 흰잎마름병균인 X. oryzae pv. oryzae (Xoo)를 처리하여 발현을 분석한 결과 접종 1시간 이 Plant specific gene family, NAC (NAM, ATAF, and CUC) transcription factors have been characterized for their roles in plant growth, development, and stress tolerance. In this study, we isolated OsNAC69 gene and analyzed expression level by inoculation of bacterial leaf blight pathogen, Xanthomonas oryzae pv. oryzae (Xoo). NAC transcription factor family can be divided into five groups (I-V). On the basis of phylogenetic analysis, OsNAC69 was fall into group II. OsNAC69 was strongly induced 1 hr after infected with Xoo. To investigate its biological function in the rice, we constructed vector for overexpression in rice, and then generated transgenic rice lines. Gene expression of OsNAC69-overexpressed transgenic rice lines were analyzed by northern blot. Analysis of disease resistance to pathogen Xoo, nine OsNAC69-overexpressed transgenic rice lines showing high expression level of OsNAC69 were shown more resistant than wild type. These results suggest that OsNAC69 gene may play regulatory role during pathogen infection.
박상렬 濟州大學校 海洋硏究所 2002 해양과환경연구소 연구논문집 Vol.26 No.-
본 논문은 외부 프리스트레싱으로 보강된 콘크리트보에 있어서 내부 부착 및 외부 비부착 프리스트레싱텐던의 극한웅력에 대하여 내부 텐던 극한웅력의 경부 외부 프리스트레싱 강재의 영향을, 외부 텐던 극한웅력의 경우 철근 및 내부 프리스트레싱 강재의 영향을 중심으로 서술하고 있다. 극한웅력을 구하는 프리스트레싱 강재를 제외한 나머지 강재 효과를 고려하여 외부 프리스트레싱으로 보강된 RC나 PC, 혹은 부분 PC 보에 적용하기 위하여 독립적인 ACI 시방식과 Naaman 식을 확장, 수정하였다. 이러한 수정제안식들은 Harajli의 실험결과와 비교되었다. 본 연구는 중립축과 프리스트레싱 강재 깊이와의 비, C_u/d_p가 내부 및 외부 프리스트레싱 강재의 극한웅력 예측에 합리적인 인자임을 보여주고 있다. An investigation of the stress in the internal bonded and external unbonded prestressing tendons at ultimate in concrete beams strengthened by external prestressing is described with particular emphasis on the influences of external tendons on the stress in internal tendons and reinforcing bars and internal tendons on the stress in external tendons. To account for these effects of the other reinforcements and apply to the concrete beams strengthened by external prestressing. ACI and Naaman's independent equations for the calculation of ultimate stress of internal and external pretressing tendons are expanded and modified. The modified and proposed equations are compared with the test results conducted by Harajli. This study show that the ratio of the depths of neutral axis and tendons appears to be a rational parameter for the prediction of the ultimate stress in internal and external prestressing tendons.