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      • 착상전 포유동물 배발생 과정에서 후성적 조절

        황규찬(K. C. Hwang),권정숙(J. S. Kwon),허영남(Y. N. Xu),이승은(S. E. Lee),손소침(S. C. Sun),이성현,양병철(B. C. Yang),박창은(C. E. Park),이재달(J. D. Lee),김남형(N. H. Kim) 충북대학교 동물생명과학연구소 2010 동물생명과학연구 Vol.3 No.-

        착상전 난자의 발달은 유전적 요인과 후성학적 요인들에 의해 조절되며, 복제 난자에서 이들간의 부조화는 난자 발달율와 복제동물 생산율 저하를 초래하게 된다. 하지만, 포유동물 초기 난자발달에서 유전체 메틸레이션(genome methylation), 히스톤단백질 아세틸레이션 및 메틸레이션(histone acethylation/methylation), 그리고 마이크로알앤에이 (miRNA) 등과 같은 후성학적 연구(epigenetics)에 대해서는 알려진 것이 부족한 실정이다. 본 연구에서, 초기 난자의 후성학적 변화를 조사하기 위해 microRNA활성 기작에 중요한 Dicer1 유전자를 knockdown(유전자 발현 억제) 시키기 위한 siRNA injection, qRT-PCR, immunofluorescence microscopy기법을 활용하여 pluripotency에 관련된 유전자들과 단백질의 발현을 조사하였다. 그 결과, Dicer1 유전자의 발현을 억제 시키면 배아 줄기세포의 다능성과 관련된 oct4, nanog, 그리고 sox2의 유전자 발현과 Oct4 단백질 발현이 뚜렷이 억제됨을 확인하였다. 또한, microRNA인 miR-127과 miR-136의 발현 패턴을 착상전 난자들에서 분석하였을 때 핵이식란(NT)과 수정란(IVC)에 비해 단일발생란(parthenote)에서 매우 높게 발현함을 알 수 있었고 이러한 결과는 miR-127의 프로모터 서열에 존재하는 CpG 메틸레이션 패턴과 반비례함을 알 수 있었다. 이러한 결과들에서 미루어 볼 때, 착상전 난자에서 후성학적 리프로그램은 난자의 발달율에 매우 중요하며 본 연구를 토대로 재생의학 및 바이오신약 생산을 위한 SCNT의 산자 생산율을 높이는데 기여하리라 사료된다.

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