2-세포기 생쥐 배아의 동결보존 전의 평형온도와 시간이 동결보존 후의 결과에 미치는 영향

고희은 ( Hee Eun Ko ),정경남 ( Jeong Gyeong Nam ),김용봉 ( Kim Yong Bong ) 대한산부인과학회 2003 Obstetrics & Gynecology Science Vol.46 No.5

목적 : 최근 인간 배아의 동결 및 해빙이 동결보존액으로 1, 2-propanediol (PROH)을 사용함으로써 성공적으로 이루어지고 있다. 배아를 PROH에 노출 시 평형온도 조절의 중요성이 보고된 바 있다. 본 실험은 2-세포기 생쥐 배아를 PROH에 노출 시 평형온도와 노출 시간에 따른 생쥐 배아의 발생에 미치는 영향을 알아보고, 2-세포기 생쥐 배아의 동결 전에 동결보존액에서의 적정 노출 온도와 시간을 알아보고자 한다. 연구 방법 : 5-6주령의 ICR계통의 암컷 생쥐로부터 2-세포기 배아를 획득하여 1.5 M PROH를 포함하는 인산완충용액 (phosphate buffered saline, PBS)에 37℃, 상온 (22-24℃), 4℃에서 각각 0분 (대조군), 10분, 30분씩 노출시킨 후 1, 0.5, 0 M PROH를 포함하는 PBS에 각 실험군의 배아를 순서대로 각각 5분씩 두어 PROH를 완전히 제거한 후 0.4% 소혈청알부민 (bovine serum albumin, BSA)이 포함된 Ham`s F-10에서 배양하여 배아의 발생률을 비교 관찰하였다. 한편, 상온과 4℃에서 1.5 M PROH를 포함하는 동결보존액에 2-세기 생쥐배아를 각각 10분씩 노출시킨 후 동결-해빙하여 배아의 발생률을 비교 관찰하였다. 결과 : 37℃ PROH에서의 노출군은 대조군에 비해 배아 발생률이 유의하게 저해되었고 (0분 : 54.8%, 10분 : 8.3%, 30분 : 5.4%, P=0.07, 0.038), 상온 노출군에서는 대조군에 비해 노출시간이 길어질수록 배아 발생률이 감소하였으나 유의한 차이는 없었다 (0분 : 47.2%, 10분 : 28.3%, 30분 : 23.7%). 한편 상온과 4℃에서 각각 동결보존 전에 PROH에 노출 후 동결-해빙하였을 때 배아의 발생률은 대조군에 비해 낮았으나 유의한 차이는 없었고 (대조군 : 57.1%, 상온 : 25.7%, 4℃ : 30.8%) 4℃ 노출군이 상온 노출군에 비해 배아 발생률이 높게 나타났으나 유의한 차이는 없었다. 결론 : 이상의 결과로 미루어 2-세포기 생쥐 배아를 PROH에 노출할 때 평형온도와 시간에 좌우되어 발생률의 차이를 나타냈으며, 상온과 4℃에서 2-세기 생쥐 배아를 PROH에 10분간 노출시킨 후 동결-해빙하였을 때 배아의 발생률에 있어서 유의한 차이를 보이지 않았다. Objective : One-cell human zygotes have been successfully frozen and thawed using 1, 2-propanediol (PROH) during freezing and thawing. This study was performed to assess the effect of equilibration temperature and time on cryopreservation of 2-cell mouse embryos by investigating the equilibration temperature and time during initial PROH exposure prior to cryopreservation. Materials and Methods : The late 2-cell mouse embryos were obtained from 5-6 week old ICR mice and were exposed to 1.5 M PROH in phosphate-buffered saline (PROH-PBS) at 37℃, room temperature (2-24℃), and 4℃ for 30 min. The PROH was washed off the 2-cell mouse embyos by incubating them for 5min each in 1, 0.5, and then 0 M PROH-PBS in the order named. The 2-cell mouse embryos were subsequently cultured in Ham`s F-10 medium and embryo development was assessed at 24, 48, and 96 hours. Results : Incubation of 2-cell mouse embryos at 37℃ for 30 min significantly impaired embryo development to blastocysts. Embryo development after exposure to PROH at 37℃ for 10 min was 8.3% (P=0.047) and embryo development for 30 min was 5.4% (P=0.038). Incubation of 2-cell mouse embryos at room temperature or 4℃ for up to 30 min did not significantly reduce embryo development. Cryosurvival of 2-cell mouse embryos exposed to PROH at room temperature or 4℃ was similar. Conclusion : These findings suggested that pronanediol is toxic to 2-cell mouse embryos in a temperature- and time-dependent fashion. Cryopreservation of 2-cell mouse embryos after exposure at 4℃ appears to be no better than after exposure at room temperature.

전전뇌증

고희은 ( Hee Eun Ko ),이일한 ( Il Han Lee ),김지훈 ( Jin Hoon Kim ),심의섭 ( Ey Sup Shim ),고재환 ( Jae Whoan Koh ),김용봉 ( Yong Bong Kim ) 대한산부인과학회 2002 Obstetrics & Gynecology Science Vol.45 No.11

Holoprosencephaly is a rare developmental defect due to incomplete cleavages of the prosencephalon during the third week of fetal development. It was associated with chromosomal anomalies, genetic syndrome, teratogen, or genetic disorder of non-syndromic

원발성 난관암

고희은 ( Hee Eun Ko ),노지현 ( Ji Hyun Noh ),강윤경 ( Yun Kyung Kang ),고승희 ( Seung Hee Goh ),고재환 ( Jae Whoan Koh ),김용봉 ( Yong Bong Kim ) 대한산부인과학회 2003 Obstetrics & Gynecology Science Vol.46 No.1

Primary carcinoma of the fallopian tube is very rare and accounts for less than 1% of all gynecologic malignancies. Nonspecific symptoms are presented, so primary carcinoma of the fallopian tube was confirmed postoperatively on the basis of the pathologic

한국인에서 자궁내막증 발생과 progesterone receptor gene polymorphism (PROGINS) 및 estrogen receptor gene polymorphism과의 관계

고희은 ( Hee Eun Ko ),황동희 ( Dong Hee Whang ),노지현 ( Ji Hyun Noh ),김용봉 ( Yong Bong Kim ) 대한산부인과학회 2006 Obstetrics & Gynecology Science Vol.49 No.7

목적: 자궁 내막증은 자궁 내막 조직이 자궁 외에 존재하는 것을 특징으로 하는 질환으로서 만성적인 골반통, 생리통, 성교통을 유발하며 불임의 원인이 될 수 있는 진행성 질환이다. 오랜 기간의 연구에도 불구하고 자궁내막증의 병인에 대하여 확실하게 밝혀진 것이 없지만 자궁내막증이 에스트로겐에 의존적인 질환이며 프로게스테론의 투여로 인하여 증상의 치료가 가능하다는 사실에 대해서는 이견이 많지 않다. 일부 유전적 연구 결과들을 살펴보면 자궁내막증과 에스트로겐 및 프로게스테론 수용체 유전자의 특정 다형성 부위와 연관성이 있음을 알 수 있다. 본 연구는 한국인 여성을 대상으로 하여 프로게스테론 수용체 유전자의 다형성 (PROGINS) 양상과 에스트로겐 수용체 유전자의 PvuII 및 XbaI 다형성 양상을 분석하여 자궁내막증 환자와 대조군에 차이가 있는지를 알아보고자 고안되었다. 연구 방법: 수술 및 병리조직 소견을 통하여 자궁내막증을 확진받은 100명의 환자와 건강검진을 시행 받은 일반 인구군 110명을 대상으로 하였다. 대상 환자들의 말초 혈액에서 DNA를 추출한 후 프로게스테론 수용체의 유전자 다형성 검사를 PCR-SSP (Sequence specific primer) 방법으로 시행하였고, 에스트로겐 수용체-alpha 유전자의 다형성을 PvuII 및 XbaI 두 가지 제한효소를 이용한 PCR-RFLP (Restriction fragment length polymorphism) 방법을 이용하여 검사한 후 자궁내막증 환자군과 건강대조군에 있어서 특정 유전자 다형성의 빈도에 차이가 있는지 X2 검정을 통하여 통계 분석하였다. 결과: PROGINS 다형성 양상에서는 자궁내막증군과 대조군에서 각각 1명에서만 T1/T2 이형접합자로 확인이 되었고 나머지 개체에서는 모두 T1/T1 동형접합자임이 확인되었다. 에스트로겐 수용체 유전자 PvuII 다형성 분석에서는 자궁내막증군에서 (pp) 유전자형을 가진 개체는 32명 (32%)으로 대조군의 50명 (45.5%)에 비해 유의하게 낮은 수치를 보였다(P<0.05). (Pp)와 (PP) 유전자형의 빈도는 양 군간에 유의한 차이가 없었다. (p) 유전자의 빈도는 자궁내막증군에서 109 (54.5%), 대조군에서 142 (64.5%)이었고 (P)유전자의 빈도는 자궁내막증군에서 91 (45.5%), 대조군에서 78 (35.5%)로 양군 간에 유의한 차이를 확인할 수 있었다(P<0.05). 에스트로겐 수용체 유전자 XbaI 다형성 분석에서는 자궁내막증군과 대조군에 있어서 (xx), (Xx), (XX) 유전자형의 빈도에 있어서 유의한 차이가 없었으며 (x) 유전자와 (X) 유전자의 빈도에 있어서도 모두 통계적으로 유의한 차이가 없었다. 결론: 이러한 본 연구의 결과는 한국인 자궁내막증 환자에 있어서 에스트로겐 수용체 유전자의 PvuII 다형성이 중요한 병인으로 작용할 수 있음을 시사하며 이러한 자료는 자궁내막증의 병인을 규명하는데 유용한 정보를 줄 것으로 생각된다. Objective: Endometriosis is defined as the presence of endometrial tissue outside the uterus, causing diverse progressive diseases such as infertility, pelvic pain, and dysmenorrhea. Although the mechanisms responsible for its pathogenesis and progression remain poorly understood, it is well established that endometriosis grows and regresses in an estrogen-dependent fashion and that administration of progestin can relieve the symptoms caused by endometriosis. Some genetic studies have demonstrated the association between the estrogen or progesterone receptor gene polymorphism and the susceptibility to endometriosis. This study was designed to investigate the associations of the polymorphism of the progesterone receptor gene (PROGINS), PvuII and XbaI polymorphism of estrogen alpha receptor gene with endometriosis in the Korean population. Methods: A total of 100 women with surgically diagnosed and histologically confirmed endometriosis of stage III-IV were enrolled as a patient population and a total of 110 female control subjects undergoing health examination were enrolled as control population. Following isolation of genomic DNA from peripheral blood, polymerase chain reaction-sequence specific primer assays were performed for analyzing progesterone receptor gene polymorphism (PROGINS) and polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism assays were performed for analyzing estrogen alpha receptor gene PvuII and XbaI polymorphism. The X2-test was used to compare genotype distributions between endometriosis and controls. Results: Only one patient in each group was found to be T1/T2 heterozygote, and the rest of the subjects were all T1/T1 homozygotes. Analysis of PvuII has shown that the significantly lower number of patients had (pp) genotypes and (p) alleles in the endometriosis group compared with the control group (32 (32%) vs. 50 (45.5%), P<0.05; 109 (54.5%) vs. 142 (64.5%), P<0.05, respectively). There was no difference in the genotype distribution or allele frequency in XbaI polymorphism between the endometriosis group and the control group. Conclusion: These results suggest that the PvuII polymorphism of the estrogen receptor-alpha gene is associated with the risk for endometriosis in the Korean population.

원인불명 불임증 환자 치료를 위한 과배란 유도후 자궁강내 인공수정술시 임신율에 관한 연구

안성호 ( Sung Ho Ahn ),이일한 ( Il Han Lee ),고희은 ( Hee Eun Ko ),정경남 ( Kyung Nam Chung ),심의섭 ( Ey Sup Shim ),고재환 ( Jae Whoan Koh ),김용봉 ( Yong Bong Kim ) 대한산부인과학회 2002 Obstetrics & Gynecology Science Vol.45 No.11

목적: 원인불명 불임증 환자 치료를 위하여 과배란유도후 자궁강내 인공수정술시, 과배란유도 방법에 따른 임신율을 비교 분석하여 효과적인 치료 방법을 모색하고자 하였다. 연구 방법: 1996년 3월부터 2000년 2월까지 원인불명 불임증으로 진단받은 40세 이하의 환자 39명을 대상으로 총 67주기의 과배란유도후 자궁강내 인공수정술을 시행하였으며, 과배란유도는 clomiphene citrate/hMG 병합, hMG 단독의 방법으로 시행하여 각 방법 당 임신 Objective: To determine which regimen for controlled ovarian hyperstimulation is the most effective in achieving pregnancy after intrauterine insemination in the treatment of unexplained infertility. Materials and Methods: From March 1996 to February 2000