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태아 혈액에서 MMP-8 생성에 미치는 LPS와 TPCK 자극의 효과
박장철(Park, Jang Cheol),박성효(Park, Sung Hyo),이민우(Lee, Min Woo),김은재(Kim, Eun Jae) 한국보건기초의학회 2020 한국보건기초의학회지 Vol.13 No.2
이 연구의 목적은 Matrix metalloproteinase-8 (MMP-8) 생성을 위한 태아 혈액 세포에서 Lipopolysaccharide (LPS) 자극의 효과와 Nuclear factor kappa B (NF-kB) 억제제인 Tosylphenylalanine chloromethyl ketone (TPCK)의 효과를 밝히는 것이다. 출생 시 제대혈은 선택적 제왕 절개 기간 동안 LPS (1 g/mL)를 사용하여 NF-kB 억제제인 TPCK (10 and 20 mM)의 유무에 관계없이 즉시 자극하였다. MMP-8의 농도는 1-6시간 후 상층액에서 특이 면역 분석으로 측정하였다. 그리고 NF-kB 활성은 웨스턴 블롯팅을 사용하여 측정하였다. 제대혈에 대한 LPS 자극은 시간이 경과함에 따라 MMP-8의 수준을 크게 높이는 반면, TPCK에 의한 NF-kB 억제제는 LPS 자극에 의한 MMP-8의 상승을 억제하였다. LPS 자극과 함께 제대혈에 의한 MMP-8 생성은 NF-kB 억제제인 TPCK에 의해 억제되었다. 우리의 실험 결과는 NF-kB가 태아 혈액 세포에서 LPS에 의해 유도된 MMP-8 생성에 대한 조절은 태아염증반응증후군의 진단 역할을 한다는 것을 시사한다. The purpose of our research was to elucidate the effect of Lipopolysaccharide (LPS) stimulation on fetal blood cells for the Matrix metalloproteinase-8 (MMP-8) production and the effect of Nuclear factor kappa B (NF-kB) inhibitor, Tosylphenylalanine chloromethyl ketone (TPCK) on this system. Cord blood at birth was obtained during the elective cesarean section term and using LPS (1 μg/mL), stimulated immediately with or without NF-kB inhibitor, TPCK (10 and 20 mM). The levels of MMP-8 were measured with specific immunoassay in the supernatant after 1 through 6 hours. NF-kB activity was measured using Western blotting. LPS stimulation to cord blood significantly raised the level of MMP-8 with the passage of time, while NF-kB inhibitor by TPCK restrained the MMP-8 elevation by LPS stimulation. MMP-8 production by cord blood with LPS stimulation was repressed by NF-kB inhibitor, TPCK. Our data suggests that NF-kB has a regulatory role on MMP-8 production induced by LPS in fetal blood cells.
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김동현 ( Dong Hyun Kim ),최현경 ( Hyun Kyung Choi ),조석철 ( Seok Cheol Cho ),국무창 ( Moo Chang Kook ),박장서 ( Chang Seo Park ) 대한화장품학회 2008 대한화장품학회지 Vol.34 No.3
Spirulina는 시아노박테리아의 일종으로 피코시아닌, 베타카로틴, 비타민 E, 카로티노이드 등의 항산화물질과 양질의 단백질을 고농도로 함유하고 있어 이의 추출물은 화장품 소재로서 가치가 높다. Spirulina의 항산화력 증진을 위해 Spirulina 추출물을 Lactobacillus plantarum P23과 Bacillus subtilis TP6로 발효한 후 항산화, 항염증 및 항노화 기초 효능을 측정하였다. DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazl)법으로 측정한 항산화력은 발효 후 24.1 % (P23)와 18.6 % (TP6)로 증가되었다. Spirulina 추출물은 배양 중인 keratinocyte에 UV 조사 후 증가된 TNF-α와 IL-6를 정상 수준으로 줄여주었으나 발효에 의해 그 효과가 증가되지는 않았다. Spirulina 추출물 및 발효 추출물 모두가 UV 조사에 의한 세포사멸을 방지하였다. 특히 P23 발효 추출물의 경우 세포를 활성화시키는 효과가 관찰 되었다. UV 조사 후 관찰되는 콜라겐 생합성 감소와 MMP-2의 발현의 증가가 Bacillus subtilis TP6로 발효한 Spirulina 추출물의 경우에서만 관찰되었다. 결론적으로 Spirulina의 발효에 의한 물질은 기능성 화장품 소재로 가치가 기대된다. It is known that Spirulina extracts have strong antioxidant activities since it contains diverse antioxidants such as phycocyanin, β-carotene, vitamin E and other carotenoids. In order to enhance antioxidant activity of Spirulina, Spirulina extracts were fermented by Lactobacillus plantarum P23 and Bacillus subtilis TP6. The resulting fermented supernatants were analyzed for their antioxidant activities by DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) method. The results indicated that fermentation process significantly enhanced total antioxidant activities. Increased levels of UV-induced TNF-α and IL-6 were reduced back to normal level even by treatment of all three of the Spirulina extracts. The result suggested that the fermentation process enhanced the anti-inflammatory activities at least ten times higher than the simple extract. Zymography is used to determine the expression of UV-induced MMP. Spirulina extracts fermented by Bacillus subtilis TP6 were found to suppressed the expression of MMPs. Also treatment with the fermented Spirulina extracts resulted in an increase of collagen synthesis in vitro. In conclusion, the fermented Spirulina extracts are expected to be used as anti-aging cosmeceuticals.
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