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아세트 알데히드(특수산업) 공장폐수의 성분과 이용균주의 분리
정기택,서승교,송형익,박임동,방광웅 한국미생물학회 1987 미생물학회지 Vol.25 No.4
아세트알데히드 페수를 생물학적으로 처리할 목적으로 폐수의 성상을 조사하였으며, 아세트알데히드 폐수에서 잘 생육하는 53개 균주를 분리 고정하고 그 중 가장 COD 제거율이 우수한 4개 균주 AW-6, AW-22, AW-38, AW-41을 선별하고 이들을 동정하였다. 아세트알데히드 폐수의 성상은 CODmn 5,260ppm, BODs 6,452ppm, pH 1.85였으며 유기성분의 주체는 초산으로 6.76%를 함유하였다. 균의 동정 결과, AW-6은 Micrococcus 갠뎐, AW-22는 Micrococcus luteus, AW-38은 Microbacterium lacticum, AW-41은 Microbacterium laevaniformans 또는 그 우연균으로 동정되었다. As a research for treatment of waste water from acetaldehyde plant by biological method, we investigated general characteristics of the waste water, and isolated and identified some useful bacteria which effectively treated its waste water. Among the total number of 53 strains which were grown in waste water from an acetaldehyde plant, the strains AW-6, AW-22, AW-38 and AW-41 were found to be useful for COD removal of waste water. $COD_{Mn}$ and $BOD_{5}$ of the waste water were 5260 ppm and 6452 ppm, respectively, and pH was 1.85. And the main organic component in waste water was acetic acid which was contained 6.76%. By the taxonomical characteristics, the strains AW-6, AW-22, AW-38 and AW-41 were identified as Micrococcus roseus, Micrococcus luteus, Microbacterium lacticum and Microbacterium laevanifromans or similar strain, respectively.
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정기택,서승교,송형익,박임동,방광웅 한국미생물학회 1987 미생물학회지 Vol.25 No.4
아세트알데히드 공장폐수의 생물학적 처리를 위하여 중화제 및 응집제의 효과를 검토하고, 4개 균주 Micrococcus roseus AW-6. Micrococcus luteus, AW -22. Microbacterium lacticum AW-38. Microbacterium laevaniformans AW-41을 혼합 배양하여 미생물의 영양요구량 및 성장에 미치는 환경인자 둥을 조사한 결과는 다음과 같다. 아세트알데히드 폐수를 잘 자화시키는데 필요한 온도는 $30^{\circ}C$였고 pH는 7.0이였으며 96시간째에 COD 제거율이 최대에 달하였다. 폐수처리를 위한 중화제로서는 NaOH가 가장 좋았고 응집제의 처리 효과는 인정되지 않았으며 폐수처리를 위한 최적 희석배수는 10배 정도로 나타났다. 균 생육을 위한 영양원으로서는 $NH_{2}NO_{3}$ 200ppm, $KH_{2}PO_{4}$, 50ppm, $CaCl_{2}$ 15ppm. $MgSO_{4} \cdot 7H_{2}O $ ppm을 보충하였을 때 COD 제거율이 향상되었다. 회분배양 실험결과 속도계수 Kl은 4. 5X 10-6이었으며, BOD 제거융을 85%로 하기 위한 체류시간은 45시간 이었다. 연속배양 결과 COD 제거율은 85%로 나타났으며 처리수의 수질은 COD 60ppm. BOD 40ppm, pH7.0 정도로서 환경기준치 이하였다. In order to establish the biological treatment system which can be used for treatment of waste aster from acetaldehyde plant, it was investigated optimum nutrient requirements and growth conditions by mixed culture of Micrococcus roseus AW-6, Micrococcus luteus AW-22, Microbacterium lacticum AW-38 and Microbacterium laevaniformans AW-41 as well as the effect of coagulants and neutralization reagents. Also, it was carried out the continuous culture as well as batch culture to treat the waste water by mixed culture of these strains. The COD removal rate was reached to maximum state for 96hrs culture at pH7.0 and $30^{\circ}C$ NaOH as the neutralization reagents was the most effective, but the coagulants had no effect on the COD remonal rate and the optimum dilution times for treatment were 10 fold. The COD removal rate was also increased by supplimenting 200 ppm $NH_{2}NO_{3}$, 50 ppm $KH_{2}PO_{4}$, 15 ppm $CaCl_{2}$ and 1 ppm $MgSO_{4} \cdot 7H_{2}O $ as additional nutrients. The removal rate coefficient $K_{1}$ on the batch culture was $4.5\times 10^{-6}$, and the detention time for BOD removal rate of 85% was approximately 45hrs. The COD of waste water was reduced to 15% of its initial value by the continuous culture. The COD and BOD of the effluents were to be about 60 ppm and 40 ppm, respectively, and final pH was 7.0.
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Micrococcus luteus에서 정제한 Isocitrate Lyase의 특성
정기택,서승교,우철주,박임동,정병태,박영호 한국미생물학회 1993 미생물학회지 Vol.31 No.3
Micrococcus luteus 가 생산하는 isocitrate lyase 의 효소단백질을 ammonium sulfate precipitation, DEAE-cellulose, DEAE-sephacel, 1차 Sephadex G-200, 2 차 Sephadex G-200 column chromatography 과정을 통하여 분리 정제하였으며 정제된 효소의 분자량과 효소학적 특성을 조사하였다. 정제된 isocitrate lyase 는 상기 정제 과정을 통하여 10.2%의 회수율과 38.8 의 정제도를 나타내었으며, 전기영동시 단일밴드를 얻을 수 있었고, SDS-PAGE 에 의해 측정된 분자량을 약 60,000이며 1개의 subunit 로 나타났다. 본 효소의 최적 pH 는 7.5이었으며, 최적 온도는 $40^{\circ}C$ 부근이었고 $45^{\circ}C$까지는 안정하였다. 2가 금속염의 첨가시$ Mg^{2+}$ 를 제외한 다른 금속이온들은 효소활성을 저해하는 것으로 나타났으며 $Mg^{2+}$의 농도는 5 mM 에서 최대활성을 나타내었다. 또한 기질인 DL-isocitrate 의 $K_{m}$ 치는 0.95 mM 로 나타났으며, thiol 화합물의 첨가시 cysteine 은 1mM, glutathione과 $\beta$-mercaptoethanol 은 5 mM 의 농도에서 효소활성이 최대에 달하였다. The isocitrate lyase extracted from Micrococcus luteus was purified 38.8 folds with the overall yield of 10.2%, by the ammonium sulfate fractionation, DEAE-cellulose, 1st Sephadex G-200 and 2nd Sephadex G-200 column chromatography. The purified enzyme showed to be a single protein band by polyacrylamide gel electrophoresis. The molecular weight of the purified enzyme was estimated 60,000 by the SDS-polyacry]amide gel electrophoresis. The apparent Michaelis constant, Km value for isocitrate was 0.95 mM. The optimum pH and temperature of the purified enzyme were pH 7.5 and $40^{\circ}C$, respectively. The enzyme was activated by $Mg^{2+}$ and inhibited by $Mn^{2+}$, $Ca^{2+}$, $Cu^{2+}$, $Zn^{2+}$ and $CO^{2+}$. In addition, the activity of isocitrate lyase was increased by glutathione and 2-mercaptocthanol at 5 mM and cysteine at I mM.
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