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      • Component analysis of cultivated ginseng, cultivated wild ginseng, and wild ginseng using HPLC and RAPD methods : HPLC와 RAPD를 이용한 인삼과 산양삼, 그리고 산삼의 성분분석 연구

        김광호 Sangji University 2006 국내박사

        RANK : 231951

        목적 : 이 연구는 생육환경에 따른 차이인 인삼과 산양삼 그리고 자연산 산삼의 감별과 재배지역에 따른 한국산 및 중국산 산양삼의 과학적이고 객관적 지표를 확보하기 위하여 시도되었다. 방법 : 수종의 삼류에 대한 시료를 확보한 후 HPLC를 이용하여 ginsenoside 중 비극성 사포닌인 Rg_(3), Rh_(2)와 극성 사포닌인 Rg_(1), Rb_(1)의 함량을 분석하여 비교하였다. 또한 유전형질을 이용한 분자생물학적 분석을 위해 수종의 시료들에 대해 DNA를 추출한 후 RAPD를 시행하였다. 결과 : 1. HPLC를 이용하여 ginsenoside 중 비극성 사포닌인 Rg_(3), Rh_(2)를 분석한 결과 Rg_(3)는 모든 시료에서 유사하게 존재하여 감별기준으로 적절하지 못함을 알 수 있었다. 2. Rh_(2)는 자연산이나 국내산에서 중국산에 비하여 상대적으로 높은 함량을 나타내었고 인삼에는 함유되어 있지 않음을 알 수 있었다. 따라서 인삼과 산양삼, 혹은 한국산과 중국산을 감별하는데 있어서 중요한 지표물질이 될 수 있음을 알 수 있었다. 3. 극성 사포닌인 Rg_(1), Rb_(1)의 함량은 모든 시료에서 유사하게 존재하여 감별기준으로 적절하지 못함을 알 수 있었다. 4. RAPD를 이용하여 수종의 시료를 분석한 결과 primer-3을 이용한 PCR에서 중국산과 한국산 산양삼, 그리고 인삼의 DNA fragment가 차이를 나타내었다. 5. primer-9를 이용한 PCR에서도 중국산과 한국산 산양삼, 그리고 인삼의 DNA fragment가 차이를 나타내었다.

      • Bayesian Test for the Equality of Gamma Means : 감마 평균의 동질성에 대한 베이지안 검정

        강두영 Sangji University 2006 국내박사

        RANK : 231951

        이 연구의 목적은 두 확률변수 X와 Y가 서로 독립인 감마분포를 따를 때, 두 감마 평균의 동질성에 대한 베이지안 가설검정 절차를 개발하는 것으로서, 부분 베이즈 요인과 내재적 베이즈 요인을 이용하여 베이지안 가설 검정절차를 제안하는 것이다. 모의실험과 실제 자료를 이용하여 제안된 베이지안 가설검정 절차의 유용성을 조사하였다. When X and Y have independent gamma distributions, we develop Bayesian testing procedures for the equality of two gamma means. Using the reference prior, we propose a Bayesian test procedure for the equality of two gamma means using fractional Bayes factor and intrinsic Bayes factor. Simulation study results and a real data example are provided.

      • (The) study of Banhasasim-tang on the chronic acid reflux esophagitis

        신유옥 Sangji University 2018 국내박사

        RANK : 231951

        위식도 역류 질환에 속하는 만성 역류성 식도염의 지속적 증가로 부작용은 적고 효과가 우수한 치료제의 필요성이 커지고 있다. 본 실험에서는 만성 역류성 식도염 동물 모델을 이용하여 반하사심탕의 항산화, 항염증, 항괴사 효과에 대해서 연구하였다. 만성 역류성 식도염은 흰쥐에서 수술로 유도한 후 반하사심탕을 하루에 1 g/kg B.W. 농도로 15일 동안 매일 경구투여 하였다. 식도의 병리학적 변화는 육안적 소견과 H&E 염색을 통한 조직학적 소견으로 분석하였다. 반하사심탕은 증가된 산화적스트레스와 지질과산화를 감소시켰고, 식도 궤양의 육안적 및 조직학적 변화를 낮추었다. 또한, Nrf2의 활성을 통하여 항산화효소인 SOD, GPx-1/2, HO-1을 상승시켰다. 반면, 반하사심탕의 투여는 MAPK와 NF-κB와 같은 염증 경로를 억제하여 염증관련 매개인자 및 싸이토카인의 분비를 감소시켰다. 또한, NADPH oxidase subunit에 속하는 NOX4와 p47phox의 단백질 발현을 감소시켰으며, 괴사인자인 Bax, cytochrome C, Caspase 3를 억제하고 항괴사인자인 Bcl-2를 증가시켜 항괴사 효과를 발휘하였다. 이상의 결과들을 종합적으로 판단해 볼 때, 반하사심탕의 투여는 항산화 효소의 활성화를 통하여 염증과 괴사를 조절하여 식도점막 궤양을 현저하게 개선시켰다. A continuous rise in gastroesophageal reflux disease (GERD) worldwide, especially chronic acid reflux esophagitis (CARE), incites the need for more effective and less adverse effect drugs origined from natural products. Thereby, in the present study, Banhasasim-tang (BHSST) was investigated for antioxidant, anti-inflammatory, and anti-apoptotic activity on CARE using a rat model. A surgically-induced CARE model was established in Sprague-Dawley rats and then treated BHSST (1 g/kg body weight per day) for 15 consecutive days. Esophageal pathological changes were analized using gross examination and hematoxyline/eosin staining. The anti-oxidant, inflammatory, and anti-apoptotic protein levels were determined using Western blotting. The administration of BHSST significantly reduced both the overexpression of serum reactive oxygen species (ROS) and a excessive formation of thiobarbituric acid-reactive substances (TBARS) in esophagus tissue. Thus, the severity of esophageal ulcer was lower in BHSST treated rats than control rats on the gross and histological evaluation. Nuclear factor-erythroid 2-related factor 2 (Nrf2) led to the up-regulation of anti-oxidant enzyme including SOD, GPx-1/2, and HO-1 by binding to antioxidant response element (ARE). Moreover, BHSST administration markedly reduced the expression of inflammatory proteins through mitogen-activated protein kinase- (MAPK-) related signaling pathways and decreased significantly the protein expressions of inflammatory mediators and cytokines by inhibition of nuclear factor-kappa B (NF-κB) activation. The CARE exposure rats showed increased levels of the NADPH oxidase subunit, such as NOX4 and p47phox in the esophagus. However, BHSST treatment completely resolved these CARE-related increases. BHSST also exerted an anti-apoptotic effect, as evidenced by suppression of apoptosis-related gene expressions including Bax, cytochrome C, and Caspase 3 and increase of pro-survival gene expression such as Bcl-2. Taken together, BHSST treatment markedly ameliorated the CARE-related esophageal ulcerations via regulating both inflammation and apoptosis through the activation of the antioxidant pathway.

      • (The) 'golden tide' seaweed Sargassum horneri in Korean coastal waters : identification of genetic origins of floating populations and genetic comparisons between floating and benthic populations

        변서연 Sangji University 2019 국내석사

        RANK : 231951

        Recently, brown seaweeds Sargassum horneri blooming on the eastern coast of China drifted in large biomass with oceanic currents (called “golden tide”) and subsequently floated along the southern coastlines Korea including Jeju Island. These floating populations posed a large threat to both the local economy and coastal ecosystems. I aimed to track geographic or genetic origins of the floating S. horneri populations and to investigate evolutionary relationships and the genetic structure between floating (N=14) and Korean benthic (N=5) populations using two genetic markers, such as mitochondria (mt) DNA cox3 (cytochrome c oxidase subunit 3) and seven microsatellites. Results of genetic structure analysis with microsatellites clearly revealed two separate genetic clusters of each comprised of floating and benthic populations. High levels of inter-population differentiation were detected within Korean benthic samples. Given a shared mtDNA haplotype and oceanic circulation systems, the floating populations may have been originated from the southeastern coast of China (e.g. Zhoushan, Zhejjiang province). The floating populations from the same periods during a 2015-2018 year were genetically more different from one another than those from different periods, suggesting that the floating populations might be of multiple genetic sources within the geographic origin(s). However, my phylogeographic analysis showed that variation in mtDNA cox3 is not sufficiently enough to distinguish floating from Korean benthic populations. Therefore, I further analysed sequence polymorphisms in the whole organelle genomes of a Korean benthic sample (from Jindo Island in the South Sea) in comparison to Chinese sample’s genomes to trace genetic origins of floating biomass more precisely. Using mitochondrial and chloroplast genomes of S. horneri from Nanji Island, Zhejiang in China as a reference, I successfully mapped a mitochondrial genome of 34,620 bp and a chloroplast genome of 124,068 bp for the Korean benthic sample. I found that although the mt genome had a shorter length in size than the chloroplast genome, it had considerably more variable sites. MtDNA cox2 (cytochrome c oxidase subunit 2) gene showed the highest number of six Single Nucleotide Polymorphism (SNP) sites and an inter-genic region between nad7 (NADH dehydrogenase subunit 7) and trnP (proline tRNA) genes showed a 14 bp insertion/deletion mutation (indel). I am currently testing those ‘candidate’ genetic markers (an indel and SNPs) on the mt genome for discriminating between floating and Korean benthic samples. My thesis will inform management efforts including the development of “S. horneri blooming forecasting system”, which will assist in mitigating ecological and economic damages on the Korean coastal ecosystems in the future.

      • Standardization study of fel ursi, bezoar bovis, and musk using HPLC and GC/MS methods : 웅담·우황·사향의 표준화 연구 : HPLC와 GC/MS 를 이용하여

        김현도 Graduate School Sangji University 2006 국내박사

        RANK : 231949

        목적 : 야생동물 보호법이 세계적으로 확산됨에 따라 야생상태의 웅담·우황·사향을 구하기가 어려운 실정이다. 이러한 상황에서 많은 유사품들이 진품으로 둔갑하여 거래되고 있으므로 이에 웅담·우황·사향에 대한 보다 객관적이고 과학적인 품질 관리 방법을 확보하기 위하여 본 연구를 기획하였다. 방법 : 수종의 웅담·우황·사향 시료를 확보한 후 HPLC와 GC/MS 분석 방법을 이용하여 시료의 표준물질의 함량 및 패턴을 분석하였다. 분석방법은 식품의약품 안전청에서 권장하고 있는 방법 즉, 웅담과 우황은 HPLC (high performance liquid chromatography)를, 사향은 GC/MS (gas chromatography/mass spectrometer)를 사용하여 분석하였다. UDCA및 TUDCA, 결합형 빌리루빈, 그리고 muscone을 웅담·우황·사향의 표준물질로 각각 사용하였다. 결과: 1. 웅담의 진위 감별을 위한 HPLC 분석 방법에서 표준물질은 UDCA보다 TUDCA가 더 적절하였다. 2. 웅담은 10.0 min와 14.0 min 전후에서 두개의 큰 peak를 형성하였는데 이것을 바탕으로 전체 패턴을 종합하여 웅담의 진위 여부를 판단하는 것이 바람직하다고 추정되었다. 3. 수종의 우황 시료에 대한 HPLC 분석을 시행한 결과 모든 시료에서 식약청에서 제시하고 있는 결합형 빌리루빈 함량 20%의 기준에 미달함을 알 수 있었다. 4. Muscone을 표준품으로 하여 수종의 사향 시료에 대한 GC/MS 분석을 시행한 결과 수출입 조합의 사향에는 muscone이 함유되어 있었고 중국산과 몽골산 사향에는 함유되어 있지 않았다. 이상의 내용을 종합해보면 웅담·우황·사향 중 적정 품질 기준에 미치지 못하는 유사제품들이 상당수 유통되고 있음을 추정할 수 있었고, 이에 대한 적극적 대응방안이 조속한 시일 Objectives: Regulations to protect wild lifes are wide-spread throughout the world, and obtaining Fel ursi and musk from the wild is nearly impossible. These circumstances lead to circulation of imitations as genuine products and this study was conducted to ensure more objective and scientific methods for the quality management of Fel ursi, Bezoar bovis, and musk. Methods: Various samples of Fel ursi, Bezoar bovis, and musk were analyzed for the content and pattern of reference materials using HPLC and GC/MS methods. Analysis methods employed in the study were HPLC (high performance liquid chromatography) for Fel ursi and Bezoar bovis, and GC/MS (gas chromatography/mass spectrometer) for musk which are the methods recommended by KFDA. UDCA (ursodeoxycholic acid) and TUDCA (tauroursodeoxycholic acid), conjugated bilirubin, and muscone were selected as reference materials for Fel ursi, Bezoar bovis, and musk, respectively. Results: 1. For verification of authenticity of Fel ursi using HPLC analysis method, TUDCA was more appropriate than UDCA. 2. Fel ursi formed two significant peaks around 10.0 min and 14.0 min, and these peaks should be considered for patterns comparison for authentication of Fel ursi. 3. From the results of HPLC analysis on various Bezoar bovis samples, they all failed to contain 20% of conjugated bilirubin suggested by KFDA. 4. Using muscone as the reference component, GC/MS analysis of various musk samples revealed that only the sample purchased from the Korean Trade Association contained muscone and Chinese and Mongolian musk failed to contain muscone. Based on above findings, it seems many imitation products of Fel ursi, Bezoar bovis, and musk are in circulation and countermeasures to remove these imitations from circulation must be provided in near future.

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