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단이론과 모멘트방법을 이용한 데옥시리보뉴클레오사이드의 평형상수의 계산 및 비교
이주원,노경호 ( Ju Weon Lee,Kyung Ho Row ) 한국공업화학회 1997 공업화학 Vol.8 No.3
데옥시리보뉴클레오사이드의 평형상수를 단이론과 모멘트방법에 의해서 일정 용매 조성법 역상 고성능 액체크로마토그래피(Reversed-Phase High Peformance Liquid Chromatography)를 이용하여 계산하였다. 이동상은 물을 기본으로 유기용매로서 acetonitrile과 methanole을 사용하였다. 단이론은 선형 흡착식으로부터 나온 모델로 일정한 유속으로 용매가 colunm의 단을 평형을 이루면서 지나간다는 가정 하에서 이루어졌다. 모멘트방법은 실험결과로부터 얻은 peak에서 첫 번째 절대 모멘트를 구하여 평형상수를 계산하는 방법이다. 이 두 가지 방법에 의한 다섯 가지의 데옥시리보뉴클레오사이드의 평형상수값은 서로 근사하였고, 용량인자를 이용하여 구한 평형상수의 값과도 비슷하였다. 평형상수는 이동상에서의 organic modifier의 양의 semi-log의 관계식으로 표시되었고 단이론에 의해 계산된 용출곡선은 실험값과 잘 일치하였다. The equilibrium constants of five deoxyribonucleosides (dCyd, dUrd, dGuo, dThd, dAdo) were estimated by the plate theory and the moment method under isocratic conditions of the Reversed-Phase High Performance Liquid Chromatography (RP-HPLC). The mobile phase in this system was composed of water and organic modifiers(acetonitrile and methanol). The plate theory of linear adsorption isotherm was treated on the basis of continuous flow of eluent through the plates of the column. The moment method was utilized to find the equilibrium constant from the first absolute moment of experimental data. The equilibrium constants of five deoxyribonucleosides in the two methods were very close, and also the equilibrium constants calculated by capacity factor were similar to those by both the plate theory and the moment method. The equilibrium constant was expressed as a semi-log function of the quantity of organic modifier. Excellent agreements between the calculated elution profile by the plate theory and the experimental data were observed.
Step - Gradient Mode 를 이용한 인지질의 분리
이주원,노경호 ( Ju Weon Lee,Kyung Ho Row ) 한국공업화학회 1997 공업화학 Vol.8 No.4
대두에 포함된 유용 인지질 PE, PI, PC를 분리하기 위해서 정상 HPLC를 이용하였다. 이동상으로 hexane, isopropanol, methanol을 사용하였고 일정용매조성법으로는 세 물질을 분리할 수 없었기 때문에 구배용매조성법을 적용하였다. 최적 분리조건을 구하기 위해서 단 이론과 step-gradient mode에서의 용량인자를 계산하는 식으로부터 농도분포곡선을 계산하였다. 계산 결과에 의하면 PE는 일정용매조성법(hexane/ isopropanol / methanol=90/5/5 vol.%)에서 분리하고 PI와 PC를 분리하기 위해서는 10분의 구배시간과 두번째 이동상을 hexane /isopropanol/methanol =50/20/30(vol.%)으로 계단함수의 구배용매조성법을 사용하는 것이다. 계산된 최적 분리조건을 실험 data와 비교한 결과 잘 일치하였고 이 제시된 방법은 구배용매조성법에서 최적 분리조건을 구하는데 이용될 수 있었다. Normal-phase HPLC was used to separate the useful phospholipids, PE, PI and PC in soybean lecithin. The mobile phase used in this experiments were hexane, isopropanol and methanol, the gradient mode was applied as the three components could not be separated by the isocratic mode. To find the optimum separation condition, the concentration profiles of effluents were calculated from the plate theory and the capacity factor in step-gradient mode. From the calculated results, PE was separated with hexane /isopropanol/methanol = 90 / 5 / 5 vol.% in isocratic mode and PI and PC were resolved in the conditions of lOmin gradient time and the second mobile phase of hexane / isopropanol / methanol = 50 / 20 / 30 vol.% in step-gradient mode. The agreement between the calculated concentration profile and experimental data was good, so the methodology developed in this work can be used to obtain the optimum separation condition in gradient mode.