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Measurement of Viable Cell Number in Mixed Culture Based on Microbial Respiration Rate
Veljkoic, V.B.,Kwon, Yun Joong,Engler, C.R. 한국산업미생물학회 1992 한국미생물·생명공학회지 Vol.20 No.6
혼합배양중의 각 미생물의 생균수 측정은 순수배양보다 훨씬 복잡하다. 특히 두 균주의 크기가 비슷한 경우에는 사용할 수 있는 방법이 더 제한된다. 본 연구에서는 두 균의 크기가 비슷한 경우에도 적용될 수 있는 간단한 생균수 측정방법을 개발하였다. 미생물 배양액의 산소흡수속도(OUR)는 세포수에 비례하며 이때의 비례상수인 최대 비산소흡수속도(maximum specific OUR)를 알고 있으면 배양액의 OUR을 측정함으로써 간접적으로 생균수를 구할 수 있게 된다. 혼합배양의 경우 산소흡수속도는 각 미생물의 호흡속도의 합이 되며, 각 미생물의 호흡속도가 서로 다르고 또한 온도의존성이 다르다면 호흡 속도의 측정을 이용하여 각 생균수를 간접적으로 측정할 수 있다. 산소흡수속도는 시가에 따른 용존산소 농도의 변화를 DO probe를 이용하여 측정하여 구했으며, 최대 비산소흡수속도는 plate count에 의한 생균수와 OUR의 직선관계의 기울기에서 구했다. C. lusitaniae의 최대 비산소흡수속도는 20과 30℃에서 각각 1.36×exp(-19)과 3.90×exp(-9), P. tannophilus는 20과 30 ℃에서 각각 0.59×exp(-9)와 1.86×exp(-9)[(%/s)/(cells)/㎖]]이었다. 이들 값을 이용하여 계산한 혼하배양액 중의 두 효모의 생균수와 서로 다른 배지를 이용하여 plate count로 측정한 생균수와의 관계는 상관계수 0.98로서 비교적 잘 일치되었다. A simple method to determine viable cell numbers of each species in mixed culture was developed. The oxygen uptake rate (OUR) equals to the product of the specific OUR and the size of the microbial population. In a mixed culture, the OUR is a result of the respiration activities of each sub-population. The OUR was determined from the slope of the linear relationship between time and the decrease of dissolved oxygen concentration when aeration was stopped. The specific OUR was calculated from the slope of the viable cell number versus OUR curve. These values for C. lusitaniae at 20 and 30℃ were 1.36×exp(-19) and 3.90×exp(-9) and those for P. tannophilus at 20 and 30℃ were 0.59×exp(-19) and 1.86×exp(-9) [(%/s)/(cells/㎖)], respectively. Using these values, viable cell numbers were calculated after the OURs of mixed culture at two temperatures were measured. A good agreement between the viable cell numbers determined by this method and by plate count was obtained.
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