제지폐수의 슬러지의 탈수 및 소각특성

김종보,은종극,박승조 ( Jong Bo Kim,Jong Keug Eun,Seung Cho Park ) 한국폐기물자원순환학회(구 한국폐기물학회) 1993 한국폐기물자원순환학회지 Vol.10 No.2

유전자총과 아그로박테리움을 이용한 여러 가지 한국 잔디류의 형질전환체계 확립

김종보,김경덕,박대섭,Kim Jong-Bo,Kim Kyong-Duck,Park Dae-Sup 한국잔디학회 2004 한국잔디학회지 Vol.18 No.3

다양한 Zoysiagrass 4가지 품종들을 식물재료로 사용하여 Agrobacterium만 이용한 방법 그리고 particle bombardment로 배발생캘러스에 상처를 낸 후, Agrobacterium으로 공동배양 시키는 2가지 다른 형질전환 방법을 비교하였다. 예비실험에서 일반적으로 형질전환에 널리 사용되는 kanamycin과 PPT(phospinitricin)의 적적선발농도에 대해서 실험하였는데, kanamycin의 경우 300mg/l 그리고 PPT의 경위 50mg/l의 농도에서 가장 효과적인 선발 효율을 나타내었다. Agrobacterium을 이용한 형질전환은 Agrobacterium을 2일간 배양시킨 다음, 박테리아 농도를 O.D 600nm=1.0-1.2로 맞추고, 배발생캘러스를 30분간 간염 시키는 방법이 효과적이었는데, particle bombardment를 이용하여 캘러스에 상처를 유발시킨 후, Agrobacterium으로 감염시키면 3배 이상 높은 형질전환 수율을 획득할 수 있었다. 이상의 결과는 한국잔디 형질전환에 있어서 particle bombardment과 Agrobacterium을 병행하여 실시한 최초의 보고이고, 이러한 시스템을 기반으로 하여 향후 한국잔디를 포함하여 다른 난지형 및 한지형 잔디의 품종개량에 널리 이용되리라 생각된다. In this report, several factors such as infection time and concentration of bacterial suspension, influencing on transient gene expression in Agrobacterium-mediated transformation were evaluated. An appropriate concentration (O.D 600nm = 1.0-1.2) of bateria and 30 min of infection time showed a higher level of GUS expression. To improve transformation efficiency (TE), friable embryogenic calli (FEC) were bombarded by tungsten particles without plasmid DNA, and then co-cultivated with A. tumefaciens LBA4404 which contains pTOK233 super binary vector, carrying neomycin phosphotransferase (NPTII), hygromycin phosphotransferase (hpt) and$\beta-glucuronidase$ (GUS) genes. Three days after co-cultivation with A. tumefaciens and particle bombardment, FEC cultures were transferred to the selection medium (SM: MS medium supplemented with BA 1mg/l, hygromycin 100mg/l, cefotaxime 250 mg/l and vancomycin 200mg/l). They were cultured for 2 weeks and then transferred to the second SM containing hygromycin 50mg/l, cefotaxime 200 mg/l and vancomycin 100mg/l. Later, stable GUS expression was detected 4 to 6 weeks after transfer to the SM. Further, TE from Agrobacterium-mediated transformation after particle bombardment increased to about 3-folds compared with Agrobacterium-mediated transformation without particle bombardment. In the present study, we established an efficient transformation protocol of zoysiagrass by using A. tumefaciens in the combination with particle bombardment for the first time.

유전자총 실험조건 최적화를 통한 형질전환 백합 식물체 생산

김종보,Kim, Jong Bo 한국식물생명공학회 2017 식물생명공학회지 Vol.44 No.1

유전자총을 이용한 형질전환 체계와 PPT (D-L-phosphinothricin) 선발을 통하여 나리 인편조직으로부터 형질전환 식물체가 획득되었다. 본 연구에서 나리 '레드플레임' 품종의 인편조직에 선발유전자로 제초제저항성 유전자인 bar 유전자 그리고 내염성과 내건성의 복합환경저항성을 나타내는 AtSIZ 유전자를 목적유전자로 가지고 있는 플라스미드를 금입자에 코팅해서 유전자총을 이용해서 형질전환 하였다. 이러한 형질전환 체계 확립을 위해 헬륨가스 압력은 1,100 psi, 금 입자크기는 $1.0{\mu}m$ 그리고 목적 절편체까지의 거리는 6 cm 그리고 유전자총 처리 24시간 전과 후에 0.2 M sorbitol과 0.2 M mannitol을 혼합해서 MS배지에 첨가한 프로토콜로부터 우수한 형질전환 결과를 나타내었다. 유전자총 발사 처리 후, 1주간 선발제로 사용되는 PPT가 없는 MS 배지로 이식하여 배양 후, PPT 10 mg/l이 첨가된 선발배지에서 4주 간격의 계대배양을 통해 8-12주간 선발과정을 거친다. PPT 선발 배지에서 생존한 신초가 형성된 형질전환 나리 인편 조직들을 호르몬이 없는 MS 배지로 다시 옮겨주면 발근 및 추가 생육이 이루어진다. 생존한 형질전환 나리 기내 소식물체들로부터 PCR 검정을 통해 선발유전자인 bar 유전자 그리고 목적유전자인 AtSIZ 유전자의 도입이 확인되었다. 결론적으로 100여개의 나리 인편조직을 본 연구에서 확립된 유전자총 실험프로토콜을 이용하면 대략적으로 형질전환 나리 17-18 개체를 획득할 수 있으며 본 연구에 기술된 유전자 총 매개 형질전환 체계는 추가적인 보완이 이루어지면, 향후 나리 육종 프로그램에 기여할 것이다. Transgenic lily plants have been obtained after particle bombardment, using PDS-1000/He system and scale explants of lilies, followed by PPT (D-L-phosphinothricin) selection. In this study, scales of the lily plants cv. 'red flame' were bombarded with a plasmid containing the bar gene as a selectable marker, and the AtSIZ gene as a gene of interest, showing salt tolerance and drought tolerance respectively, and both being driven by the CaMV 35S promoter. For optimization of a protocol, factors which optimized and showed a high transformation efficiency under following conditions, were considered: a bombardment pressure of 1100 psi, a target distance of 6 cm and $1.0{\mu}m$ of gold particle, and 24-h pre-culture and post-culture on MS medium containing 0.2 M sorbitol and 0.2 M mannitol as osmoticum agents. After bombardment, all the bombarded scales of lily were transferred to MS medium without selective agents, for a week. Subsequently, these bombarded scales were transferred to a selection MS medium containing 10 mg/l PPT, and incubated for a month for further selection, after which they were cultured for another 4-8 weeks with a 4-week subculture regime on the same selection medium. After transferring into hormone-free MS medium, the PPT-resistant scales with shoots were successfully rooted and regenerated into plantlets. PCR analysis revealed that the surviving putatively transformed plantlets indicated the presence of both the bar gene and the AtSIZ gene. In conclusion, when 100 scales of lily cv. Red flame are bombarded, this study produced approximately 17-18 transgenic plantlets with an optimized bombardment protocol. The protocol described here can contribute to the breeding program of lilies.

다중회귀분석을 이용한 악취 관리지역에서의 복합취기강도와 개별악취물질들의 관계에 대한 연구

김종보,정상진,Kim, Jong-Bo,Jeong, Sang-Jin 한국환경보건학회 2009 한국환경보건학회지 Vol.35 No.3

We investigated a trait of odor and the relationship between odor unit and odorous compounds using multiple regression analysis based on data compiled from Sihwa (SIC), Banwol (BIC), Banwol plating (BPIC) and Poseung industrial complex (PIC). These areas are odor control areas in Gyeonggi province. It was revealed that $NH_3$ and styrene concentrations in SIC and BPIC were relatively higher and $H_2S$ concentration especially in mc was more than five times higher than other areas. As a result of regression analysis using SAS, intensity of odor unit was highly related to concentrations of $H_2S$, TMA, styrene and n-valeraldehyde in SIC, $H_2S$, acetaldehyde, and butyraldehyde in BPIC and $NH_3$ in BIC.

Picloram을 이용한 효율적인 백합 캘러스 유도 체계 확립

김종보,Kim, Jong Bo 국제문화기술진흥원 2021 The Journal of the Convergence on Culture Technolo Vol.7 No.3

나리는 세계 5대 절화에 속하는 주요 절화 중의 하나이며, 아시아, 유라시아 및 북아메리카 등 다양한 지역에 서식한다. 나리 신품종개발을 위해서는 교배, 돌연변이 및 선발육종 기술 외에 조직배양 기술을 포함하는 생명공학기술 도입을 통한 신품종 육성이 필요한데 조직배양 체계확립은 나리 육종체계에 있어서 필수적인 요소 중 하나이다. 조직배양의 많은 분야 중 배발생캘러스를 이용하여 식물체 재분화 증식 체계확립이 많은 작물에서 연구 중인데 본 연구에서도 배발생캘러스 유도에 사용되는 오옥신 중 picloram을 다양한 농도로 처리하여 최적의 배발생캘러스 유도 농도를 선정하고자 실험을 수행하였다. 실험 결과, 3-4주 후부터 CEC (compact embryogenic callus), FEC (friable embryogenic callus) 및 백색캘러스 이렇게 3가지 형태 캘러스가 발생했는데 1.0 mg/l 처리구에서 CEC와 FEC 모두 높은 효율을 나타내었으나 갈변율이 높은 관계로 0.75 mg/l를 나리 배발생캘러스 유도에 적합한 최적 농도로 선정하였다. 이러한 연구결과는 향후 배발생캘러스를 이용한 나리 식물체 재분화 체계 확립 그리고 우량품종 증식체계 확립에 기여할 것이다. Lily is one of the most important 5 cut flowers in international flower market and lilies are distributed in Asia, Eurasia and North America. To develop a new lily cultivar, in addition to hybridization, mutation and selection methods, biotechnological techniques including tissue culture are also required. Establishment of tissue culture system is one of the requirement for the breeding program in Lily. Among many fields of plant tissue culture, establishment of regeneration system via embryogenic calluses are studied in many crops. In this study, research was carried out to decide the proper concentration of picloram which is used for the induction of embryogenic calluses. As a result, 3 different types of callused were observed after 3-4 weeks. They were CEC (compact embryogenic callus), FEC (friable embryogenic callus) and white callus type. 1.0 mg /l of picloram showed the best result for the production of embryogenic callus, however, due to its higher rate of browning in this concentration, 0.75 mg/l of picloram was selected as a proper concentration of picloram for the induction of CEC and FEC in Lily. These results can be contributed to the establishment of both regeneration system and mass propagation in lily in the future.

고효율의 아그로박테리움 형질전환법을 이용한 제초제저항성 나리 식물체 개발

김종보,Jong Bo Kim 한국식물생명공학회 2023 JOURNAL OF PLANT BIOTECHNOLOGY Vol.50 No.2

Transgenic lilies have been obtained using Agrobacterium tumefaciens (AGL1) with the plant scale explants, followed by DL-phosphinothricin (PPT) selection. In this study, scales of lily plants cv. "red flame" were transformed with the pCAMBIA3301 vector containing the gus gene as a reporter and the blpR gene as a selectable marker, as well as a gene of interest showing herbicide tolerance, both driven by the CaMV 35S promoter. Using a 20-minute infection time and a 5-day cultivation period, factors that optimized and demonstrated a high transformation efficiency were achieved. With these conditions, approximately 22-27% efficiency was observed for Agrobacterium-mediated transformation in lilies. After transformation with Agrobacterium, scales of lilies were transferred to MS medium without selective agents for 2 weeks. They were then placed on selection MS medium containing 5 mg/L PPT for a month of further selection and then cultured for another 4-8 weeks with a 4-week subculture regime on the same selection medium. PPT-resistant scales with shoots were successfully rooted and regenerated into plantlets after transferring into hormone-free MS medium. Also, most survived putatively transformed plantlets indicated the presence of the blpR gene by PCR analysis and showed a blue color indicating expression of the gus gene. In conclusion, when 100 scales of lily cv. "red flame" are transformed with Agrobacterium, approximately 22-27 transgenic plantlets can be produced following an optimized protocol. Therefore, this protocol can contribute to the lily breeding program in the future. 35S cauliflower mosaic virus 프로모터의 조절을 받고 인트론이 포함된 β-Glucuronidase (gus) gene과 35S cauliflower mosaic virus (enhanced) 프로모터의 조절을 받는 blpR유전자가 있는 pCAMBIA3301 벡터가 포함된 AGL-1 균주를 사용하였다. 아그로박테리움을 이용한 형질전환 체계와 PPT (D-L-phosphinothricin) 선발을 통하여 나리 인편조직으로부터 형질전환 식물체가 획득되었다. 본 연구에서 나리 레드플레임'품종의 인편조직에 선발 및 목적유전자로 바스타 제초제저항성 유전자인 blpR 유전자를 도입하였다. 상기 실험 결과, 20분의 접종시간과 5일간의 아그로박테리움과의 공동배양이 100개의 접종된 인편개체에서 각각 24, 27개의 높은 PPT 저항성 개체가 관찰되었고 신초까지 형성된 인편을 19.6 및 22.7개를 생산하는 우수한 형질전환 결과를 보여주었다. 이렇게 제초제를 이용하여 선발되었을 뿐만 아니라 도입된 reporter 유전자인 gus도 발현되었음을 확인하였고 선발유전자이자 목적유전자인 blpR 유전자도 PCR 검정을 통해 도입되었음을 확인하였다. 12주 이상의 선발과정을 거치고 gus 및 PCR 검정을 거친 형질전환 개체들은 발근 배지를 거쳐 순화 후 화분으로 이식하여 높은 활착율을 보여주었다. 결론적으로 본 연구에서 확립한 프로토콜을 이용하면 평균 20% 이상의 형질전환 효율을 나타내고 본 연구에 기술된 아그로박테리움 매개 형질전환 체계에 향후 보완이 필요하지만, 우수 품종개발을 위한 나리 육종 프로그램에 기여할 수 있을 것으로 판단된다.

아그로박테리움 형질전환법을 이용한 수량증대 유채 식물체 개발

김종보,Jong Bo Kim 한국식물생명공학회 2023 JOURNAL OF PLANT BIOTECHNOLOGY Vol.50 No.2

본 연구는 유채(Brassica napus L.)의 배축을 이용하여 수량 증대 유전자인 ORE7 그리고 선발유전자로 제초제저항성을 나타내는 bar 유전자를 Agrobacterium 기법을 이용하여 형질전환 하였다. 효율적인 유채형질전환 기법을 확립하기 위해 한국 유채 '영산' 품종의 배축 절편체를 이용하여 Agrobacterium 접종 시, 20분간의 접종시간 그리고 3일간의 공동배양기간을 적용할 때 100개의 접종된 배축 절편체들로부터 약 32-36개 개체가 PPT (Phosphinothrixin) 20 mg/l 첨가된 선발배지에서 생존하여 높은 형질전환 효율을 보여주었다. 또한 본 연구에서 도입된 선발 및 생산성 증대 유전자 도입 여부를 확인하기 위해 PCR을 수행하여 도입여부를 확인하였다. 또한 생산성 증대 유전자 ORE 7 유전자와 같이 도입된 bar 유전자의 발현여부를 확인하기 위해 0.5% Basta 용액에 처리한 결과, 제초제저항성 형질이 발현됨을 확인하였다. 본 연구결과를 통해 향후 국내 유채품종을 대상으로 Agrobacterium을 이용하여 제초제 저항성, 건조저항성. 생산성 증대 형질 그리고 오일함량 증대 등의 유용형질 개량에 이용되리라 판단된다. This study includes the transformation of genes such as ORE7, the increase of gene expression, and the use of the bar gene as a selectable marker that shows herbicide resistance with Agrobacterium tumefaciens using hypocotyls from the oilseed rape "Youngsan" cultivar. To establish an Agrobacterium transformation system for the production of oilseed rape with a high-yield trait, infection time and co-cultivation period with Agrobacterium were tested. Therefore, when hypocotyls from the oilseed rape "Youngsan" cultivar were infected with Agrobacterium for 20 min and co-cultivated for 3 days, approximately 32-36 putatively transformed hypocotyls with shoots including roots survived from 100 inoculated hypocotyls after 4 weeks of transformation on a selection medium containing 20 mg/L of phosphinothricin (PPT) as a selectable agent. Additionally, a PCR assay was performed to confirm the insertion of target genes and showed the presence of the ORE7 gene as a high-yielding trait and the bar gene as a selectable marker. Treatment with 0.5% (v/v) Basta solution as a selectable agent for 6 days with leaves from transformed oilseed rape expressed the bar gene. Therefore, this study can contribute to the development of special oilseed rapes containing agriculturally useful traits such as herbicide resistance, drought tolerance, high yielding traits, and high oleic acid content.

강학상 인가와 정비조합 설립인가

김종보(Kim Jong-Bo) 행정법이론실무학회 2003 행정법연구 Vol.- No.9

공익사업에서 점유이전과 생활보상

김종보 ( Kim Jong-bo ) 서울대학교 법학연구소 2021 서울대학교 法學 Vol.62 No.2

There is no difference between general public works projects and improvement projects under the Act on the improvement of urban areas and residential environments(Urban improvement Act) in that an expropriation adjudication is made, but in the latter case, not all land owners are subject to expropriation, but rather only a few are subject to expropriation. In the case where an expropriation adjudication is made through a long procedure for members who oppose the redevelopment project, the project implementer may request extradition on the basis of the effect of the expropriation adjudication. It should be interpreted that the compensation has been completed as an expropriation adjudication has been made for union members those who opposing the project. On the other hand, tenants of improvement projects are those who lose the right to use profits earlier than other public works projects due to the suspension of use. It should be interpreted that the Livelihood compensation prescribed by the Act in acquisition of and compensation for land etc. for public works projects(Land Compensation Act), such as housing transfer expenses, in the extradition claim litigation against them is in the relationship of prior or concurrent Performance. In particular, since the project implementer’s extradition claim litigation against them is an expropriation lawsuit, it must be interpreted so that a fair compensation (Article 23, Paragraph 3 of the Constitution) is made within the procedure. If the Livelihood compensation is not paid to the tenant, the compensation cannot be considered complete. The purpose of stipulating administrative vicarious execution under the Land Compensation Act takes into account the unique public law situation in which the expropriation and compensation stipulated by the Land Compensation Act are enforced. However, the Supreme Court excluded the power of eviction from the power of execution under the Land Compensation Law, and as a result separated the issue of compensation under the Land Compensation Law from the civil lawsuit. This ruling contributed to some extent in protecting the human rights of owners and tenants, but on the other hand, as the extradition claim litigation was identified as a simple civil lawsuit, it was insulated from the compensation system under the Land Compensation Act. In the long term, all Livelihood compensation under the Land Compensation Act must be incorporated into the compensation object of the expropriation adjudication, and an expropriation adjudication including this must be made. As in the present, at least the practice of the civil lawsuit should be changed in the form of a party lawsuit under public law. In the Party lawsuit, it is recognized that the obligation to transfer possession under the Land Compensation Act or the suspension of use under the Urban Improvement Act is recognized as a public law regulation, and whether it is linked to legitimate compensation should be carefully examined.

헌법의 객관성과 국가의 기본권보호의무

김종보(Kim Jong-Bo) 한국비교공법학회 2010 공법학연구 Vol.11 No.4

국가의 기본권보호의무는 일반적으로 헌법상 보호되는 기본권을 제3자인 사인에 의한 위법한 가해나 가해의 위험으로부터 국가가 보호해야 하는 의무라고 이해되고 있다. 하지만 기본권보호의무가 이렇게 제3자와 관련이 있어야만 하는 논리적 이유는 없다. 이것은 제3자와 관련이 없는 일반적 보호의무를 포괄하는 개념으로 사용할 수 있다. 그 이유는 기본권보호의무라는 것이 기본권의 객관성에서 도출되는 것이고 이러한 객관성은 헌법규정으로만 그 내용이 확정되는 것이 아니라는 개방성을 특징으로 하기 때문이다. 어차피 기본권보호의무가 기본권의 객관성을 전제로 학설과 판례로 형성된 것이라면 제3자로부터의 기본권침해이든 자연재해로 인한 기본권침해이든 국가의 측면에서는 동일한 의무가 지워지는 것이고 이는 비자유권에 대해서도 동일하기 때문에 이러한 것들이 모두 기본권보호의무의 내용이 되는 것이라고 정의해도 무방하다. 국가와 관련 없는 헌법적 문제는 없기 때문에 기본권의 객관성이라고 하는 것도 국가와 관련이 있는 경우에만 헌법적 문제가 발생한다. 이러한 측면에서 기본권의 객관성이라는 것은 결국 국가에 대한 의무로 나타나고 이는 국가의 기본권보호의무로 이해되는 것이다. 국가는 이러한 의무의 이행에서 무제한적인 재량을 가지는 것은 아니기 때문에 일정한 한계가 존재하고 이러한 한계로서 과소보호금지원칙이 헌법재판에서의 심사기준으로 나타난다. 하지만 기본권의 객관성에서 도출되는 문제라고 할지라도 헌법재판과 관련해서는 객관성 심사만이 아니라 주관성 심사 즉 기본권제한에 대한 심사가 나타나기도 하는데, 이것이 객관성과 주관성의 구별을 불필요하게 하거나 곤란하게 하는 것은 아니다. 국가의 작위로 인한 방어권으로서의 기본권과 국가의 부작위로 인한 불충분한 보호는 그 구별이 그리 어렵지 않기 때문이다. According to general opinions, the national obligation to protect fundamental rights is related to one person's infringement on other's rights. This is a reason of protection obligation that the nation must do. Unlike USA, korean Constitutional Court and most constitutional scholars acknowledge the objectivity of constitution. So the national obligation to protect fundamental rights has a probability that the contents of protection obligation could extend. The reason is that, this national obligation is originated in objectivity of constitution and the objectivity is an abstract concept and the contents are filled with precedents and theory. The protection obligation can be valid without private man's infringement on other's rights. So a natural disaster or other fundamental rights except liberty become causes of an infringement on other's rights. This protection obligation is originated in objectivity of constitution, and the constitutional problem doesn't occur without relationship with nation. Therefore objectivity of constitution became national obligation to protect fundamental rights. The judging criteria about objectivity is the principle of prohibition of under-protection. But as the nation fulfil the protection obligation, the subjectivity of fundamental rights are occur. The judging criteria of this case is the principle of the prohibition of excessive restriction. But a confusion between objectivity and subjectivity do not exist.