Abscisin산 정량분석을 위한 방사면역측정법

黃台益,林賢玉,金容在,李民化 韓國作物學會 1985 Korean journal of crop science Vol.30 No.1

Abscisin산(ABA)의 정량분석을 위한 방사면역 측정법을 개발하였다. (± )-ABA를 사람혈청 albumin에 conjugate 시킨 항원을 만들고 이를 가토에 접종하여 얻은 항혈청은 ABA에 대하여 높은 친화성을 나타냈다(Ka=3.28 1013 /mol ) 3 H-ABA를 추적자로 사용하고 dextran-coated charcoal을 유리 ABA와 항체결합 ABA의 분리에 사용한 본 방사면역측정법은 ABA를 0.5 1012mol 까지 측정할 수 있었고 측정범위는 14 1012mol 까지 포함되었다. 이 면역측정법은 특이성이 높기 때문에 분석전 시료로부터 ABA를 미리 정제할 필요가 없었다. 시료 1개의 분석에는 2시간 정도 소요되어 하루 수백개의 시료률 분석처리할 수 있었다. A radioimmunoassay technique has been developed for the quantitative analysis of Abscisic acid (ABA). The antibody, obtained by immunizing rabbits against a conjugate of ABA with human serum albumin, had a high affinity (Ka=3.28x10~ 13/l/mol) for ABA. The use of 3 H-labelled ABA as tracer and of dextran-coated charcoal for separation of free ABA from antibody-bound ABA permitted detection of as little as 0.5x10~ -12/ mol ABA. The measuring range extended to 14x10~ -12/ mol. Because of the high specificity of this immunoassay, no extract purification steps were required prior to analysis. And then, only 2 hr in radioimmunoassay was required to ABA analysis. From these results, it is suggested using this assays that more than hundreds samples can be assayed sensitive and simple per day for ABA.

식물홀몬에 대한 단클론성 항체 생산과 이용

황태익 한국작물학회 1989 한국작물학회지 Vol.34 No.1

식물 홀몬의 면역적 분석은 무엇보다 분석전 복잡한 정제가 필요치 않고 정밀분석을 신속히 할 수 있다는데 그 장점이 있다. 다만 pAb를 이용하는 경우에 특이성이 다소 문제로 대두되고 있으나 mAb를 생산함으로써 크게 개량할 수 있었다. 물론 GA류에 있어서는 극히 유사한 구조를 가진것 끼리의 면역분석은 잘되지 않는 것처럼 받아들여지고 있으나 이 문제도 epitope를 달리 함으로써 어느 정도 해결 팔 수 있으며, 이경우 HPLC로 정제후 mAb-ELISA를 이용하여 검출하면 훨씬 정확한 분리와 분석이 가능 할 것으로 생각된다. 본 연구자 등은 mAb를 이용한 식물 홀몬 분석에 있어서 시료를 추출, 정제후 실제 ELISA에 의해서 정량분석에 소요되는 시간은 2시간 미만정도밖에 걸리지 않는다. 또한 검출 한계도 pmol~fmol 정도로 정밀분석이 가능하다. 그리고 소요되는 장비는 간단한 spectrophometer만 가지면 된다. 다만 mAb를 생산하는 과정이 복잡하고 시간이 오래 걸린다. 따라서 필요로 하는 항체를 구입해서 (ABA artiserum sigma) 사용하는 것이 오히려 편리 할 것이다. 본 연구자 둥은 mAb를 이용한 식물 홀몬정량분석용 면역킷트를 제조하였다. 상기와 같은 여러가지 결과들은 식물 홀몬의 분석에 면역측정법이 편리하게 이용될 수 있음을 시사하고 생각된다. An immunoassay techniques using monoclonal antibodies have been developed of the quantitative analysis of endogenous hormones in plants. In order to be useful for immunoassay, both a high degree of specificity and a high affinity are required. A system is described for production of hybridomas which secrete antibodies against the plant hormone. Using the system we were able to produce hybridmas with the desired antibody specificity by cell fusion and culture method. For a number of obvious reasons, monoclonal antibodies(mAb) were superior to polyclonal antibodies.

보리 바이러스병 저항성 육종을 위한 면역 측정기술의 이용

황태익,민경수,김용재 한국작물학회 1992 한국작물학회 학술발표대회 논문집 Vol.1992 No.-

기능성 두부 제조에 관한 연구

황태익,변광의 순천향대학교 기초과학연구소 2000 순천향자연과학연구 논문집 Vol.6 No.2

We added complex functional ingredients that were derived from the fermented product of Ang-Khak into a well-nutritive soybean curd in order to evaluate the function of Ang-Khak and soybean efficiently. In the production process of red soybean curd(RS) according to Ang-Khak concentration, as we compared it with a common soybean curd(CS), there were no obvious differences in the composition and yield. In the color, L- value tended to be reduced, in order of CS>RS1>RS2> RS3>RS4>RS5, as additional concentration of red rice extract increased(P<0.05). a-value tended to be the opposite way of the L-value, in order of RS5>RS4>RS3>RS2>RS1>CS(P<0.05) and b-value appeared lower than CS value overall(P<0.05). The properties of the red soybean curd's texture showed the differences in only hardness and adhesiveness(P<0.05), not in cohesiveness, springiness and gumminess. In overall sensory evaluation, the color of RS appeared red(P<0.05) and the odor(roasty) and texture(hardness) had no differences. RS was almost same value as CS in the taste, but was not as favor as much than CS in overall preference(P<0.05).

벼와 담배의 원형질체 배양조건에 따른 식물호르몬의 변화

黃台益,閔庚洙,林賢玉,安裝淳 韓國作物學會 1997 한국작물학회지 Vol.42 No.1

작물 원형질체를 배양하면서 세포의 생존과 노화 그리고 고사의 상태를 대사적으로 정확히 판단이 가능한 marker물질을 확인하고 간편한 측정법을 확립하기 위하여 일련의 연구를 수행하였던 바 그 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 담배와 벼의 원형질체를 나출하여 MS와KM-8P를 기본배지로 하여 2,4-K와 CM을 첨가하였던 바, ABA는 경시적으로 감소하였으며 CM첨가에 의해서 더 많이 감소하였다. GA3 , IAA, zeatin은 반대로 증가하는 경향을 나타내었다. 특히 ABA의 감소율과 zeatin의 증가율이 가장 크게 나타났다. 2. Osmoticum(mannitol)을 적정 농도 이상으로 처리하였을 때 ABA는 일시적으로 증가되었다가 감소되었고, 다른 성장 호르몬은 모두 증가폭이 농도가 증가될수록 둔화되었다. 3. Supermine 10mM과 NaCl을 처리하였을 때 담배와 벼에서 각 호르몬의 증감은 서로 반대로 나타났다. 특히 담배는 NaCl의 stress가 크게 나타났다. 그리고 배양 후반기에는 원형질체의 분열이 중지되었다. 4. 원형질체의 배지 성분을 제거하고 32℃ 로 고온 배양에 의해서 인위적으로 노화를 촉진시켰을 때 세포의 활력은 48시간 이후에 크게 감소되었다. 세포의 활력 상실과 반비례적으로 ABA는 배양 10일까지 크게 증가되었다. 이와 반대로 성장 호르몬들은 모두 증가되지 않고 감소가 이루어졌다. 특히 zeatin의 감소가 크게 나타났다. 5. 이상의 결과에 따라서 식물 호르몬은 원형질체가 처한 환경 요인이나 부여된 어떤 조건에 따라서 민감하게 변동하고 있음을 확인하였다. This study was carried out to establish simple and easy methods to judge the survival, senescence and death of the protoplasts in culture system by identifying the marker substance related to metabolic status of the cells. When rice and tobacco protoplasts were cultured in MS and KM-8P media containing 2,4-D or coconut milk ABA decreased especially in the media containing coconut milk, but GA3 , IAA and zeatin increased as the cultures progressed. The decrease of ABA and increase of zeatin was especially remarkable. When the supraoptimal amount of osmoticum (mannitol) was added to the culture media ABA decreased after a momentary increase, but other growth hormones slowly increased as the concentration of the osmoticum increased. Contents of individual hormones were contrasted when protoplasts rice and tobacco were cultured on the same medium containing 10mM super mine or NaCl. Tobacco protoplasts were more sensitive to NaCl stress and stopped protoplast division at the late stage of culture. Protoplast viability decreased greatly in 48 hours when the protoplast were at 32~circC on a medium lacking several components. ABA content increased up to 10 days from incubation in negative proportion to the protoplast viability. On the other hand contents of other growth hormones, especially zeatin, decreased. The present results clearly showed that the contents of individual growth hormones in the plant protoplasts in culture varied sensitively in response to environmental factors that they are faced with. This indicates that the physiological states of the protoplast, such as survival, senescence or death can be simply judged based on the quantitative analysis of those hormones by ELISA.

비파(枇杷)의 항암효과에 대한 암세포특이성 검정

황태익,임현옥,이재와 韓國藥用作物學會 1996 한국약용작물학회지 Vol.4 No.4

비파의 항암효과에 대하여 조사하였다. 비파를 잎 줄기 과실 종자로 나누어 정상세포와 여러 가지 암세포주를 비교하여 특이적으로 암세포를 공격하는지 여부를 MTT방법에 의해서 조사한 결과는 다음과 같다. 1. 비파의 4가지 부위를 MeOH 와 물로 추출하여 정상세포와 암세포 (SNU-1, SNU-C4)에 처리하였다. 이 가운데서 과육의 물추출 분획이 정상세포는 영향이 없이 암세포를 고사시켰다. 2. 과육의 물추출 분획을 Sephadex LH-20으로 분리정제하여 9개의 분획으로 나누어 이 분획들을 사람 정상세포와 7가지 암세포에 처리하였다. 이 9개의 분획중 8번째 분획이 정상세포에 영향을 미치지 않고 유방암, 간암, 위암에 특이적으로 세포독성을 나타냈다. 3. 제 8분획의 생체에서 암치유 효과를 알아보기 위해서 mouse에 복수암을 유발시켜 (10마리) 구강투여하거나 복강에 주사하였다. 암이 유발된 대조구는 10일 부터 13일 사이에 모두 죽었다. 그러나 투여군은 2개월사이에 1마리씩 죽었고 나머지는 모두 생존하였다. 상기는 결과는 비파과육에 는 암세포에 특이적으로 작용하여 세포독성을 나타내는 물질을 가지고 있다는 것을 확인해주었다. Antitumouric effect of loquat was investigated treating the extract from leaves, stems, fruits or seeds to normal and cancer cell lines to check by MTT method wheather the cancer cells are spec­ifially attacked. The results are summarized as follows. Water of MeOH extract from each organ were applied to human normal and cancer cell lines, SNU-1 and SNU-C4. The water extract from fruit flesh gave no dffect to normal cell lines by killed all the cancer cell lines. The water extract from fruit flesh was purified by Sephadex LH-20 and separated into 9 fractions which were than applied to 8 cancer cell lines. The eighth fraction out of the 9 fractions gave no effect to normal cells but exerted specific cytotoxicity to breast cancer, stomach and liver cancer cells. The eighth fraction was orally administed and injected to 10 mice each suffering from the abdominal cancer induced by myeloma cells, SP2/0-Ag14. In the groups received the treatment, only one mouse each died in 2 months but the rest survived until the end of the experimental period, which those in the control plot died in 10 to 13 days. The present results confirmed that loquat contained some substance that had specific cytotoxicity to human cancer cells.

식물홀몬에 대한 단클론성 항체 생산과 이용

黃台益 韓國作物學會 1989 한국작물학회지 Vol.34 No.S

식물 홀몬의 면역적 분석은 무엇보다 분석전 복잡한 정제가 필요치 않고 정밀분석을 신속히 할 수 있다는데 그 장점이 있다. 다만 pAb를 이용하는 경우에 특이성이 다소 문제로 대두되고 있으나 mAb를 생산함으로써 크게 개량할 수 있었다. 물론 GA류에 있어서는 극히 유사한 구조를 가진것 끼리의 면역분석은 잘되지 않는 것처럼 받아들여지고 있으나 이 문제도 epitope를 달리 함으로써 어느 정도 해결 팔 수 있으며, 이경우 HPLC로 정제후 mAb-ELISA를 이용하여 검출하면 훨씬 정확한 분리와 분석이 가능 할 것으로 생각된다. 본 연구자 등은 mAb를 이용한 식물 홀몬 분석에 있어서 시료를 추출, 정제후 실제 ELISA에 의해서 정량분석에 소요되는 시간은 2시간 미만정도밖에 걸리지 않는다. 또한 검출 한계도 pmol~fmol 정도로 정밀분석이 가능하다. 그리고 소요되는 장비는 간단한 spectrophometer만 가지면 된다. 다만 mAb를 생산하는 과정이 복잡하고 시간이 오래 걸린다. 따라서 필요로 하는 항체를 구입해서 (ABA artiserum sigma) 사용하는 것이 오히려 편리 할 것이다. 본 연구자 둥은 mAb를 이용한 식물 홀몬정량분석용 면역킷트를 제조하였다. 상기와 같은 여러가지 결과들은 식물 홀몬의 분석에 면역측정법이 편리하게 이용될 수 있음을 시사하고 생각된다. An immunoassay techniques using monoclonal antibodies have been developed of the quantitative analysis of endogenous hormones in plants. In order to be useful for immunoassay, both a high degree of specificity and a high affinity are required. A system is described for production of hybridomas which secrete antibodies against the plant hormone. Using the system we were able to produce hybridmas with the desired antibody specificity by cell fusion and culture method. For a number of obvious reasons, monoclonal antibodies(mAb) were superior to polyclonal antibodies.

밭미나리 발효액이 알콜투여 흰쥐의 간기능관련효소활성에 미치는 영향

황태익,임현옥,이재와 韓國藥用作物學會 1999 한국약용작물학회지 Vol.7 No.2

미나리는 간을 보호하며 간질환을 예방, 치유하는 효능이 있는 기능성식물로 인식되어 민간요법에 널리애용되고 있다. 그래서 알콜을 렛트와 마우스에 처리하여 만성, 아급성, 급성중독을 유도하고 밭미나리 발효액과 추출물 그리고 물미나리추출물의 효과를 조사한 결과는 다음과 같다. 렛트와 마우스에 에탄올을 2일동안 투여한결과 total cholesterol과 total glyceride의 수치가 증가되었으며 20일동안 밭미나리발효액과 추출물 그리고 물미나리추출물을 투여한후 에탄올을 2일동안 급여한균에서는 total cholesterol과 total glyceride의 감소 효과가 있었으나 처리간의 유의성은 인정되지않았다. 그러나 실험동물의 혈청중에 알콜에의해서 높아졌던 alanine aminotransferase 와 asparate aminotransferase는 밭미나리발효액 과 추출물에 의해서 감소되었으며 밭미나리발효액투여군에서 가장 많이 감소되어 처리간에 유의성이 인정되었다. 렛트에 10%에탄올을 10개월간 투여하여 만성알콜중독을 유발시킨다음 5일동안 물만 급여한군과 밭미나리발효액을 투여한군을 비교한바 total cholesterol은 40%, total glyceride는 60%의 감소효과가 있었으며 alanine aminotransferase 와 asparate aminotrasferase는 87.2%와 91.7%를 감소시켜 정상에 가깝게 회복시키는효과가 인정되었다. alkaline phosphatase, catalase, superoxide dismutase 및 glutathione peroxidase의 활성은 알콜의 처리에 의해서 급만성모두 유의적인 변동을 나타냈으며 밭미나리 발효액의 처리에 의해서 alkaline phosphatase와 superoxide dismutase의 활성에 특히 유의적인 감소를 가져왔다. 이와같은 결과는 물미나리보다 밭미나리발효액이 알콜성 간질환에 효능이있음을 시 사하는것이라 하겠다. It has long been recognized that dropwort contains specific funtional subtances for protecting human liver and preventing and curing its diseases, and thus it has been widely utilized in traditional folk remedy. In the present study. fresh of fermented extract of dropwort shoots grown on dryland and fresh extract of those grown on flooded fie1d were fed to the rats suffering from acute, subacute or chronical toxication induced by alcohol administration, and their affects were investigated. Administration of alcohol to rats and mice for 2 days at 5ml of 30% EtOH/kg/day raised total cholesterol and total glyceride which were, however, great1y supressed when alcohol was administered to the laboratory animals previously fed on fresh or fermented extract of dryland dropwort, or fresh extract of flooded field-grown dropwort for 20 days, without significant differences among the extracts. The levels of alanine aminotransferase and aspartate aminotransferase which were raised by alcohol adminstration were also lowered by feeding dropwort extract, among which that of fermented dryland-grown one was more effective than the other two. Chronic alcohol toxication was induced to rats by administering 10% alcohol for 10 months and fermented dropwort extract or tap water was fed to the rats for 5 days. The rats fed on fermented dropwort extract were lower in total cholesterol by 40% and in tota1 glyceride by 60% than the control. Alanine aminotransferase and aspartate aminotransferase in the rats fed on fermented dropwort extract were decreased by 87.2% and 91.7%, respectively, compared to the control, and the rats recovered almost to normal. Activity of alkaline phosphatase, catalase, superoxide dismutase or glutathione peroxidase changed greatly by alcohol administration in the rats suffering from chronic as well as acute toxication. The extract of fermented dry land dropwort significantly lowed the activity of those enzymes, especially, alkaline phosphatase and superoxide dismutase. The present results suggesting the possible medicinal effect of fermented dropwort extract to liver diseases.

더위지기 생육 중 항산화 활성 변화

황태익 한국약용작물학회 2009 한국약용작물학회지 Vol.17 No.4

The aim of this study was to investigate the effect of plant growth at several different growing periods on antioxidant activities and zeatin and ABA contents of Artemisia iwayomogi. Measurements of antioxidant activities, lipid peroxidation inhibition, and superoxide radical scavenging activity were done using PMS, NBT and lipid auto-oxidation analysis, respectively. The results show that activities of antioxidants from Artemisia iwayomogi had much higher than BHT. DPPH free radical scavenging effect of Artemisia leaf extract was increased from 71.06±4.36% in April to 90.06±4.41% in October. Activities of superoxide radical scavenging and lipid peroxidation inhibition were 33.83±3.45% and 45.60±3.10 in April and then increased to 84.40±4.00% and 75.86±3.50% in October, respectively. An ELISA technique has been developed for the determination of zeatin and ABA in Artemisia leaves. By this method, the content changes of zeatin and ABA from Artemisia during the growth were investigated. The zeatin content in leaf was measured to be 186.86±1.40 pmol/g dry weight in April, however, decreased to 117.93±5.83 pmol in October. The ABA content in leaf increased from 19.00±1.26 nmol in April to 68.20±2.52 nmol in October. Relationship between antioxidant activities and plant hormone contents was indicated that antioxidant activity may depend on decreasing zeatin content or increasing ABA content.

옥신(IAA)에 대한 단크론성 항체생산

황태익,임현옥 한국작물학회 1988 한국작물학회 학술발표대회 논문집 Vol.1988 No.-