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좁은잎 엉겅퀴 추출물의 산화방지 활성 및 산화적 스트레스에 대한 PC12 세포 보호효과
장미란(Miran Jang),김건희(Gun-Hee Kim) 한국식품과학회 2016 한국식품과학회지 Vol.48 No.2
HPLC/MS를 이용하여 국내 자생 엉겅퀴(Cirsium japonicum)의 페놀성 화합물을 분석한 결과 제주지역 엉겅퀴가 가장 많은 페놀성 화합물을 함유하고 있었으며, chlorogenic acid가 73.15 mg/g dry weight, linarin이 76.67 mg/g dry weight 그리고 pectolinarin이 12.98 mg/g dry weight으로 확인되었다. 엉겅퀴의 기능성 식품으로서의 가치를 확인하기 위하여 산화방지 활성 및 신경세포 보호효과를 평가한 결과 DPPH, ABTS 및 FRAP assay에서 엉겅퀴의 강력한 산화방지 활성이 나타났다. 엉겅퀴 추출물이 DPPH 및 ABTS 라디칼의 50%를 저해하는 농도는 각각 567 μg/mL와 130 μg/mL으로 나타났다. DPPH, ABTS, FRAP법을 통한 총산화방지능은 각각 11.32, 100.15, 12.76 μg/mL trolox equivalents 나타났다. 과산화수소로 산화적 손상을 유도한 PC12 세포에 대하여 MTT와 LDH assay를 이용하여 세포생존률을 측정한 결과 농도의존적으로 세포 보호 활성이 나타났으며, 마찬가지로 활성산소종 생성률을 측정한 결과 농도 의존적으로 활성산소종 생성이 감소되어 세포 보호활성이 확인되었다. 본 연구를 통하여 엉겅퀴의 우수한 산화방지 활성 및 신경세포 보호효과가 검증되었다. 따라서 엉겅퀴는 안전한 식품 재료로서 꾸준히 섭취하였을 때 천연산화방지제로 작용하여 신경퇴행을 예방함으로써 알츠하이머병, 파킨슨병 및 헌팅턴병 등의 질병 위험을 줄일 수 있을 것으로 판단된다. The phenolic compounds, antioxidant activity and neuronal cell protective effect of Cirsium japonicum extract were evaluated in this study. High performance liquid chromatography mass analysis showed that C. japonicum was composed of chlorogenic acid, linarin, and pectolinarin. C. japonicum extract showed its antioxidant activity with halfmaximal inhibitory concentrations of 567 and 130 μg/mL by DPPH and ABTS radical scavenging activity, respectively. The total antioxidant capacities of C. japonicum via DPPH, ABTS, and FRAP assays were 11.32, 100.15, and 12.76 μg/mL trolox equivalents, respectively. In addition, the neuroprotective effect of C. japonicum extract was investigated by measuring cell viability via MTT, LDH and DCF-DA assay using H₂O₂-damaged PC12 cells. C. japonicum extract showed neuronal cell protective effects in a dose-dependent manner. These results indicated that C. japonicum extract has potent antioxidant and neuronal protective effects. Therefore, C. japonicum can be regarded as an effective and safe functional food resource as natural antioxidants, and may decrease the risk of neurodegenerative disorders.
음양곽 5종의 프레닐플라보노이드 함량에 따른 항산화 활성 및 산화적 스트레스에 대한 PC12 세포 보호효과
장미란(Miran Jang),조천호(Cheon-Ho Jo),김건희(Gun-Hee Kim) 한국원예학회 2017 원예과학기술지 Vol.35 No.6
본 연구는 5종의 음양곽에 대하여 프레닐플라보노이드 함량 분석과 항산화능 및 신경세포 보호활성을 측정하였다. 실험에 사용된 음양곽은 삼지구엽초(Epimedium koreanum), 중국음양곽(E. brevicornum), 유모음양곽(E. pubescens), 전엽음양곽(E. sagittatum) 및 무산음양곽(E. wushanense)으로 HPLC/DAD를 이용하여 분석한 결과 프레닐플라보노이드인 이카린, 이카리사이드 I 및 II, 이카리틴, 에피메딘 A-C가 5종의 음양곽에 함유되어 있었으며, 플라보노이드 배당체인 히페린이 삼지구엽초에만 함유되어 있었다. 이카린은 모든 음양곽에서 가장 많이 함유되어 있었으며 (0.08–0.37%, w:w) 그 순서는 삼지구엽초(3.66 mg·g<SUP>-1</SUP> DW) > 무산음양곽(1.98mg·g<SUP>-1</SUP> DW) ≧ 전엽음양곽(1.87mg·g<SUP>-1</SUP> DW) > 유모음양곽(1.60mg·g<SUP>-1</SUP> DW) > 중국음양곽(0.75mg·g<SUP>-1</SUP> DW)으로 나타났다. ORAC, DPPH, ABTS 및 FRAP 법을 활용하여 삼지구엽초의 항산화 활성을 측정한 결과 모든 시험법에서 삼지구엽초의 항산화 활성이 가장 뛰어난 것으로 확인되었다. 또한, 과산화수소로 산화적 손상을 유도한 PC12세포에 대한 MTT, LDH 및 DCA-DA 법 결과 역시 삼지구엽초의 세포보호효과가 가장 뛰어났으며 5종의 음양곽 모두 농도의존적으로 세포 보호 활성이 나타났다. 본 연구를 통하여 5종의 음양곽의 주요 활성 성분 및 그에 따른 생리활성의 차이를 확인하였으며, 특히, 삼지구엽초의 우수한 항산화 활성 및 신경세포 보호효과가 검증되었다. This study was conducted to comparatively evaluate antioxidant activity of five species of Epimedium genus (Epimedium koreanum , E. brevicornum , E. pubescens , E. sagittatum and E. wushanense ) and their protective effects on neuronal PC12 cells. The contents of individual penylflavonoids in five Epimedium species were also examined using HPLC/DAD. Five Epimedium plants were composed of icariin, icariside I, II, icaritin and epimedin A-C. Icariin was most predominant among all detected prenylflavonoids at all species studied. Icariin contents were in the order of E. koreanum (3.66 mg·g<SUP>-1</SUP> DW) > E. wushanense (1.98 mg·g<SUP>-1</SUP> DW)>= E. sagittatum (1.87 mg·g<SUP>-1</SUP> DW) > E. pubescens (1.60 mg·g<SUP>-1</SUP> DW) > E. brevicornum (0.75 mg·g<SUP>-1</SUP> DW). The highest antioxidant values studied via ORAC, DPPH, ABTS and FRAP assay were found in E. koreanum extract among the species. In addition, the neuroprotective effect of E. koreanum extract was strongest among studied via MTT, LDH and DCH-DA assay using H₂O₂-damaged PC12 cells species. All tested Epimedium plants extract showed neuronal cell protective effects in a dose-dependent manner. These results indicated that Epimedium plants extract has potent antioxidant and neuronal protective effects and E. koreanum extract had the highest activities among tested five species especially.
원료 생약 추출물의 최적화를 위한 한국 5개 지역에서 채집된 대계 추출물들의 항우울 효과 비교
장미란(Miran Jang),이혜림(Hye Lim Lee),홍은영(Eunyoung Hong),김성목(Seong Mok Kim),윤서영(Seo Young Yoon),준브라이언(June Bryan I. dela Pena),김건희(Gun-Hee Kim),정재훈(Jae Hoon Cheong),이용수(Yong Soo Lee) 大韓藥學會 2012 약학회지 Vol.56 No.6
Previously, we identified that Cirsium japonicum (CJ) extract posses antidepressant properties. In order to look for the optimal hebal preparation, CJ extracts collected from Koheung, Yesan, Cheju, Pyungchang and Pocheon were compared. The psychopharmacological activities of each extract were investigated using the open field test, the rota-rod test and the forced swimming test. Effect of each extract on Cl- influx in neuroblastoma cells were also identified. All of the extracts were orally administered at dosages of 50, 100, 200, 400 mg/kg of body weight. Supplementation of CJ did not significantly alter psychomotor behaviors such as movement, rearing frequency and total turn angle on the open field. Supplementation of CJ’s extract from Pyungchang (100 mg/kg, p.o.), Cheju (200 and 400 mg/kg p.o.) and Yesan (100 and 200 mg/kg, p.o.) significantly decreased immobile duration and increased mobile duration in the forced swimming test. All of extracts have no influence on NE uptake in HEK-293 cells, but increased Cl- influx in neuroblastoma cell. The extract from Yesan demonstrated the most potent effect on Cl- influx. These results indicate that CJ’s extracts from Pyungchang, Cheju and Yesan may alleviate depression, and the extract from Yesan may be the most effective preparation.