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Comet Assay를 이용한 전통발효식품인 배추김치의 항유전 독성효과
지승택(Seung-Taek Ji),박종흠(Jong-Heum Park),현창기(Chang-Kee Hyun),신현길(Heuyn-Kil Shin) 한국식품영양과학회 2000 한국식품영양과학회지 Vol.29 No.2
본 연구에서는 우리나라 전통발효식품인 배추김치의 암예방 기능성을 규명하기 위하여 항유전독성을 측정할수 있는 Comet assay(일명 single cell microgel electrophoresis)를 사용하였다. 배추김치를 물 분획, 유기용매(n-hexane, chloroform, ethyl acetate) 분획, 불용성 분획과 우세발효균주들로 분리하였다. 배추에서 분리되어진 물 분획, n-hexane 분획, chloroform 분획, ethyl acetate분획, 불용성 분획은 non-tumoral normal 3T3 세포의 DNA손상에 대하여 항유전 독성효과를 나타내지 못하였다. 그러나 배추에서 분리된 발효균주 bacteria 1과 bacteria 2는 유의성 있게 3T3 세포의 DNA 손상을 감소시키는 항유 전독성 효과를 나타내었으나 bacteria 3, 4, 5는 항유전독성 활성을 나타내지 않았다. This study carried out to elucidate the cancer chemoprevention of Korean native fermented food, baechu kimchi using Comet assay (in other words, single cell microgel electrophoresis). For this purpose, baechu kimchi was fractionated by water, n-hexane, chloroform and ethyl acetate. 5 strains of dominant fermented bacteria were isolated from baechu kimchi. The water fraction, n-hexane fraction, chloroform fraction, ethyl acetate fraction and water insoluble fraction showed no antigenotoxicities in non-tumoral normal 3T3 cells. Among 5 bacteria isolates from baechu kimchi, two isolates bacteria 1 and 2 strongly inhibited genotoxicity of N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) in non-tumoral normal 3T3 cells (p<0.05). Bacteria 3, 4 and 5 were also not antigenotoxic.
작약(Paeoniae radix) 추출물의 식후 과혈당 억제작용
지승택(Seung-Taek Ji),이성진(Sung-Jin Lee),이강은(Kang-Eun Lee),손용태(Yong-Tae Son),정요경(Yo-Kyung Chung) 한국식품영양과학회 2002 한국식품영양과학회지 Vol.31 No.1
본 연구에서는 작약 추출물의 식후 과혈당 억제작용을 조사하였다. 작약 유기용매(hexane, ethyl acetate, butanol, water)추출물들을 high performance liquid chromatography를 이용하여 분획한 분획물(fraction)들의 α-glucosidase(EC 3. 2. 1. 20) 저해제를 탐색하였다. 작약 ethyl acetate 추출물의 11, 12, 18, 19번 분획물들은 20 μg/mL에서 각각 85%, 84%, 77%, 77%의 강력한 저해 활성을 나타내었으며, 작약 ethyl acetate 추출물의 10~19번 분획을 경구투여한 in vivo당(maltose) 부하 실험에서도 양성대조군과 비교하여 유의성 있게 22%의 혈당을 낮추었다. 따라서 본 연구의 in vitro와 in vivo 실험을 통하여 확인 된 α-glucosidase 저해 활성을 갖는 작약 분획물들은 식후의 혈당상승 작용을 억제하는 새로운 nutraceutical 소재와 항당뇨 신약개발을 위한 탐색자원으로서 매우 가치있는 자원으로 기대된다. This study was carried out to investigate the inhibitory effect of extracts from Paeoniae radix on postprandial hyperglycemia. Organic solvent (hexane, ethyl acetate, butanol, water) extracts from Paeoniae radix were fractionated by high performance liquid chromatography. These fractions were used to screen α-glucosidase (EC 3. 2. 1. 20) inhibitors by microplate colorimetric assay. The fractions 11, 12, 18, 19 of ethyl acetate extract from Paeoniae radix showed inhibitory activity by 85%, 84%, 77%, 77% at concentration of 20 μg/mL, respectively. The selected fractions (no. 10~no. 19) significantly reduced by 22% the blood glucose elevation in comparison with positive control in mice loaded with maltose. The fractions of Paeoniae radix were determined in vitro inhibitory activity on α-glucosidase and in vivo inhibition effect on blood glucose elevation in mice. Therefore, these results suggest that the extract of Paeoniae radix can be used as a new nutraceutial for inhibition on postprandial hyperglycemia as well as resource pool for lead compounds as a α-glucosidase inhibitor.
정석규,박종흠,지승택,박금주,김해홍,현창기,신현길,Jeong, Seok-Kyu,Park, Jong-Heum,Ji, Seung-Taek,Park, Kum-Ju,Kim, Hai-Hong,Hyun, Chang-Kee,Shin, Heuyn-Kil 한국식품과학회 2000 한국식품과학회지 Vol.32 No.4
Comet assay를 이용하여 방사선 조사육의 조사여부 및 조사량을 판별해내는 방법을 개발하기 위해 1-10 kGy의 감마선 조사량으로 조사한 육조직에서 일어나는 DNA 손상을 측정하였다. Comet assay에 있어 최적의 comet image를 얻기 위해 세포 분리, 세포 lysis 및 전기영동에 대한 여러 조건들을 적용하여 최적의 조건을 확립하였다. DNA 손상도는 관찰되는 comet의 평균 tail length와 tail length에 의해 구분된 4 손상 등급에의 분포, 그리고 그 분포비율에 의해 본 연구에서 제시한 식에 의해 계산한 relative damage index(RDI) 값 등으로 비교 판정하였다. 평균 tail length와 RDI 값은 조사량이 증가함에 따라 증가하여 DNA 손상도가 증가됨을 나타내었으며, 평균 tail length으로는 조사량 간의 차이를 명확히 분별하기가 어려웠던 반면 RDI 값에 의하면 조사여부 및 조사량을 판별하기에 적합함을 알 수 있었다. 국내산 한우육과 수입 냉장육에 대하여 blind test를 실시한 결과 수입육이 높은 DNA 손상도를 나타내었는데 그 RDI 값은 방사선 조사에 의한 값보다는 비교적 낮은 것이어서 수입육의 DNA 손상은 방사선 조사가 아닌 저온처리의 결과인 것으로 판단되었다. 본 연구의 결과로부터 Comet assay가 우육의 방사선 조사여부 및 조사량 판별에 유용한 기술로 응용될 수 있을 것으로 판단되었다. DNA damages in post-mortem bovine muscle samples caused by gamma irradiation at doses of 1 to 10 kGy were determined by Comet assay. When the cell extract was prepared in a physical method and followed by neutral lysis and neutral electrophoresis, the optimal comet images could be obtained. DNA damages were evaluated from the mean tail length, the distributions of comet images in 4 groups divided by tail length and the relative damage index (RDI) values calculated from the distribution pattern. The mean tail length and RDI value were increased by increasing the irradiation dose, and the RDI value was found to be useful as an index for discriminating of irradiation and measuring the irradiated dose. Blind tests using Korean domestic (Hanwoo) and imported beef samples showed a higher RDI value for the latter. However, the value was lower than those of irradiated samples indicating that the cause of DNA damages in the imported beef samples might be not irradiation but low-temperature treatments. It was concluded from the results of this study that the irradiated beef and its irradiated dose could be detected and predicted by Comet assay.