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Purification and Characterization of Polyphenol Oxidase in Sweet Potato (Ipomoea batatas)
정수자(Soo-Ja Chung) 한국식품영양과학회 1988 한국식품영양과학회지 Vol.17 No.4
갈변반응에 관여하는 polyphenol oxidase(PPO : EC 1.10.3.1)를 한국산 고구마(Ipomoea batatas, var : Hong-mi)로부터 추출하여 ammoniun sulfate 분획 및 DEAE-cellulose column chromatography법에 의하여 정제한 결과, 효소활동도는 23.1배였으며 enzyme activity 수율은 41.5%이었다.<br/> 이 효소는 일반 전기 영동법에 의하여 8개의 isozymes 으로, 또한 isoelectric focusing에 의하여 pI가 각각 다른 12개의 isozymes으로 분리되었고 그 pI의 범위는 3.2-9.6이었으며, Isoelectric focusing에 의하여 분리된 각 isozyme의 specific activity는 6,000-46,700U / ㎎ protein의 범위에 있었다.<br/> 고구마 중의 PPO는 65℃이하에서는 안정하였으며 85℃에서는 1분 가열에 의하여 약 50%의 효소활성이 상실되었고, pH optimum은 6.0-6.5이었다. o-diphenol이 이 효소의 가장 좋은 기질로서, 이 효소는 o-diphenolase임이 확인되었고, catechol에 대한 Km치는 6.7mM로 나타났다. 또한 이 효소에 대한 저해작용은 dithiothreitol, cysteine 및 ascorbic acid 순으로 크게 나타났다. The present work was undertaken to investigate the purification and characterization of polyphenol oxidase (PPO ; EC 1.10.3.1) in sweet potato, particularly the number of PPO isozymes, and PPO properties such as pH optimum, heat stability, substrate specificity, kinetics, and inhibitor studies. The purification achieved was 23.1 fold from crude extract with a yield of 41.5%. Eight PPO isozymes and twelve PPO isozymes were detected by disc polyacrylamide gel electrophoresis and isoelectric focusing, respectively.<br/> The specific activity of each isozyme separated by isoelectric focusing was in the range of 6,000-46,700 U/㎎ protein. This enzyme was stable below 65℃ and the pH optimum of PPO occurred at 6.0-6.5. The substrate specificity of sweet potato PPO showed the high affinity toward the odiphenolic compounds. Km and Vmax for catechol were found to be 6.7 mM and 20△A/min, ㎎ protein, respectively. Inhibitor studies indicated that dithiothreitol was the most potent among the inhibitors used in<br/> the present work.
Eicosapentaenoic Acid Production of Alteromonas putrefaciens KS - 90 Isolated from Fish Intestines
안문구(Mun-Gu An),정수자(Soo-Ja Chung),류병호(Beung-Ho Ryu) 한국식품영양과학회 1991 한국식품영양과학회지 Vol.20 No.3
EPA를 생산하기 위하여 생선내장에서 분리한 세균에서 EPA를 분비하는 균주 KS-90을 선별하여 분리 동정한 결과 Alteromonas putrefaciens KS-90으로 명명하였다. Alteromonas putrefaciens KS-90은 우수한 EPA 생산균주였으며, 4℃~25℃와 pH 7.0에서도 EPA의 분비를 확인하였다. A. putrefaciens KS-90은 PYM배지 (1.0% peptone, 0.5% yeast extract, 0.025% meat extract, 2.0% glucose 및 1/2 artificial seawater, pH 7.0)로 25℃에서 48시간 배양시켰을 때 건조균체의 g당 18㎎의 EPA를 생산할 수 있으며, 이 값은 생산된 전체 지방산의 24.7%를 차지하였다. Marine bacteria of fish intestines were screened for high eicosapentaenoic acid (EPA) productivity. An isolated bacteria, isolate, KS-90, identified and designated as Alteromonus putrefaciens KS-90. A. putrefaciens KS-90 was found to be a rich source of EPA production and it was observed on incubation at 4~12.5℃ and pH 7.0. The production of EPA reached 18㎎/g of dry cell weight when A. putrefaciens KS-90 was grown in the medium containing 1.0% peptone, 0.5% yeast extract, 0.025% meat extract and 2.0% glucose in 1/2 concentration of an artificial seawater, pH 7.0 for 48 hr at 25℃. This value accounted for 24.7% of the total fatty acid in the extractable lipids.
Aspergillus awamori, B-2의 균사체 고정화 의한 Melanoidin 탈색
류병호(Beung-Ho Ryu),김혜성(Hye-Sung Kim),하미숙(Mi-Suk Ha),정종순(Jong-Sun Jung),빈재훈(Jae-Hun Bin),이영숙(Young-Sook Lee),정수자(Soo-Ja Chung) 한국식품영양과학회 1989 한국식품영양과학회지 Vol.18 No.1
곰팡중에서 melanoidin의 탈색력이 있는 Aspergillus awamori, B-2을 선별하여 탈색력을 실험하였다. Aspergillus awamori, B-2는 3.0% glucose, 0.5% yeast extract, 0.1% KH₂PO₄ 및 0.05% MgSO₄ㆍ7H₂O을 함유하는 melanoidin 용액(pH 7.0) 에서 5일 동안 37℃에서 배양했을 때 가장 높은 탈색력을 나타내었다. 탈색력을 효과적으로 하기 위하여 Ca - alginate로 고정화하여 최적조건에서 계속적으로 탈색하였을대 mycelia 단독보다는 더욱 효과적이었다. Melanoidin 탈색력은 최적 조건에서 10일 동안 반응하였을때 약 70%을 나타내었다. 고정화한 mycelia의 재사용에 의한 계속적인 탈색을 시도하였던바 15일 동안 연속적으로 반응시켜도 약 60-70%의 탈색력을 계속 유지하였다. Aspergillus awamori, B-2 which has a high ability to decolorize melanoidin was selected among various fungi.<br/> Aspergillus awamori, B-2 showed the highest decolorization activity when it was cultivated in a melanoidin medium containing 3.0% glucose, 0.5% yeast extract, 0.1% KH₂PO₄and 0.05 % MgSO₄ㆍ7H₂O at an initial pH 7.0 at 37℃ for 5 days.<br/> Mycelia immobilized system with Ca-alginate was more effective on melanoidin decolorization activity showed approximately 70% in 10 days under the optimal conditions.<br/> Continuous decolorzation of melanoidin using reuse of immobilized mycelia showed an almost constant decolorization of abort 60-70 % for 15 days.