血管系細胞における基底膜成分の産生機構

전훈 名古屋大學 국내박사

幾何學的非線形ばね特性をもつ連續回轉軸の强制振動

이성우 名古屋大學 1997 해외박사

실제의 회전기계에 사용되는 로타는 그 직경이 장소에 따라 변화하는 축에 프로펠라등의 회전체가 달린 복잡한 형상을 하고 있다. 이런 계의 특성을 이론적으로 해석하기 위해서는 이것들을 적당히 모델화할 필요가 있다. 대표적인 이론 모델로는 전질량을 회전체에 집중시키고 탄성축의 질량을 무시한 집중질량모델과, 전질량을 축을 따라 균일하게 분포시킨 분포질량모델을 들 수 있다. 지금까지의 비선형진동의 연구에 있어서는 해석의 어려움 때문에 그 대부분이 전자의 모델을 이용하고 있다. 그러나, 회전체가 없고 축이 거의 일정한 단면을 갖는 2 극발전기의 축, 쌍발 헬리콥터의 구동축, 또는 축을 따라 여러 개의 원판이 등간격으로 배치된 회전축을 다루는 경우, 분포질량모델이 훨씬 적절하다. 이와 같은 모델을 연속회전축이라고 한다. Bolotin 는 기하학적 비선형성을 갖는 이방성의 연속회전축의 진동을 해석했으며, Show 는 연속회전축이 기하학적 비선형성과 내부감쇄를 가질 때, 계의 안정성과 가오스진동을 조사했다. 그들의 연구에서는 점경형의 주위험속도 부근의 공진곡선 만을 이론적으로 얻었다. 분수조화진동과 결합조화진동 같은 비선형 강제진동은 회전속도와 고유진동수가 어떤 특별한 관계를 가질 때 발생한다. 연속회전축은 무한개의 고유진동수를 갖고 있기 때문에 주위험속도 부근의 조화진동 이외에 이와같은 비선형 부공진이 발생할 수 있다. 또, 기하학적 비선형성은 많은 연구자들에 의해 논의 되어 온 베어링 공차에 의한 비선형성과는 다른 그 자체의 독특한 특성이 있다. 본 연구에서는, 회전관성 및 자이로스코프 모우멘트를 고려한 연속회전체의 모델에서 발생할 수 있는 비선형 진동에 대해 해석했다. 또한, 축길이에 비해 축경이 작은 탄성축을 대상으로 하기 때문에 그 효과가 작다고 생각되는 전단변형은 무시하다. 집중질량계의 모델에서 좌표의 2 승으로 나타나는 비대칭 비선형성과 3 승으로 나타나는 대칭 비선형성을 갖는 경우에 발생하는 종류의 비선형진동에 대한 이론해석을 하고, 각각의 진동에 관해 연속회전축에서의 발생 유무를 조사했다. 또, 진동이 발생하는 경우는 그 진동 특성 (공진곡선의 형상, 안전성 등)을 조사하고, 수치 시뮤레이션에 의해 그 타당성을 검토했다. 더욱이 실험장치를 이용해, 주위험속도 부근의 조화진동에 대한 비선형성의 영향과 그 이외의 위험속도 부근에서 각종 비선형진동의 발생과 그 특성에 대해 조사했다. 또 이론 해석에서 진동이 발생하지 않는다는 결과를 얻은 위험속도 부근에 대해서도 실험을 하고 이론의 타당성을 확인했다.

內部勞動市場(ILM)と人的資源管理(HRM) : 日·韓·米の比較を中心に

임상혁 名古屋大學 大學院 2001 해외박사

セラミックスの轉がり疲勞と疲勞き裂進展特性に關する硏究

유성근 名古屋大學 1994 해외박사

세라믹스에 있어서 피로는 세라믹스의 강도를 지배하는 중요한 인자이며,그 특성의 파악과 기구의 해명은 세라믹스의 신뢰성을 개선하는데 있어 중요하다 고 생각된다. 본 연구는 크게 두 가지로 나누어 실시하였다. 우선 세라믹스의 용도가 더욱 증대되고 있는 구동부에 있어서의 피로,Rolling Contact Fatigue에 대한 그 파괴기구와 평가방법을 검토하였다. 이어 세라믹스의 피로에 관한 기초적연구 로서 새롭게 개발한 세라믹스용 피로균열진전시험장치를 이용하여 세라믹스에 있어서 피로균열진전 특성을 평가하고,그 기구와 영향인자를 검토하였다. 첫째,Rolling Contact Fatigue의 기구는 종래 이용되어온 경강의 경우 조차 파괴기구에 불명한 부분도 많고,역학적인 해석이 시작된 것은 극히 최근이다. 본 연구에서는 우선 bearing steel에 대하여 Rolling Contact Fatigue시험을 실시하고,그 파괴과정을 상세히 관찰하였다. 그 결과,표면이 평활하고 청정한 경우,Rolling Contact Fatigue는 전단응력에 의한 Mode Ⅱ형의 전단피로균열 의 발생,진전에 지배되는 것을 검정하고,파괴 역학적 시험에 의한 재현을 시 도하였다. 또,질화규소 및 Sialon 세라믹스에 대하여 Rolling Contact Fatigu e 시험을 하고,그 파괴기구를 조사하여 steel의 경우와 같은,내부에 생긴 Mod e Ⅱ형 균열의 발생,진전이라고하는 파괴과정을 밝혔다. 둘째,피로균열진전특성평가에 관한 연구는 최근 여러가지 연구가 행해져 피 로의 거동은 금속과 달리 반복수뿐만 아니라,시간의존형의 피로현상을 일으키 는 것이 알려져 있다. 오히려 세라믹스피로의 본질은 금속의 응력부식 균열에 상당하는 정적피로이며,금속과 같은 소성변형에 기인하는 반복수 의존의 피로 는 일어나기 어렵다는 것이 최근에는 일반적이다. 그러나,세라믹스의 피로균 열진전거동에 관한 연구는 비교적 적고,일정응력하의 정적피로와 반복피로의 비교,균열진전시의 균열진전 저항,이를테면 가교효과등 아직 통일된 견해가 얻어지고 있지 않다. 따라서,본 연구에서는 비교적 오차가 적고,또 강도특성 이 중요한 질화규소 및 알루미나 세라믹스의 피로균열 진전시험을 행하여 정 적피로와 반복피로에 있어서 균열진전 특성의 차이,부하이력의 영향,균열진전 시의 입자가교의 양상등을 조사하고,세라믹스에 있어서 피로 This thesis is divided into two parts because it represents efforts on two fronts. The first part describes work on catalytic dioxygen reduction and the second reports my work on a project aimed at nitrogen fixation. Chapter 1 is a brief summary of the recent developments in dioxygen reduction catalyzed by cofacial porphyrins. Chapter 2 is a manuscript submitted to the Journal of Electroanalytical Chemistry, describing the catalytic activities toward 02 reduction of cofacial porphyrins possessing a Single electroactive metal center. I prepared most of the compounds, consequently synthetic details are given in an appendix to this chapter. Neil Hendricks carried out the electrochemistry, wrote the first draft, and Professor Collman and I revised the Introduction and Discussion. Susana Bencosme prepared some of the mixed-metal dimers during a three month stay in our lab in 1985. Chapter 3 reports four-electron catalytic activities of iridium porphyrins toward 02 reduction. I conceived of the idea and am responsible for all the work. A preliminary report has been accepted for publication by the Journal of the American Chemical Society. Chapter 4 introduces our approach to a long-term goal, the catalytic dinitrogen reduction using cofacial porphyrins. Chapter 5 describes preparation of cofacial porphyrins held by a rigid spacer. These porphyrins were first, synthesized by Chang and coworkers. The details of modified Synthesis of a dimer of non-cofacial structure is also presented. synthetic procedures are given. Chapter 6 is a manuscript submitted to Inorganic Chemistry, which describes the synthesis, characterization and electrochemistry of diruthenium cofacial porphyrins. All the work including the writing of the manuscript is mine except for some of the electrochemical results which Dr. C.R. Leidner and I obtained together. The appendix to Chapter 6 provides NMR spectra of several compounds which were omitted from the paper to save space. Chapter 7. is a manuscript submitted to the Journal of the Chemical Society, Chemical Communications, which describes novel cofacial porphyrin dimers containing an intramolecular metal bond. Again, all the work including the writing of the paper iS mine. J.M. Garner provided me with a precursor of the free-base cofacial porphyrin. An appendix to this chapter includes tie W-visible spectra of the cofacialdimers. It should be noted that all my writing has been proofread by G.T. Yee and Dr. M.G. Finn, and without their help its final form would have been quite different. I gratefully acknowledge their contributions.

價値意識法を應用した都市交通網の實用的評價方法に關する硏究

서광석 [名古屋大學] 1990 해외박사

The daily life of the people is a set of movements from one place to another. This movement, that is a spatial movement, is called transport. Physical barriers are overcome in the exchange of information which is carried by this spatial movement, and societies and countries are formed through these movements. Moreover, transport has social functions which can promote the progress of culture and civilization. On the other hand the opposite can be true, social disutilities can be caused at the same time through deficiencies in transport, the characteristics of the region disappear and the life of the people becomes monotonous, excessive concentration of the population, environmental deterioration, traffic accidents and so on can occur. Besides this, transport has other economic functions such as the formation and expansion of markets, stabilization of economic activities, reduction of production costs due to the scale economy and improvement of living conditions. From the viewpoint of social and economic functions, it is evident that transport facilities are fundamental for the society and economy of a region. Therefore, it is necessary to construct and improve the transport facilities in order to support these social and economic activities. The improvement of the transport facilities is an important part of in regional planning, so the effects caused by the improvement have to be taken into account. Urban transportation systems not only benefit the users but also give impacts on the non-users who live near the transport facilities and the community as a whole. Therefore, in evaluating a transportation system, all of the external effects to the region such as environmental pollution, energy consumption, safety, comfortableness of lives and change of land use also have to be considered. From this point of view, this paper attempts to estimate the environmental cost, the value of travel time savings and to construct a practical evaluation method for transportation network plans in urban areas. This paper consists of 7 chapters. The contents of the paper are summarized as follows: Chapter 1 describes the purpose of this study. Chapter 2 summarizes the previous studies which are related to the evaluation of transport network plans and points out some problems in them. First of all, the purpose and content are described and significances and problems in the process of the transport network planning are explained. The evaluation methods are also summarized and the position of this study in respect to them is described. Secondly, among the most vital problems at the stage of transport network planning, when the standard of evaluation for economy of the transport network plans has to be selected, is the problem of the evaluation of the indices which can only be expressed in physical terms such as the various environmental factors. Two methods are involved. One is that the environmental impact caused by executing the transport network plans be evaluated in monetary, terms. Another is the evaluation of the effects of the shortening of time needed which forms a large portion of the direct benefit of transport. The existing methods are reviewed from the viewpoint of transport network planning evaluation according to be categories described above. The problems involved in these methods are then discussed. Chapter 3 describes a method for estimating the environmental impact cost of transport facilities. The improvement of the transport facilities affects the people living nearby and this environmental impact can be evaluated in monetary terms. In this study, the aggregate and disaggregate models are applied and the data obtained from a questionnaire survey of the stated preference is used as input data and the reliability of the evaluation method is discussed. Chapter 4 concerns on the evaluation of the value of travel time savings which forms the main part of the direct benefit of transport. The evaluation method of the value of travel time savings uses the data obtained from the questionnaire survey of the stated preference. In chapter 5, a practical evaluation method which synthesizes the various viewpoints of various groups is proposed for the transport network plans. When a large scale transport network is planed, all the effects related to the transport facilities have to be considered, However, it is not easy to evaluate the transport network planning comprehensively. This chapter starts from the definitions of the social cost and the social benefit related to the transport facilities. Then a method of measuring the cost related to the transport is described. Finally, an evaluating system of the transport network plans is constructed by combining the cost calculation model with a transport demand forecasting model. Chapter 6 describes the results of the application of the evaluation system developed in chapter 5 to Nagoya metropolitan area. The measured social cost and social benefit are compared between all the cases on the basis of which an evaluation of the various transport network plans is carried out. Chapter 7 summarizes the conclusions reached in this study.

血官系細胞における基底膜成分の生産機構

전훈 名古屋大學 1996 해외박사

동물세포를 형성하는 세포는 긴밀히 접촉하여 선택적인 상호작용을 하고 있 다. 동시에, 자기들이 분비한 거대 단백질과 고분자당으로 형성된 세포 matr ix 와도 접촉하고 있다. 기관형성, 창상치유, 신경망 재생과 혈관신생등의 과정에서 세포가 이동하기 위한 디딤대로서의 역할 등 다양한 기능을 담당하 고 있는 것으로 알려져 있다. 기저막은 이와같은 세포외 matrix 의 일종으로 상피나 내피층의 아래에 막상구조체를 형성, 체내 여러곳에서 조직형성에 기 여하고 있으며, 기저막의 주요성분으로는 IV형 collagen, Laminin, entactin/ midogen, osteonectin 등이 알려져 있다. 소대동맥 내피세포는 AB₁B₂와 A'B₁B₂의 구성사조성을 갖는 2종류의 Laminin 변이체를 생산한다. 이와같 은 구성사의 세포내의 회합과정은, 먼저 B₁B₂의 이량체가 형성되고, 여기에 A 또는 A'사가 회합하여 AB₁B₂ 또는 A'B₁B₂의 삼량체가 형성된다. 혈관 신생억제 steroid는 A사와 A'사의 합성에 작용하여 B₁B₂ 이량체에 결합하는 A사와 A'사의 경합비를 바꿔 AB₁B₂와 A'B₁B₂의 삼량체의 분비량을 변동시 킨다. Laminin 합성에 있어서 구성사의 치환기구는 조직형성에 기여하고 있 는 다양한 세포가 다른 Laminin이형체를 생산하는 기구에도 적용할 수 있다고 생각된다. Laminin사를 단백질 가교제로 처리, 면역침강후 환원 · 비환원의 전기영동을 한 결과, Laminin 구성사의 회합과 치환기구에 분자 Chaperone 이 관여하고 있다는 것을 알았다. 또한 Rat의 지방조직의 모세혈관으로 부터 단 리한 pericyte이 IV형 collagen, Laminin등의 기저막 성분을 활발히 합성 · 분비하는 것을 판명했다. 또, 아스코르빈산 유도체에 의해서도 기저막 성 분이 현저히 촉진되었다. 더우기 pericyte가 6종류의 Laminin사를 합성하여, 4종류의 삼량체로 회합시켜 분비하는 것도 밝혀졌다. This study investigated the role of pragmatic transfer in interlanguage. It focused on non-native speakers' use of pragmatic knowledge in comprehension and production of the speech act of complimenting as a significant element of overall communicative competence. Based on a cross-cultural comparison of complimenting behavior between Koreans and Americans, the study tried to determine the extent of pragmatic transfer and the metapragmatic awareness demonstrated by Korean leamers of English in complimenting. Four different groups of subjects participated in this study: 19 Korean college students in Korea, 19 Korean English as a Foreign Language (EFL) learners in Korea, 18 Korean English as a Second Language (ESL) learners in a U.S. university, and 21 American college students. Only female subjects were included in this study. Data were collected by using a questionnaire with a Discourse Completion Test. Informal interviews were also administered to Korean ESL learners. Findings showed that great differences existed between American English and Korean speakers in the speech act of complimenting in terms of syntactic pattems, topics, and compliment responses. The study also revealed that Korean learners of English (ESL and EFL) were utilizing their native pragmatic knowledge in their realization of compliments in English. Transfer of sociolinguistic rules was especially evident in their response strategies, such as negative elaboration and denial, to compliments. The second language learning environment (whether ESL or EFL) does not seem to have influenced the amount of transfer demonstrated by Korean English learners. However, Korean ESL learners seemed to adopt similar sociolinguistic rules of the host culture, thus making more progress in approximating native-like competence. The interviews with ESL learners revealed that they were very conscious or differing rules for conplimenting and try to adapt their speech behaviors according to target language norms. From a pedagogical perspective, the findings of this study point to the need for overt instruction of pragmatic practices in order to overcome pragmatic transfer in such areas of speech act as complimenting. The theoretical significance of this study is its further highlighting of the role that transfer plays in shaping interlanguage of second language learners at a pragmatic level.

大腸菌外膜タンパク質遺傳子 ompF, ompC の正の調節因子 OmpR タンパク質に關する硏究

조윤래 名古屋大學 1988 해외박사

대장균의 ompR유전자의 산물인 ompR단백질은 외막단백질 OmpF, OmpC를 각각 code하 고 있는 유전자 ompF, ompC의 발현에 있어서 positive regulator로서 알려져 있다. 이 러한 OmpR단백질은 유전학적인 면에서는 광범위하게 그 기능이 해석되어 있으나 생화 학적 성질은 전혀 알려진 바가 없다. 그래서 OmpR단백질 정제 및 그 생화학적 성질과 기능을 해석하는 것으로부터 ompF, ompC유전자의 발현조절에 대한 분자기구를 해석 하였다. 1. OmpR단백질의 정제와 성질 ompR유전자를 run-away plasmid에 cloning하여 OmpR단백질의 대량생산계를 확립하였다. 이 대량생산계를 이용하여 OmpR단백질을 전 기영동적으로 균일하게 정제하였다. 이 정제된 OmpR단백질은 그 생화학적 성질의 해 석으로부터 단량체로 존재함이 밝혀졌으며, 유전학적 해석으로부터 ompF, ompC유전자 의 promoter의 upstream에 결합하는 것이 예상되고 있었으나, 정제 OmpR 단백질을 이 용하여 DNA와 결합능을 해석하는 것으로부터 ompF, ompC유전자의 upstream영역의 DNA 와 특이적으로 결합하는 것을, 직접적으로 해석할 수 있었다. 2. OmpR단백질에 의존한 ompF, ompC유전자의 in vitro transcription 정제한 야생형 및 변이 OmpR단백질을 이 용하여, OmpR단백질에 의존한 in vitro transcription계의 확립과, 이 확립된 계를 이 용하여 ompF, ompC유전자의 발현조절기구를 해석하였다. 그 결과 OmpR단백질에 의존 한ompF, ompC유전자 promoter의 in vitro transcription계를 확립할 수 있었다. 확립 된, in vitro transcription계에서는 정제한 야생형 OmpR단백질은 ompF, ompC promo ter를 동시에 활성화하였다. 그러나 ompC의 promoter가 충분히 활성화하기 위해서는 ompF promoter의 활성에 필요한 양보다 다량의 OmpR단백질을 필요로 하였다. 또 변 이 단백질인 ompR�4炳溶珦�ompF promoter를 활성화하여, promoter의 특이성을 나타 내었다. 이 결과는 ompR�:�訣聆�표현형 (ompF�� ompC��와 잘 일치하고 있다.

せん斷ひずみ依存性を考慮したフレッシュコンクリ ―トのレオロジ―性質に關する硏究 : Study on Rheological Properties of Fresh Concrete Considering Shear Strain Dependent Properties

이건철 名古屋大學 大學院 2005 해외박사

최근, RC구조물의 다양화와 고층화에 따라 각종 신재료․신공법이 개발, 실용화 되고 있다. 이와같은 새로운 기술을 시공현장에서 적절히 이용하기 위해서는 굳지않은 콘크리트의 물성에 관한 정확한 정보가 필요 불가결 한데, 종래의 콘시스턴시 시험만으로는 그 유동거동을 충분히 파악하기에는 상당한 어려움이 있다. 따라서, 굳지않은 콘크리트의 시공성에 관한 전단 저항성, 재료분리 저항성 등의 평가 및 예측을 위해서는 어는 정도의 물리량에 근거한 해석적인 대응이 불가결하고, 이로는 레오로지의 입장에서의 어프로치가 가장 유력하다고 할 수 있다. 이에 관련하여, 지금까지 레오로지 이론을 도입한 굳지않은 콘크리트의 유동성상의 정량화에 관한 연구는 콘크리트를 균질한 점소성체로 가정한 빙엄모델(Bingham model)이 일반적으로 이용되어져 왔다. 그러나, 굳지않은 콘크리트는 고체와 액체의 혼합물인 서스팬션의 성질을 가지고 있기 때문에 그 유동거동이 예상외로 복잡하고 굳지않은 콘크리트 또는 모르터의 레오로지 정수도 측정자에 따라 서로 다른 경향을 나타내는 등 아직까지도 정확한 파악에는 달하지 못한 상태로서 이 분야의 연구자에게 있어서 해결해야 할 과제로 남아 있다. 이것은 가정하는 빙엄모델의 레오로지 정수를 유동시, 철근간동과성, 다짐성, 경시변화 등의 여러조건하에서 불변하다는 모델을 가정하고 있는것 자체가 문제가 있을 가능성이 크다. 즉, 굳지않은 콘크리트의 유동거동을 정량적으로 파악하기 위해서는 빙엄모델 보다 더욱 정밀한 역학모델을 이용할 필요가 있으며, 이방면을 백업해줄 연구성과를 조금이라도 축적해둘 필요가 있다. 따라서 본연구에서는 굳지않은 콘크리트의 변형저항성을 지배하는 각종요인의 메카니즘을 보다 마이크로한 입자에서 정량적으로 파악하고, 정도가 높은 굳지않은 콘크리트의 레오로지 모델을 구축하고자 한다.

韓國人日本語學習者の日本語長母音の習得硏究 : 生成と知賞に關する橫斷的および縱斷的考察

이형재 名古屋大學 1998 해외박사

본 논문은 한국인 일본어 학습자가 일본어 장모음을 습득해 가는 과정을 규명하고, 나아가 장모음 습득 상에서 나타나는 문제점을 밝히는데 목적이 있다. 본 논문에서는 한국의 대학에서 일본어를 배우고 있는 초급 학습자 10명과 중급 학습자 10명을 대상으로 9개월간에 걸친 발음 추적 조사(음향 분석 실험)를 실시하여, 일본어 장모음의 습득 과정을 생성과 지각의 양면에서 횡단적(Cross-sectional analysis) 및 종단적(Longitudinal analysis)으로 분석하였다. 또한 분석 결과를 일본어 화자 10명의 생성과 지각 결과와 비교하였다. 본 논문의 주된 연구 과제는 다음과 같다. 연구과제I: 장모음 생성에 관한 횡단적 연구 1) 초급 학습자와 중급 학습자의 일본어 장모음 발음에는 차이가 있는지, 만일 차이가 있다면 그 차이는 어떠한 것인지 2) 한국인 초·중급 학습자와 일본어 화자의 일본어 장모음 발음에는 차이가 있는지, 만일 차이가 있다면 그 차이는 어떠한 것인지 연구과제II: 장모음 생성에 관한 종단적 연구 1) 초·중급 학습자의 일본어 장모음 발음은 9개월간의 조사 기간동안에 변화하는지, 만일 변화한다면 어떻게 변화하는지 2) 일본어 장모음의 발음 습득은 음성 환경의 영향을 받는지, 만일 영향을 받는다면 발음 습득이 어려운 음성 환경은 어떤 것인지 3) 일본어 장모음의 발음 습득은 발화 환경(단독 발화, 단문에서의 발화)의 영향을 받는지, 만일 영향을 받는다면 발음 습득이 어려운 발화환경은 어떤 것인지 연구과제III: 장모음 습득 과정에서 나타난 개인차의 분석 1) 발음 습득 과정에서 학습자간의 개인차는 존재하는지 2) 발음 습득 정도에 따라 일본어 학습자를 「good learner」와 「poor learner」로 분류했을 때, 어떠한 분포를 이루고 있는지 연구과제IV: 장모음 지각에 관한 횡단적 연구 1) 초급 학습자와 중급 학습자의 일본어 장모음 지각에 대하여, 식별의 정도(精度)와 식별의 경계(역値)에 어떠한 차이가 있는지 2) 한국인 초·중급 학습자와 일본어 화자의 일본어 장모음 지각에 대하여, 식별의 정도(精度)와 식별의 경계(역値)에 어떠한 차이가 있는지 3) 일본어 장모음 지각에 대하여, 학습자간의 개인차는 존재하는지 연구과제V: 장모음 지각에 관한 종단적 연구 한국인 초·중급 학습자의 일본어 장모음에 대한 지각 양식은 9개월간의 조사 기간 동안에 변화하는지, 만일 변화한다면 어떻게 변화하는지 이상과 같은 연구 과제에 입각하여 본 논문은 제1장 서론과 제8장 결론을 포함하여, 총 8장으로 구성되어져 있다. The bacteriophage λO protein localizes the initiation of replication to a unique sequence, ori λ through specific protein-DNA and protein-protein interactions. Conformational changes at ori λ introduced by O protein binding have been reported and their roles have been implicated in the initiation of λ DNA replication. In our studies, we focused on detailed structural basis of the formation of the O protein-ori λ complex(O-some). This work was divided into five Chapters including a general introduction given in Chapter 1, a brief review of genetic, biochemical, and structural data for understanding the mechanism of the initiation of λ DNA replication. As shown in Chapter 2, we found that the O protein exists as a dimer and demonstrated that the active DNA binding species is also a dimer. Dimerization and sequence-specific DNA recognition are specifically mediated through the amino-terminal half of O(O1-162(아래첨자 1-162입력불가)). The binding affinity of O for a single copy of its 19 bp recognition sequence was 2-3 nM. We also found that the O-some is composed of 4 dimers of O and ori λ DNA, which contains four 19 bp direct repeat recognition sites, i, e., a dimer of O is bound to each repeat(iteron). Moreover, we found that only the amino-terminal DNA binding domain is required for formation of the O-some. To investigate the structural basis for the unique properties of O protein, we generated a number of carboxy-terminal and internal and internal deletion mutants of O. Experiments with purified mutant proteins, as shown in Chapter 3, indicated that (ⅰ) the deletion mutant retaining amino acid residues 19-110 is the smallest O protein species that can both bind to DNA and form a dimer, (ⅱ) the affinities of all mutant proteins for a single iteron are almost the same, ranging from 2 to 4 nM; (ⅲ) the portion of O that is responsible for dimerization is located between amino acid residues 19 and 85; (ⅳ) the carboxy-terminal domain (O 156-299(아래첨자 156-299입력불가)) is a monomeric species that does not recognize specific DNA sequences but instead, bind non-specifically to duplex DNA; (ⅴ) the linker joining the two structural domains is not required for O function, but its coding sequence of DNA contains several recognition sites for O protein (ori λ); and (ⅵ) a deletion! m! utant missing the amino-terminal portion of the carboxyl-terminal domain is still comparably active in the in vitro λdv replication assay. In Chapter 4, the structural basis of the O protein-DNA complex was studied in detail. Hydroxy radical footprinting was employed to obtain the high resolution structural information about the contacts between the protein and the sugar-phosphate backbone of DNA. The missing nucleoside experiment allowed us to identify energetically important base moieties that may be in contact with bound O protein. Quantitation of the extent of O-mediated DNA bending indicated that O induces a relatively sharp bend in an individual recognition sequence of 85。 ±5。 . Measurement of the O-induced topological change indicated that a region of DNA or specifically ori λis wrapped around the O protein core in a left-handed fashion with a linking number change of 0.7±0.1 turn. In Chapter 5, we present direct evidence that the O protein also has the capacity to interact with single-stranded DNA, the first such interaction discovered among prokaryotic origin-binding proteins. The implication of this dual DNA binding specificity of O for the formation of the unwound structure at the A/T-rich region of ori λ is dis cussed. The addition of the λP-DnaB comple x to the O-some produces a new nucleoprotein species with a super-shift in migration. The presence of P and DnaB reduces significantly the amount of O required for binding to single-stranded DNA. Based on these results, we propose a detailed model for sequential structural changes in ori λ as a consequence of O binding to the origin of λreplication.

土壤中における除草劑ベンチオカ-ブの脫鹽素に關する 硏究 : 문영희

문영희 名古屋大學 1985 해외박사

토양중 제초제 benthiocarb의 탈염소 반응 및 기구를 해명하기 위하여 탈염소 반 응과 토양의 조건 및 성질과의 관계, 탈염소균의 특성 및 소장에 대하여 연구한 결과 는 다음과같다. benthiocarb 탈염소 반응은 극히 한정된 토양중에서만 일정 lag time 후 진행되며 반응을 위하여는 일정량의 유기물을 필요로 하였으며, 반응은 미생물의 활성에 의하여 일어났다. 반응의 최적 온도는 25-30℃, pH6. 5-7. 5의 환원조건(Eh-200 mV정도)의 특정 토양에서만 반응이 일어났다. 탈염소 활성을 갖는 토양에서도 반응이 진행하기 위하여는 유기물을 필요로 하는데 이 유기물은 토양의 낮은 산화환원 전위 의유지 및 미생물의 영양원으로 이용되어 졌으며 lag time은 토양의 환원화, pH의 중성 화 및 탈염소균의 증식을 위한 기간임이 밝혀졌다. 토양중 반응의 활성은 benthiocarb 의 반복 첨가에 의하여 미생물의 증식과 더부러 현저히 촉진 되었으나 토양중 benthio carb가 소실되면 균의 감소와 더부러 그 활성이 급격히 감소되었다. 토양중 탈염소 반응과 탈염소균의 증식상태는 잘 일치 되었다. 탈염소균은 그람 양성의 통성 혐기성균 세균으로 극히 한정된 영양조건의 배지에서만 증식이 가능하였다. 또 이 균은 한정 된 benthiocarb유도체만을 탈염소 시켰으며 기타 유기염소 화합물은 탈염소시키지 못 하여 종래 알려지지 않은 momochlorophenyl 화합물을 탈염소시키는 특이한 세균이었다 . 메톡시폐논과 BNA-80 특히 BNA-80은 저농도에서 이 반응을 장기간 억제시켰는데 이 는이들 화합물의 탈염소균의 증식을 저해시켰기 때문이었다. 탈염소균의 생육 혹은 활성 의 발연을 위한 조건이 극히 한정되어 일정 유기물과 염류 농도의 영양조건 및 한정된 pH, Eh, 온도의 환경조건에서만 증식이 가능한 균이었던바, benthiocarb은 오랫동안 넓은 지역에서 사용되었지만 탈염소 benthiocarb에 의한 수도의 왜화증은 극히 한정된 토양에서 발생되었던 것으로 판단되어졌다.