LPS로 자극된 Raw 264.7 대식세포에서 한약재복합 추출물의 세포독성 및 항염증 효과

김세기(Se-Gie Kim),박근혜(Geun-Hye Park),박찬익(Chan-Ik Park) 한국화장품미용학회 2016 한국화장품미용학회지 Vol.6 No.1

Amur Corktree, Paeonia lactiflora Pallas, Dictamni Radicis Cortex, nemarrhena asphodeloides Bunge, Inula helenium L have been used as a traditional medicine to treat inflammatory diseases in Korea. This study was designed to investigate the effects of Mixed Extracts from Korean Medicinal Herbs that inhibits lipopolysaccharide(LPS)-induced inflammatory responses in Raw 264.7 macrophages. Raw 264.7 macrophages were treated with various concentrations of the Medicinal Herbs complex (APDAL : Amur Corktree, Paeonia lactiflora Pallas, Dictamni Radicis Cortex, nemarrhena asphodeloides Bunge, Inula helenium L.). Nitric oxide PGE2, IL-6 inhibition effect of APDAL ethanol extracts was above 50% at a 50 μg/mL concentration. The inhibitory effects against the expression of inducible NO syntase (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2) were 65.3%, 42.3% in APDAL ethanol extracts at 50 μg/mL concentration. APDAL ethanol extracts inhibited inducible nitric oxide synthase (iNOS), COX-2 protein level on the LPS-indcued Raw 264.7 cells. In order to evaluate the effect of APDAL ethanol extracts on a proliferation of RAW 264.7 cells, the MTT assay was carried out. results showed that APDAL ethanol extracts has not cytotoxic at 50 μg/mL concentration. Thus, the anti-inflammatory reactions by APDAL ethanol extracts were not affected by the cytotoxic effect. The results suggest the usefulness of developing functional materials using anti inflammatory.

현삼(玄蔘) 추출물이 RBL-2H3 비만세포에서 β-hexosaminidase 및 cytokine 분비에 미치는 효과

김세기 ( Se-gie Kim ) 대한본초학회 2017 大韓本草學會誌 Vol.32 No.6

Objectives : Traditional medicines isolated from natural products often have positive effects in the prevention and healing of various immune disorders, such as allergy and atopic inflammation. Scrophulariae Radix (SR) been used in oriental medicine used for treatment of acute and chronic inflammatory diseases. Mast cells are known to play important roles in the initiation of allergic reactions. In this study, we investigated the effects of SR ethanol extract on inflammatory responses in IgE-stimulated RBL-2H3 mast cells. Methods : Rat basophilic leukemia RBL-2H3 cells were purchased from Korean Cell Line Bank (KCLB No. 22256). Cell viability was measured by MTT assay. Assays for β-Hexosaminidase Secretion : RBL-2H3 cells were sensitized with dinitrophenyl-ImmunoglobulinE (DNP IgE). The next antigen DNP-BSA (25 ng / ㎖) was added for 10 minutes and the reaction was terminated after 5 minutes in the ice bath. To determine β-hexosaminidase release, supernatants were aliquoted into 96-well plates. Samples were mixed with substrate solution and incubated for 1 h at 37 ℃. Absorbance was measured with a spectrophotometer at 405 ㎚. IL-4 and tumor necrosis factor-α (TNF-α) concentrations in cell culture supernatants were measured using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) kits. Results : The cytotoxicity of SRE in RBL-2H3 cells was less than 5%. SRE inhibited DNP-IgE-imduced degranulation of mast cells in RBL-2H3 cells. Also significantly decreased the levels of inflammatory cytokine, IL-4 and TNF-alpha. In this study, the SRE showed potential anti-allergic and antiinflammatory. Conclusions : These results indicate that SRE could be inhibit the allergic response through suppressing the mast cell activation.

Emodin의 항염 및 피부장벽개선 활성 연구

김세기(Se-Gie Kim),최재근(Jae Gurn Choi),장영아(Young-Ah Jang) 한국응용과학기술학회 (구.한국유화학회) 2021 한국응용과학기술학회지 Vol.38 No.6

호장근, 적하수오, 대황, 알로에 등과 같은 생약재의 주요 약리 활성 성분인 emodin은 항산 화, 항균, 항염, 항암, 간보호 등에 효능이 있는 것으로 보고되었다. 본 연구에서는 emodin의 피부 질환 및 기능성 소재로서의 활용 가능성을 알아보기 위해 염증 개선과 피부장벽기능 개선 관련 활성을 확인하였다. human keratinocyte인 HaCaT 세포에 대하여 항염효과를 관찰하기 위해 cytokine억제능은 ELISA kit로, 단백질 발현은 western blot으로 확인하였다. TNF-α (10 ng/mL)/IFN-γ (10 ng/mL)로 활성화된 HaCaT 세포에서 emodin을 농도별(5, 10, 20, 40) μM로 처리한 결과 TNF-α, IL-1β 및 IL-6의 생성량은 emodin의 농도가 증가함에 따라 감소됨을 확인하였다. 염증관련 단백질인 iNOS, COX-2 발현량에 대한 실험결과에서도 emodin 20 µM 농도에서 control 대비 iNOS는 48%, COX-2 는 29%가 저해됨을 확인하였다. 피부장벽기능 개선의 지표로써 filaggrin, involucrin, loricirn의 mRNA 발현 정도와 filaggrin, involucrin, loricirn의 생성량을 확인한 결과 에모딘 농도에 의존적으로 증가하는 우수한 결과가 얻어졌다. 특히 20 µM 농도에서 대조군 대비 2배의 생성량 증가를 보인 filaggrin은 천연보습인자인 NMF의 형성에 관계되는 단백질로 각질층의 보습에 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 결론적으로 emodin의 피부 질환 및 기능성 소재로서의 활용 가능성 중 염증 개선 및 피부장벽기능 개선 소재로 활용될 수 있음을 확인하였으며 향후 추가적인 연구가 수행되면 그 활용 범위가 더 넓어질 수 있을 것으로 사료된다. It has been reported that emodin, a major pharmacologically active ingredient of herbal medicines such as Polygonum cuspidatum, Polygonum multiflorum, Rheum palmatum, and Aloe vera, is effective in antioxidant, antibacterial, anti-inflammatory, anticancer, and liver protection. In this study, to investigate the potential of emodin to be used as a skin disease and functional material, the activity related to the improvement of inflammation and skin barrier function was confirmed. To observe the anti-inflammatory effect on HaCaT cells, which are human keratinocytes, cytokine inhibition was confirmed by ELISA kit and protein expression by western blot. In HaCaT cells activated with TNF-α (10 ng/mL)/IFN-γ (10 ng/mL), emodin was treated with each concentration (5, 10, 20, 40) μM. As a result, It was confirmed that the production amount of TNF-α, IL-1β and IL-6 decreased as the concentration of emodin increased. In the experimental results on the expression levels of inflammation-related proteins iNOS and COX-2, it was confirmed that 48% of iNOS and 29% of COX-2 were inhibited compared to control at a concentration of 20 µM of emodin. As an indicator of skin barrier function improvement, the mRNA expression level of filaggrin, involucrin, and loricirn and the production amount of filaggrin, involucrin, and loricirn were confirmed. and excellent results were obtained with an emodin concentration-dependent increase. In particular, filaggrin, which was produced twice as much as the control at a concentration of 20 µM, is a protein involved in the formation of NMF, a natural moisturizing factor, and is known to play an important role in moisturizing the stratum corneum. In conclusion, it was confirmed that emodin can be used as a material for improving inflammation and improving skin barrier function, which is part of the potential for use as a skin disease and functional material. It is believed that if additional research is performed in the future, the scope of its application can be further expanded.

곰취(Ligularia fischeri), 미역취(Solidago virga-aurea), 삼나물(Aruncus dioicus) 복합 추출물의 항염증 효과

Dong-Hee Kim(김동희),Bong-Jeun An(안봉전),Se-Gie Kim(김세기),Tae-Soon Park(박태순),Gun-Hye Park(박근혜),Jun-Ho Son(손준호) 한국생명과학회 2011 생명과학회지 Vol.21 No.5

본 연구에서는 울릉도 특산 약용 작물 추출물이 항염증에 대한 실험연구가 이루어져 있지 않은 것에 착안하여 LPS에 의해 활성화된 대식세포로부터 유도되는 염증반응에 대한 억제효과를 조사하였다. 울릉도 자생 식물인 곰취, 미역취, 삼나물의 세가지 식물 추출물을 이용하여 피부 염증에 대하여 연구를 하였다. 산화질소와 cytokine의 생산은 면역세포의 대표적인 염증인자이다. 세포는 LPS 처리 후 한 시간 뒤에 곰취, 미역취, 삼나물 70% 아세톤 추출물을 처리를 하였다. 세포 독성이 나타나지 않는 농도인 1, 10, 100 ㎍/㎖를 사용하였다. 곰취, 미역취, 삼나물 70% 아세톤 추출물은 NO, PGE₂, TNF-α, IL-1β, IL-6, iNOS, COX-2의 생성을 저해 시켰다. PGE2는 100㎍/㎖의 농도에서 60%에 가까운 저해율을 나타내었다. iNOS와 COX-2 역시 100 ㎍/㎖의 농도에서 각각 54%, 65%가 저해가 되었다. 게다가 곰취, 미역취, 삼나물 70% 아세톤 추출물은 염증성 사이토 카인인 TNF-α, IL-1β, IL-6의 생성을 감소 시켰다. 이러한 결과로 곰취, 미역취, 삼나물 추출물은 염증 예방과 치료에 효과적임을 확인할 수 있었다. The objective of this study was to evaluate the skin inflammation effects of three herb mixture extracts, Ligularia fischeri, Solidago virga-aurea and Aruncus dioicus, which are from Ullung island in Korea. Regulatory mechanisms of cytokines and nitric oxide (NO) are involved in the immunological activity of Raw 264.7 cells. Tested cells were pretreated with 70% acetone extracts of Ligularia fischeri, Solidago virga-aurea and Aruncus dioicus (LSA-A) and further cultured for an appropriated time after lipopolyssacharide (LPS) addition. During the entire experimental period, 1, 10, and 100 ㎍/㎖ of LSA-A had no cytotoxicity. In these concentrations, LSA-A inhibited the production of NO and prostaglandin E₂ (PGE₂), tumor necorsis factor-a (TNF-a), interleukin-1β (IL-1β), interleukin-6 (IL-6) expression of inducible NO synthase (iNOS), and cyclooxygenase-2 (COX-2). LSA-A showed a 60% PGE₂ inhibition rate at 100 μg/ml. iNOS and COX-2 inhibition activities were 54%, and 65% at 100 ㎍/㎖, respectively. In addition, LSA-A extract reduced the release of inflammatory cytokines including TNF-a, IL-1β and IL-6. These results suggest that LSA-A may have significant effects on inflammatory factors, and may be a potential anti-inflammatory therapeutic agent.

마우스 악성흑색종세포에서 울릉도 곰취, 미역취, 삼나물 추출물의 멜라닌 생성 억제 효과

Dong-Hee Kim(김동희),Bong-Jeun An(안봉전),Se-Gie Kim(김세기),Tae-Soon Park(박태순),Gun-Hye Park(박근혜),Jun-Ho Son(손준호) 한국생명과학회 2011 생명과학회지 Vol.21 No.2

현재까지 많은 연구들은 멜라닌 합성과정의 기전을 규명하는데 초점이 맞춰졌으며 이러한 이유로 tyrosinase 저해제 개발에 집중되어 왔다. 이에 본 연구는 울릉도 곰취, 미역취, 삼나물 추출물을 이용하여 미백효과를 검증하였다. tyrosinase 저해 활성을 측정한 결과 울릉도 곰취, 미역취, 삼나물 발효 전 추출물의 경우 33%, 발효 후 추출물의 경우 45% 저해율을 세포 내 tyrosinase 활성 확인 결과 울릉도 곰취, 미역취, 삼나물 발효 전 추출물이 41%, 발효 후 추출물은 56.5%의 활성 저해율을 관찰 할 수 있었으며, 발효 후 추출물이 발효를 하지 않은 추출물보다 미백 효과가 더 뛰어 남을 확인할 수 있었다. 미백 관련 전사 인자인 MITF, TRP-1, TRP-2, tyrosinase의 단백질 발현을 측정한 결과 발효 전 후 추출물은 B16F10 melanoma 세포에서 tyrosinase, TRP-1과 TRP-2의 단백질 생합성을 두 추출물 모두 억제하였지만, 특히 발효 후 추출물의 경우 단백질 발현량이 더 감소하였다. Tyrosinase, TRP-1과 TRP-2의 발현을 조절하는 전사인자로는 MITF가 관여하는 것으로 알려져 있으며, 실제로 MITF는 melanin생성과 관련된 여러 유전자의 발현을 조절하는데 중요한 작용을 하고 있다. 따라서 울릉도 발효 후 추출물이 melanin 생성과 관련된 중요한 세 가지 단백질의 생합성을 전사단계에 서 조절 전사인자인 MITF의 작용에 대한 효과를 확인한 결과 울릉도 발효 후 추출물이 MITF의 단백질 발현을 울릉도 발효 전 추출물보다 생성을 억제하는 효과가 더 높음을 확인하였다. 이러한 결과를 토대로 미백 생합성에 있어서 상위 신호단계에 있는 전사인자 MITF의 활성을 억제함으로써 하위 신호전달 과정을 억제하는 것임을 알 수 있었다. 이상의 결과로 미루어 보아 발효 후 추출물의 미백효과가 있음을 확인 할 수 있었으며 앞으로의 연구를 뒷받침 하여 기능성 소재 개발가능성을 제시하고 있다. The objective of the present study was to evaluate the skin whitening effect of the extracts of 3 herbs, Ligularia fischeri, Solidago virga-aurea and Aruncus dioicus, which were collected from Ullung island. Tyrosinase inhibition activities were 33% in pre-fermented extracts and 45% in post-fermented ones. When tyrosinase activities in B16F10 murine melanoma cells were tested, activities in pre- and post-fermented extracts were 41 and 56.5%, respectively. Thus, the post-fermented extracts might have greater skin whitening effects. The protein expression of MITF, TRP-1, TRP-2, and tyrosinase, which are all skin-whitening related transcription factors, showed that both pre- and post-fermented herbs inhibited protein biosynthesis in B16F10 melanoma cells. Post-fermented herb extracts especially showed a greater decrease of protein expressions. The expression of MITF, a regulatory transcription factor, was also decreased by both extracts but was greater in the post-fermented ones. From the results, it can be concluded that the 3 herb extracts from Ullung island may inhibit melanin biosynthesis by the suppression of MITF activity in a signaling pathway. Results indicate that the post-fermented herbs tested in the present study had skin whitening activities and can be used as functional ingredients for food and cosmetic compositions.

메트포르민의 서방출을 위한 팽윤성 위체류 약물전달시스템 설계

원권연(Kwon Yeon Weon),김세기(Se Gie Kim) 한국산학기술학회 2020 한국산학기술학회논문지 Vol.21 No.3

메트포르민은 제2형 당뇨병의 1차 치료제로 사용되는 약물로 다른 당뇨병 치료제에 비해 투여 용량이 크고 용해도는 높으나 위장관 투과도가 낮은 특성을 갖고 있으며 주로 위장관 상부에서만 흡수되는 이유로 생체이용률이 40~60%로 낮은 편이다. 따라서 본 연구를 통해 위체류 약물전달시스템을 적용하여 제제가 위에 머무르는 시간을 증가시키고 제제로부터 방출된 약물을 서서히 소장으로 이동시킨다면 생체이용률을 증가시킬 수 있을 것으로 기대된다. 팽윤성 시스템은 다른 위체류 약물전달시스템에 비해 안정성이 높아 개발목표기술로 선정하였고, 팽윤성 기제로는 기존의 연구와 다르게 카라기난과 히프로멜로오스를 병용하여 차별성을 확보하였다. 카라기난과 히프로멜로오스 병용 시스템은 각각의 함량이 15/110 질량분율일 때 가장 높은 팽윤성과 적절한 서방성 용출패턴을 나타내었다. 또한 각각의 함량이 15 %와 14 %가 되도록 제조한 메트포르민 정제를 시판 정제와 비교 시 더 우수한 팽윤성이 나타남을 확인하였다. 결론적으로 본 연구 결과에 의해 메트포르민의 서방출을 위한 새로운 팽윤성 위체류 약물전달시스템이 개발되었으며 다양한 주성분에 대한 추가적인 연구가 수행되면 의약품, 화장품, 건강기능식품 등의 분야에서 효과적인 약물전달시스템으로 응용될 수 있을 것으로 기대된다. Metformin is a recommended first-line therapy drug for type 2 diabetes patients. However, compared to other oral antidiabetic drugs (OAD), metformin has a large unit dosage, with bioavailability of 40-60%. This limiting bioavailability is because metformin is absorbed only in the upper gastrointestinal tract as a BCS class 3 drug. Hence, we propose that applying the Gastroretentive Drug Delivery System (GRDDS) and extending drug release time in the stomach will result in improved bioavailability. We selected the swelling type delivery system, as it is considered the most stable gastroretention technology compared to other GRDDSs. We modified the swelling excipient by using a natural swelling excipient to form a swelling tablet made of carrageenan and hydroxypropyl methylcellulose (HPMC). Our results indicate that the swelling complex tablet made of carrageenan and HPMC has a good swelling ability and shows required sustained release in a dissolution pattern. In addition, the carrageenan complex has a better swelling ability than the marketed metformin tablet, as determined by the ratio, (swelling ability)/(excipient weight). Taken together, our results indicate that the carrageenan complex can be developed as a good swelling excipient. Further optimizations are required for the commercialization of the carrageenan complex.

Inhibitory Activity of Blueberries on UVB-induced Oxidative Stress and Matrix Metalloproteinase Expression in Human Skin Fibroblasts

Young Ah Jang(장영아),Se Gie Kim(김세기) 한국생명과학회 2019 생명과학회지 Vol.29 No.12

자외선B(UVB: 290-320 nm) 방사선으로도 알려진 중간 파장 태양광선은 인간에게 조기 노화 및 산화손상에 의존하는 피부암을 유발할 수 있다. UVB가 유발하는 반응성 산소종(ROS)의 형성은 종종 이러한 광선에 과도하게 노출되는 결과로 MMP-1과 MMP-3와 같은 매트릭스 금속단백질(MMP)을 활성화할 수 있다. 이 효소들은 인간의 섬유질에서 type 1형 콜라겐을 분해한다. 본 연구에서는 블루베리(EEB)의 에틸 아세테이트 추출물의 항산화 및 항노화 효과를 평가했다. 블루베리의 항산화 실험은 DPPH 분석과 CCD-986sk 세포를 사용하여 ROS 생성을 평가했다. 블루베리의 주름방지 효능을 평가하기 위해 MMP-1 생성과 type 1형 procollagen 합성을 평가하고 Western Blot과 RT- PCR을 통해 MMP 1, 3의 발현량을 평가하였다. EEB는 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) 라디칼의 소거능을 보이며 UVB에 유도된 ROS의 생성을 저해하였다. 또한 EEB는 procollagen 생성감소 및 MMP-1 생성량의 증가 등 광노화 및 피부암과 관련된 UVB로 야기되는 과정을 억제하였다. 더 정확히 말하면, EEB (50μg/ml)는 MMP-1과 -3의 mRNA와 단백질 발현을 현저히 억제하였다. EEB의 항노화 효과는 항산화 작용에 기인한다. 이러한 연구 결과는 EEB가 type 1형 procollagen, MMP-1, MMP-3의 수준을 조절함으로써 인간 섬유아세포에서 UVB가 유발하는 노화로부터 보호 효과를 가지고 있음을 나타낸다. Intermediate-wavelength solar radiation, also known as ultraviolet B (UVB: 290-320 nm) radiation, may cause premature aging and oxidative damage-dependent skin cancer in humans. UVB-induced formation of reactive oxygen species (ROS)-often a consequence of excessive exposure to these rayscould activate matrix metalloproteinases (MMPs) such as MMP-1 and MMP-3. These enzymes break down type I collagen in human fibroblasts. In this study, we assessed the antioxidant and anti-aging effects of ethyl acetate extract of blueberry (EEB). An antioxidant test in blueberries evaluated ROS production using CCD-986sk cells and DPPH assay. In order to evaluate the anti-wrinkle efficacy of blueberries, the MMP-1 production and type 1 procollagen synthesis evaluated and the expression of MMP 1, 3 were tested through Western blot and RT- PCR. EEB exhibited 2,2-diphenyl-1-picrylhy-drazyl (DPPH) radical scavenging activity and reduced the production of UVB-induced ROS. Also, EEB inhibited UVB-induced processes associated with photoaging and skin cancer, such as reduction in procollagen production and increase in MMP-1 production. More precisely, EEB (50 μg/ml) markedly suppressed mRNA and protein levels of MMP-1 and -3. The anti-aging effects are attributable to the antioxidant activity of EEB. These findings indicate that EEB has a protective effect against UVB-induced aging in human fibroblast cells by regulating the levels of type-1 procollagen, MMP-1, and MMP-3.

버섯복합물의 항산화 효과

전동하(Dong Ha Jun),김희영(Hui Yeoug Kim),한상익(Sang Ik Han),김영훈(Young Hun Kim),김세기(Se Gie Kim),이진태(Jin Tae Lee) 한국생명과학회 2013 생명과학회지 Vol.23 No.3

이 연구에서는 동충하초, 영지, 상황 버섯 복합물의 항산화 효과를 평가하였다. 3가지 버섯을 각각 70% 에탄올 추출하여 80:10:10의 비율로 혼합하여 평가를 실시하였다. DPPH radical을 이용한 전자공여능 측정에서는 버섯 복합물이 500 μg/ml의 농도에서 66%의 효과를 나타내었고, ABTS radical cation decolorization 측정은 50 μg/ml에서 73%, 500 μg/ml에서 대조군인 BHA와 유사한 효과를 나타내었다. Superoxide anion radical 소거능 측정은 버섯 복합물 10 μg/ml에서 41%로 대조군인 BHA에 비해 3배 이상의 높은 효과가 있었고, 50 μg/ml, 100 μg/ml에서도 BHA 보다 효과가 높았으나, 500 μg/ml에서는 낮은 효과를 나타내었다. Lipid oxidation 측정 결과 Cu<SUP>2+</SUP>군보다 Fe<SUP>2+</SUP>군이 지방 산패 억제능이 뛰어났다. SOD 유사활성능 측정은 500 μg/ml에서 13%의 낮은 효과를 나타내었다. 이 결과, 버섯 복합물의 항산화 효과가 아주 우수했으므로, 항산화 소재로서의 가능성을 확인할 수 있었다. In this study, we evaluated the antioxidant effects of Cordyceps, Ganoderma lucidum (Curtis) P. Karst and Phellinus linteus complexes. Three mushrooms were extracted using 70% ethanol, respectively, in ratios of 80:10:10(?). The electron-donating ability was measured using the DPPH radical mushroom complexes and showed effects of 66% in 500 μg/ml. ABTS radical cation decolorization measured 73% in 50 μg/ml and had an effect similar to BHA in 500 μg/ml. In their superoxide anion radical scavenging ability, the mushroom complexes showed an effect of 41% in 10 μg/ml. The effect on the control of BHA was more than three times as high as BHA in 50 μg/ml and 100 μg/ml concentration. The results showed that lipid oxidation is an excellent inhibitor of lipid oxidation Cu<SUP>2+</SUP>, compared to the Fe<SUP>2+</SUP> group. The results of superoxide dismutase (SOD) activity in the mushroom complexes showed a low effect of 13% in 500 μg/ml. Thus, the results of this study showed that the antioxidant effect of the mushroom complexes was excellent, indicating their potential as an antioxidant material.

우절 에탄올추출물의 미백활성능과 주름저해 효능평가

장영아(Young-Ah Jang),염보슬(Bo-Seul Yeom),김세기(Se-Gie Kim),이진태(Jin-Tae Lee) 한국생명과학회 2019 생명과학회지 Vol.29 No.11

본 연구는 화장품 소재로서 우절 에탄올추출물의 가능성을 확인하기 위한 것이다. 이를 위해 우리는 연근의 마디부분을 70%에탄올로 추출하여 사용하였으며 미백효능 및 주름개선 효과에 대한 생물학적 활성 평가를 수행하였다. 시료의 미백활성을 알아보기 위해 멜라닌세포(B16F10 cells)의 MTT assay를 이용한 샘플의 독성평가와 멜라닌 생성에 영향을 주는 관련 단백질의 발현량을 확인하였다. 시료의 주름활성억제 평가를 위해 collagenase inhibition assay를 수행하였다. 또한 UVB로 유도된 섬유아세포(CCD-986sk cells)의 MTT assay를 이용한 샘플의 독성평가와 matrix metalloprotease (MMP-1) inhibition 및 procollagen synthesis를 평가하였다. 미백활성 평가를 알아보기 위한 western bolt 결과, 멜라닌 생성과 관련된 두 단백질 Tyrosinase related protein-1 (TRP-1, Tyrosinase related protein-2 TRP-2)의 합성이 농도의존적으로 감소됨을 나타내었다. 게다가 우절 에탄올추출물의 collagenase inhibiion 실험의 결과, 500 μg/ml의 농도에서 대조군인 EGCG와 효능이 비슷한 80% 이상의 효과를 나타내었다. Procollagen synthesis 결과 UVB 자극군에 의해 콜라겐 합성은 68.8%로 감소되었으며 시료의 25 μg/ml의 농도에서 80.2%의 콜라겐 합성에 회복능을 보였다. MMP-1 inhibition 실험결과는 25 μg/ml 농도에서 20.2%의 저해능을 나타내었다. 실험 결과는 NRN의 미백 및 주름 억제 효과를 검증하고, 향후 안전한 천연 화장품 재료로 사용될 수 있음을 확인했다. The intention of this study was to confirm the possible use of an ethanol extracts of Nelumbinis Rhizomatis Nodus (NRN) as a cosmetic material. To this end, we extracted NRN with 70% ethanol and performed biological activity evaluation of whitening efficacy and wrinkle reduction. We performed cellular tyrosinase inhibition and melanin contents assay to check the whitening activity of NRN and carried out a toxicity evaluation of NRN via an MTT assay and the amounts of associated proteins that affect melanin production in a melanoma cell line (B16F10). And collagenase inhibitory assay was performed for the evaluation of anti-wrinkle of samples. In addition, a toxicity evaluation using an MTT assay and matrix metalloprotease (MMP-1) and procollagen synthesis inhibition by NRN were evaluated in a fibroblast cell line (CCD-986sk). Western blot results for the whitening activity evaluation revealed that the levels of two proteins related to melanin production, tyrosinase-related protein-1 (TRP-1) and tyrosinase-related protein-2 (TRP-2), were decreased in a dose-dependent manner. Moreover, collagenase inhibition activity at a concentration of 500 μg/ml NRN by measuring epigallocatechin-3-gallate (EGCG) was increased by more than 80% compared to the control group. Meanwhile, procollagen synthesis was reduced by 68.8% in the UVB-induced CCD- 986sk cells group whereas collagen synthesis recovered by 80.2% with 25 μg/ml NRN. The MMP-1 expression rate showed 20.2% reduction at 25 μg/ml. The results of the experiments verified the whitening and wrinkle suppression effects of NRN and confirmed that it could be used as a safe natural cosmetic material in the future.