4-Hydroxynonenal Induces Endothelial Apoptosis through Mitochondrial Depolarization

Dae Yeon Kang(강대연),Ji Young Lee(이지영),Min-Sun Kim(김민선),Chul Hong Kim(김철홍),Hyung Keun Kim(김형근),Sun Mi Lee(이선미),Young Mi Kwon(권영미),Jaewon Lee(이재원),Hyung Suk Baik(백형석),Byung Pal Yu(유병팔),Hae Young Chung(정해 한국생명과학회 2008 생명과학회지 Vol.18 No.11

4-Hydroxynonenal (4-HNE)는 세포내 레독스의 균형을 깨뜨려 혈관 기능 손상을 일으킨다. 본 연구자들은 HNE의 축적이 야기하는 혈관 기능 손상기전을 더 잘 이해하기 위하여 혈관 내피 세포의 미토콘드리아 세포사 메커니즘을 규명하였다. HNE를 처리한 세포에서는 미토콘드리아 막전위 소실과 그에 따른 cytochrome C의 방출이 유도되었으며, Bax의 증가 및 Bcl-2의 감소가 관찰되었다. ROS 제거제인 NAC와 peroxynitrite 제거제인 페니실라민은 HNE가 유도하는 ROS 생성을 차단하여 cytochrome C 방출과 세포사를 억제하였다. 세포에 HNE와 zVAD-fmk(caspase 저해제)를 같이 처리하면 HNE가 유도하는 세포사를 억제하지 못하는데 이는 HNE에 의한 세포사가 caspase에 비의존적 단계일 가능성을 시사하였다. 위의 결과들은 HNE가 유도하는 혈관 내피 세포의 세포사 매커니즘은 미토콘드리아 막전위의 탈분극에 의해 촉발되며 이는 혈관계 항상성의 악화와 노화에 의해 수반되는 혈관 기능 손상을 유도할 것으로 사료된다. The 4-Hydroxynonenal (HNE) affects vascular dysfunctions probably through the interruption of the cellular redox balance. To better understand vascular abnormalities resulting from the accumulation of HNE, we delineated mechanism by which mitochondrial apoptosis occurs in the YPEN-1 endothelial cells. HNE treatment led to the loss of mitochondrial membrane potential (δΨm), resulting in the release of cytochrome c. Data showed decreased Bcl-2 and increased Bax protein levels in HNE-treated cells. NAC, a reactive oxygen species (ROS) scavenger, and penicillamine, the peroxynitrite scavenger, blocked HNE-mediated ROS generation, thereby thwarting the cytochrome c release and apoptosis. The treatment of the cells with zVAD-fmk, a broad range caspase inhibitor did not suppress HNE-induced apoptosis, suggesting that the apoptosis might be the possibility of caspase-independent process. Our findings delineate the underlying mechanism of the HNE induced endothelial apoptosis by triggering depolarization of mitochondria membrane potential that can lead to the deterioration of vasculature homeostasis and subsequent vascular dysfunction with aging.

Lactobacillus acidophilus 88과 Lactobacillus bulgaricus IFO 13953간의 Electrofusion에 관한 연구

조영배(Young-Bae Jo),김혜정(Hye-Jeong Kim),김성구(Sung-Koo Kim),백형석(Hyung-Suk Baik),전홍기(Hong-Ki Jun) 한국식품영양과학회 1996 한국식품영양과학회지 Vol.25 No.1

균주개량 방법의 일환으로 electrofusion법을 이용하여 protease 활성, lipase 활성, 내열성, 내산성 등이 우수한 L. bulgaricus와 bacteriocin을 생산하는 L. acidophilus간의 융합조건을 검토하였다. Electrofusion에 의해 생성된 융합주를 식별하기 위해 streptomycin (2㎎/ml)과 lincomycin(5㎍/ml)에 내성을 나타내는 L. bulgaricus 변이주와 kanamycin(600㎍/ml)에 내성을 나타내는 L. acidophilus 88 변이주를 분리하였다. Electrofusion을 500V/㎝, 100msec(49ohms, 2300 capacitance)에서 수행했을 때 가장 융합이 잘 일어났으며 전기장의 세기와 시간이 증가할수록 융합 효율이 현저히 감소하였다. 2가 양이온은 대체적으로 융합 효율을 감소시키는 경향을 나타내었으나 1mM MgCl₂에서는 융합 효율이 약간 증가하였다. PEG 4000을 electrofusion buffer에 30% 되도록 첨가했을 때 가장 양호한 융합 효율을 나타내었으며 그 이상에서는 오히려 융합 효율이 감소하였다. Electrofusion법과 PEG 매개에 의한 융합법의 융합 효율을 비교한 결과, 거의 비슷한 융합 효율을 나타내었으나 electrofusion법과 PEG 매개에 의한 융합법을 혼합하였을 때 가장 양호한 융합 효율을 나타내었다. The optimal conditions for eletrofusion between the cells of streptomycin(2㎎/ml) and lincomycin(5㎍/ml) resistant Lactobacillus bulgaricus IFO 13953 and of kanamycin(600㎍/ml) resistant Lactobacillus acidophilus 88 were investigated. The highest numbers of electrofusant were obtained at a capacitance value of 100msec(2,300uF), a field strength of 500V / ㎝ and at a pulse controller setting of 49ohms. When various divalent cations were added to the electroporation buffer, the electrofusion yield was slightly increased by the addition of 1mM Mg^(2+). Electrofusants were very efficiently obtained by addition of 30% polyethylene glycol in electroporation buffer. Fusion yield of electroporation was better than that of polyethylene glycol mediated chemical induction method.

천연물로부터 Quorum Sensing 저해제의 탐색

김태우(Kim Tae Woo),차지영(Ji Young Cha),이준승(Jun Seung Lee),민복기(Bokkee Min),백형석(Hyung Suk Baik) 한국생명과학회 2008 생명과학회지 Vol.18 No.2

인간이 서로 간의 의사소통을 위해 언어를 사용하듯이, 세균의 경우도 외부 환경 변화를 신속히 감지하여 서로 효과적으로 대응하기 위해서 주변 세포들과 소통할 수 있는 세균만의 독특한 화학적 언어를 사용하는 것으로 알려져 있다. 특히, 일정 세포 농도에 도달했을 때 자체적으로 생산된 화학적 신호를 통해 개체 수를 인지하고 그에 따라 특정 유전자의 발현을 동시에 조절하는 quorum sensing (QS) 기작은 다양한 세균 종들에서 광범위하게 존재한다. 본 연구는 다양한 천연물 추출물들을 대상으로 QS 저해 활성을 확인하였는데 QS 지시균주인 Agrobacterium tumefaciens NT1과 화학적으로 합성한 QS autoinducers을 사용한 bioassay를 수행하였다. 그 결과 양배추, 파, 양파의 추출물들에서 QS 저해 활성을 확인하였고, recycling preparative HPLC (prep-HPLC)를 통한 정제 과정을 통해, 83분 지점의 peak에 해당하는 성분들이 공통으로 QS 저해 활성을 가지고 있음을 확인하였다. 따라서 그 QS 저해 성분을 QSI-83으로 지정하고 thin layer chromatography(TLC)를 통해 P. syringae pv. tabaci의 autoinducers 합성을 저해하는 활성을 가지고 있음을 확인하였다. 또한 열에 대한 안정성과 세균 생장에서의 영향을 조사하였는데, 그 결과 QSI-83은 열에 안정하며 세균의 생장에는 영향을 끼치지 않는 물질임을 확인하였다. 따라서 우리는 천연물로부터 분리된 새로운 성분이 QS 저해제로서 이용될 수 있음을 제안한다. The quorum sensing (QS) regulatory network has been the subject of extensive studies during recent years and has also attracted a lot of attention because it both positively and negatively regulates various putative virulence factors, although initially considered to be a specialized system of Vibrio fischeri and related species. In this study, to identify the novel materials which inhibit QS system of microorganisms, extracts of eighteen natural products were tested by bioassay using N-(3-oxohexanoyl)-L-homoserine lactone and N-(3-oxooctanoyl)-L- homoserine lactone synthesized in this experiment and an Agrobacterium tumefaciens NT1 biosensor strain containing a traI::lacZ fusion. The result indicated that the extracts of cabbage, leek, and onion exhibited the QS inhibition activity. Thus, materials contained in the extracts were isolated via recycling preparative HPLC and were purified via a JAIGEL-LS255 column. The common fraction corresponding to a peak of the 83 min point of them quenched the quorum sensing of A. tumefaciens NT1 biosensor strain in ABMM containing X-gal and was designated quorum sensing inhibitor-83 min (QSI-83). The QSI-83 exhibited the heat stability and did not inhibit the growth of A. tumefaciens NT1. Furthermore, thin layer chromatography (TLC) results suggested that these novel materials may be antagonists of N-acyl homoserine lactone or may inhibit the QS autoinducer synthesis by Pseudomonas syringae pv. tabaci.

Lactobacillus acidophilus 88과 Lactobacillus bulgaricus IFO 13953간의 세포융합주의 특성에 관한 연구

조영배(Young-Bae Jo),김혜정(Hye-Jeong Kim),김성구(Sung-Koo Kim),백형석(Hyung-Suk Baik),전홍기(Hong-Ki Jun) 한국식품영양과학회 1996 한국식품영양과학회지 Vol.25 No.1

유산균의 균주개량방법의 일환으로 protoplast fusion기법과 electrofusion법을 이용하여 protease 활성, lipase 활성, 내열성, 내산성 등이 우수한 L. bulgaricus와 bacteriocin을 생산하는 L. acidophilus를 융합시켜 얻은 융합주들의 생리학적 성철을 검토하였다. 산 생성능, 내열성, 내산성, protease, lipase 활성 등은 L. bulgaricus가 L. acidophilus 보다 우수하였다. L. bulgaricus는 lactose와 sorbose를 이용하였으나 maltose와 sorbitol을 이용하지 못하는 반면, L. acidophilus는 maltose를 이용하고 lactose와 sorbose를 이용하지 못하였다. 융합주 가운데서는 3, 6, 7, 8, 10번이 모균주의 발효능 특성을 함께 지님으로서 재조합체임을 확인할 수 있었으며, sorbitol의 경우 모균주에서는 발효능이 전혀 나타나지 않았음에도 불구하고 융합주 4, 7번이 발효능을 나타내어 융합과정에서 새로운 형질을 획득하기도 한다는 사실을 알 수 있었다. Lactase 활성은 모균주 모두 높은 β-galactosidase 활성을 보였으나, phospho-β-galactosidase 활성은 거의 없었으며 융합주들도 다소 차이는 있었지만 모균주와 유사한 효소 활성을 나타내었다. 발효에 있어서 key enzyme으로 작용하는 protease, lipase 등의 효소 활성도 모균주의 활성 보다 우수한 융합주도 존재하였다. An interspecific fusant was made from the protoplasts of two strains of Lactobacillus genus(streptomycin and lincomycin resistant L. bulgaricus and kanamycin resistant L. acidophilus 88). The functional properties of the fusant were examined by determining bacteriocin productivity, acid-producing activity, ability of carbohydrates fermentation and three important enzyme activities. The recombinant strain revealed bacteriocin productivity. Acid production and β-galactosidase, phospho-β-galactosidase, lipase and protease activity of L. bulgaricus were better than those of L. acidophilus 88. Among fusants, β-galactosidase activity of two strains were better than that of the parent strains but phospho-β-galactosidase activity remarkably lower. One fusant revealed the improved proteolysis compared to that of the parent strains. Lipase activity of L. bulgaricus was better than that of L. acidophilus but another fusant exhibited the highest lipase activity.

Characterization of Plasmid-Mediated SHV-11 β-lactamase Gene of Klebsiella pneumoniae Isolated from the Clinical Specimens

Yun-Tae Kim(김윤태),Sanghoo Lee(이상호),Ji-Hyun Jang(장지현),Tae-Un Kim(김태운),Seok-Cheol Choi(최석철),Hyung-Suk Baik(백형석),Kyoung-Ryul Lee(이경률),Hye-Ryoung Yoon(윤혜령),Young-Jin Kim(김영진) 한국생명과학회 2009 생명과학회지 Vol.19 No.12

Chromosomal 인 SHV-11 β-lactamase가 plasmid를 매개로 다른 균주로 전달 되는 현상은 흔하지 않다. 본 연구에서는 플라스미드성 SHV-11 β-lactamase를 동시에 가지고 있는 ESBL생성 두 균주를 검출하였다. 따라서 이들 균주에 대한 유전적 특성과 임상적 의의에 대해 알아보고자 하였다. Vitek system과 이중디스크확산법을 이용하여 ESBL생성균주를 검출하였고, PCR과 DNA 염기서열분석을 이용하여 SHV-11 β-lactamase를 가지고 있는 ESBL생성균주를 확인 하였다. 이들 균주를 교차접합실험과 형질전환실험을 이용하여 유전자전이를 확인하고 액체배지 희석법으로 3세대 cephalosphorin 항생제에 대한 최소억제농도를 측정하였다. 이들 균주의 유전형 분석결과는 SHV-11 β-lactamase 유전자와 CTX-M-15 ESBL 유전자를 동시에 가지고 있었다. 3세대 cephalosphorin 항생제에 대한 최소억제농도는 SHV-11 β-lactamase와 CTX-M-15 ESBL 유전자를 동시에 가지고 있는 균주에서 64 ㎍/㎖ 이상이었고, SHV-11 β-lactamase 만을 가지고 재조합 한 균주에서 0.5 ㎍/㎖ 이하로 나타났다. In this study, we characterized extended-spectrum β-lactamase (ESBL)-producing Enterobacteriaceae isolated from clinical specimens in Korea and found two strains harboring plasmid-mediated blaSHV-11, Klebsiella pneumoniae. First, the isolates were detected using the Vitek system and confirmed by the double-disk synergy test. The classification of gene coding for ESBL was also performed by polymerase chain reactions and followed by DNA sequencing. The transmission of genes was confirmed by transconjugation and transformation. Resistant expression of transformants was determined by broth microdilution minimal inhibitory concentration test. Genotypic analysis revealed that one strain harbored the blaTEM-1, blaSHV-11 and blaCTX-M-15 and the other strain harbored the blaSHV-11 and blaCTX-M-15. They showed high resistance to oxyiminocephalosphorins (3rd-generation cephalosporins), while the transformant containing only blaSHV-11 did not show any resistance to the antibiotics.

Production of Poly-3-hydroxybutyrate from Xylose by Bacillus megaterium J-65

Jun Hong-Ki(전홍기),Young-Hi Jin(진영희),Hae Nam Kim(김해남),Yun-Tae Kim(김윤태),Sam Woong Kim(김삼웅),Hyung Suk Baik(백형석) 한국생명과학회 2008 생명과학회지 Vol.18 No.12

본 연구는 생분해성 플라스틱인 poly-β-hydroxybutyrate (PHB)의 생산단가를 낮추기 위한 노력으로 저가의 기질로부터 PHB 대량생산을 위한 기초자료를 얻는데 그 목적을 두었다. Hemicellulose hydrolysate는 지구상에 풍부하게 존재하는 저가의 waste by-product로서 xylose가 많이 포함되어 있다. 본 연구에서는 xylose로부터 PHB를 생산할 수 있는 균주를 토양에서 분리하여, 분류학적 위치를 밝히고, 균체 생육 최적 조건, PHB 생산을 위한 최적 발효 배양 조건, PHB의 구조 확인 등을 검토 하였으며, 그 결과는 다음과 같다. 토양으로부터 분리한 균주 J-65는 형태학적, 배양적, 생화학적 및 partial 16S rRNA sequence에 근거하여 Bacillus megaterium로 동정하였다. B. megaterium J-65의 균체 생육 최적 조건은 온도 37℃, 초발 pH 8.0이었으며 2% xylose, 0.25% (NH₄)₂SO₄, 0.3% Na₂HPO₄ㆍ12H₂O, 0.1% KH₂PO₄였다. PHB 축적에 영향을 미치는 요인을 검토하기 위해 균체생육 최적배지에서 37℃, 24시간 1차 배양한 후, 균체를 회수하여 각종 영양분이 결핍된 배지에 2차 배양을 실시한 결과 B. megaterium J-65는 균형생육조건(balanced-growth condition)에서 PHB를 합성하는 균주로 나타났다. PHB보다 물성이 향상된 PHB/HV 공중합체를 생산하기 위하여 보조기질로 propionic acid를 첨가하였을 때, 0.1% propionic acid 농도에서 HV ㏖%가 14%인 PHB/HV 공중합체가 합성되었다. 5 l 용량의 발효조에 B. megaterium J-65를 회분배양하였을 때 배양 21시간에 건조균체량 10 g/l, PHB 3.5 g/l를 얻을 수 있었고, 유가배양을 실시한 결과 배양 48시간에 건조균체량 26.52 g/l, PHB 9.28 g/l를 얻을 수 있었다. 생산된 PHB를 alkaline solution 처리와 chloroform을 이용한 유기용매 추출법을 이용하여 추출ㆍ정제한 후 Gas Chromatography로 정제를 확인하고 300㎒ 1H-NMR을 실시한 결과 3-hydroxybutyrate의 homopolymer임을 확인하였다. A microorganism capable of producing high level of poly-3-hydoxybutyrate (PHB) from xylose was isolated from soil. The isolated strain J-65 was identified as Bacillus megaterium based on the morphological, biochemical and molecular biological characteristics. The optimum temperature and pH for the growth of B. megaterium J-65 were 37℃ and 8.0, respectively. The optimum medium composition for the cell growth was 2% xylose, 0.25% (NH₄)₂SO₄, 0.3% Na₂HPO₄ㆍ12H₂O, and 0.1% KH₂PO₄. The optimum condition for PHB accumulation was same to the optimum condition for cell growth. Copolymer of β-hydroxybutyric and β-hydroxyvaleric acid was produced when propionic acid was added to shake flasks containing 20 g/l of xylose. Fermenter culture was carried out to produce the high concentration of PHB. In batch culture, cell mass was 9.82 g/l and PHB content was 35% of dry cell weight. PHB produced by B. megaterium J-65 was identified as homopolymer of 3-hydoxybutyric acid by GC and NMR.

정지기 Salmonella typhimurium 세포에서 특이적으로 발현되는 세포질 단백질의 동정 및 발현조절에 대한 연구

유아영,김영희,유종언,김삼웅,백형석,강호영,Yoo, Ah-Young,Kim, Young-Hee,Yu, Jong-Earn,Kim, Sam-Woong,Baik, Hyung-Suk,Kang, Ho-Young 한국생명과학회 2007 생명과학회지 Vol.17 No.2

Salmoenella는 대표적인 intracellular pathogen으로 숙주의 면역 세포인 macrophage 내에서 살아남아 이들을 매개로 숙주의 몸 전체를 이동해 가면서 전신성 감염을 일으킨다. 살모넬라는 숙주 세포 내부의 이러한 극한 환경을 극복하기 위해서 다양한 방어 기작을 가진다. 본 연구에서는 복합적인 스트레스가 작용하는 정지기 Salmonella에서 특이적으로 발현되는 단백질에 주목하였다. 정지기 상태의 Salmonella에서 약 20 kDa의 단백질이 특이적으로 많이 발현되었으며, 세포질 분획을 통해 이 단백질이 세포질 부분에 존재함을 알 수 있었다. MALDI-TOF 분석을 통해 이 단백질이 $\b{D}NA$ binding $\b{p}rotein$ in $\b{s}tationary$ phase (Dps) 단백질임을 확인하였다. Dps 단백질은 스트레스가 주어진 상황에서 DNA에 비특이적으로 결합하여 DNA가 안정한 형태를 유지하도록 하여 스트레스로부터 염색체를 보호하는 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 이후의 연구를 위하여 과발현하여 정제한 Dps 단백질을 토끼에 주사하여 Dps 특이적인 항체를 제조하였다. dps 발현에 영향을 미치는 조절자 단백질을 알기 위하여 다양한 S. typhimrium 돌연변이주들 내에서의 Dps 단백질양을 조사하였다. Salmonella is facultative intracellular pathogen that can survive and replicate in macrophages even though these cells are equipped with a plethora of anti-microbial mechanisms. To survive in this hostile intracellular environment, Salmonella has evolved numerous defense mechartisms. An approximately 20 kDa protein was detected as a stationary-phase specific protein band in cytosolic fraction. It was identified as a DNA binding protein in stationary phase (Dps) by analysis of MALDI-TOF assay. It has been known that Dps, the protein produced in the stationary phase of bacteria, allows DNA to form chromatin by binding to DNA nonspecifically and protects DNA from reactive oxidative species (ROS). For further study, Dps specific polyclonal antibodies were generated by injection of purified Dps protein into rabbit. To examine the Finfluence of several regulatory proteins in the expression dps gene, Dps protein level in various S. typhimurium mutants defecting regulatory proteins were investigated by Westernblot using Dps specific polyclonal antibodies.

논문 : Lactococcus sp. JK-8에서 생산된 D-Xylose isomerase의 정제와 특성에 관한 연구

전홍기 ( Hong Ki Jun ),김숙영 ( Suk Young Kim ),백형석 ( Hyung Suk Baik ) 부산대학교 김치연구소 2004 김치의 과학과 기술 Vol.10 No.-

김치 분리균인 Bacillus sp. JK - 43이 생산하는 Cyclodextrin Glucanotransferase의 생산 및 특성

전홍기(Hong-Ki Jun),배경미(Kyung-Mi Bae),김영희(Young-Hee Kim),백형석(Hyung-Suk Baik) 한국식품영양과학회 2000 한국식품영양과학회지 Vol.29 No.1

김치 시료로부터 자동산화되지 않으며 열 및 중성 pH 에서 안정한 AA 유도체인 AA-2G를 생산할 수 있는 당전이활성을 가진 CGTase 생산균주를 분리하였고, 분리균주의 형태학적, 배양학적, 생리학적 성질 및 16s-rDNA sequences를 조사한 결과 그람 양성의 간균으로 호기성이며 내생포자를 형성하는 전형적인 중온성 Bacillus sp. JK-43으로 동정되었다. Bacillus sp. JK-43의 CGTase는 AA-2G 뿐만 아니라 AA-6G로 추정되는 물질을 함께 생산하였으며, 효소 최적생산조건은 1.0% soluble starch, 1.0% yeast extract, 1.0% Na₂CO₃, 0.1% K₂HPO₄그리고 0.02% MgSO₄ㆍ7H₂O가 함유된 배지에서 pH 7.0, 37℃에서 26시간 동안 진탕배양하였을 때였다. 각종 당공여체에 따른 Bacillus sp. JK-43의 AA-2G 생산성을 조사한 결과 β-CD에서 가장 높은 AA-2G 생산성을 보였으며, 식혜제조폐액인 엿기름 및 밥당화액에서도 비교적 높은 AA-2G 생산성을 보였다. 또한 여러 가지 당수용체에 대한 JK-43의 CGTase의 당전이 반응을 검토한 결과 sucrose, mannitol 및 inositol에서 높은 당전이 수율인 70~90%를 나타내었다. A bacterial strain, designated as JK-43, producing extracellular cyclodextrin glucanotransferase (CGTase)[EC 2.4.1.19] was isolated from kimchi. The CGTase from isolated strain JK-43 showed the transglucosylation activity from soluble starch to L-ascorbic acid (AA) compared to those obtained from other strains. A main product formed by this reaction was identified as 2-Ο-α-glucopyranosyl L-ascorbic acid (AA-2G) by testing its susceptibility to α-glucosidase hydrolysis, the HPLC profiles, and through the elementary analysis. The β-CD, γ-CD, potato starch and corn starch were identified to be suitable glucosyl donor for transglucosylation reaction on AA by CGTase. Acceptor specificity on AA-2G production was examined by use of AA, Iso-AA and AA-2P. Transglucosylation was observed toward AA-2P as well as AA and Iso-AA. The microorganism isolated from kimchi was identified as a strain of Bacillus sp. JK-43 based on the morphological, cultural, biochemical characteristics and partial 16SrDNA sequence analysis. The maximal CGTase production was observed in a medium containing 1.0% soluble starch, 1.0% yeast extract, 1.0% Na₂CO₃, 0.1% K₂HPO₄, and 0.02% MgSO₄ㆍ7H₂O with initial pH 7.0. The strain was cultured at 37℃ for 26 hrs with reciprocal shaking.

Lactobacillus acidophilus 88과 Lactobacillus bulgaricus IFO 13953간의 세포융합주의 특성에 관한 연구

조영배,김혜정,김성구,백형석,전홍기 부산대학교 유전공학연구소 1996 분자생물학 연구보 Vol.12 No.-

유산균의 균주개량방법의 일환으로 protoplast fusion 기법과 electrofusion법을 이용하여 protease 활성, lipase 활성, 내열성, 내산성 등이 우수한 L. bulgaricus 와 bacteriocin을 생산하는 L. acidophilus를 융합시켜 얻은 융합주들의 생리학적 성질을 검토하였다. 산 생성능, 내열성, 내산성, protease, lipase 활성 등은 L. bulgaricus가 L. acidophilus 보다 우수하였다. L. bulgaricus는 lactose와 sorbose를 이용하였으나 maltose와 sorbitol을 이용하지 못하는 반면, L. acidophilus는 maltose를 이용하고 lactose와 sorbose를 이용하지 못하였다. 융합주 가운데서는 3, 6, 7, 8, 10번이 모균주의 발효능 특성을 함께 지님으로서 재조합체임을 확인 할 수 있었으며, sorbitol의 경우 모균주에서는 발효능이 전혀 나타나지 않았음에도 불구하고 융합주 4, 7번이 발효능을 나타내어 융합과정에서 새로운 형질을 획득하기도 한다는 사실을 알 수 있었다. Lactase 활성은 모균주 모두 높은 β-galactosidase 활성을 보였으나, phospho-β-galactosidase 활성은 거의 없었으며 융합주들도 다소 차이는 있었지만 모균주와 유사한 효소 활성을 나타내었다. 발효에 있어서 key enzyme으로 작용하는 protease, lipase 등의 효소 활성도 모균주의 활성 보다 우수한 융합주도 존재하였다. Aninterspecific fusant was made from the protoplasts of two strains of lactobacillus genus (streptomycin and lincomycin resistant L. bulgaricus and kanamycin resistant L. acidophilus 88). The functional properties of the fusant were examined by determining bacteriocin productivity, acid producing activity, ability of carbohydrates fermentation and three important enzyme activities. The recombinant strain revealed bacteriocin productivity. Acid production and β galactosidase, phospho-β-galactosidase, lipase and protease activity of L. bulgaricus were better than those of L. acidophilus 88. Among fusants, β-galactosidase activity of two strains were better than that of the parent strains but phospho-β-galactosidase activity remarkably lower. One fusant revealed the improved proteolysis compared to that of the parent strains- Lipase activity of L. bulgaricus was better than that of L. acidophilus but another fusant exhibited the highest lipase activity.