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      • KCI등재후보

        Effect of 6-Hydroxydopamine (6-OHDA) on the Expression of Testicular Steroidogenic Genes in Adult Rats

        허현진,안련섭,이성호 한국발생생물학회 2010 발생과 생식 Vol.14 No.3

        A neurotoxin, 6-hydroxydopamine (6-OHDA) has been widely used to create animal model for Parkinson's disease (PD). The present study was undertaken to examine whether depletion of brain dopamine (DA) stores with 6-OHDA can make alteration in the activities of the testicular steroidogenesis in adult rats. Young adult male rats (3 months old) were received a single dose of 6-OHDA (200 ㎍ in 10 ㎕/animal) by intracerebroventricular (icv) injection, and sacrificed after two weeks. The mRNA levels of steroidogenesis-related enzymes were measured by qRT-PCRs. Serum testosterone levels were measured by radioimmunoassay. Single icv infusion of 6-OHDA significantly decreased the mRNA levels of CYP11A1 (control:6-OHDA group=1:0.68±0.14 AU, p<0.05), CYP17 (control:6-OHDA group=1:0.72±0.13 AU, p<0.05). There were no changes in the mRNA levels of 3β-HSD (control:6-OHDA group=1:0.84±0.08 AU) and 17β-HSD (control: 6-OHDA group=1:0.63±0.20 AU), though the levels tended to be decreased in the 6-OHDA treated group. Administration of 6-OHDA decreased significantly the mRNA level of StAR when compared to the level of saline-injected control animals (control:6-OHDA group=1:0.72±0.08 AU, p<0.05). Treatment with single dose of 6-OHDA remarkably lowered serum testosterone levels compared to the levels of control group (control:6-OHDA group=0.72±0.24:0.13±0.03 ng/㎖, p<0.05). Taken together with our previous study, the present study demonstrated that the activities of hypothalamus-pituitary-testis hormonal axis could be negatively affected by blockade of brain DA biosynthesis, and suggested the reduced reproductive potential might be resulted in the animals. More precise information on the testicular steroidogenic activities in PD patients and PD-like animals should be required prior to the generalization of the sex steroid hormone therapy to meet the highest standards for safety and efficacy.

      • KCI등재후보

        사춘기 전 수컷 흰쥐의 저정낭과 전립선의 성숙에 미치는 di(2-ethylhexyl) phthalate(DEHP)의 영향

        허현진,이원용,윤용달,최돈찬,이성호 한국발생생물학회 2008 발생과 생식 Vol.12 No.3

        The plasticizer di(2-ethylhexyl) phthalate(DEHP) is one of the most well known endocrine disrupting chemicals(EDCs) because of its strong anti-androgenic effects on the reproductive and developmental process in male rodents and human. The present study was performed to examine whether prepubertal exposure to DEHP can make any alteration during the maturation of accessory sex organs in male rats. As a result, there was no significant change in body weights, serum T levels and tissue weights except of seminal vesicle and ventral prostate in DEHP-treated animals compared to vehicle-treated ones. The seminal vesicle weights in high-dose group(200mg/kg) were significantly lower than those from the control group(p<0.05), and ventral prostate weights were significantly lower than those from the control group(p<0.05) in both low-dose(20mg/kg) and high-dose group. Histological studies revealed that the seminal vesicles from DEHP-treated groups showed reduced areas of mucosal folds. Pseudostratified columnar epithelia were observed in the ventral prostates of DEHP-treated samples while cuboidal epithelia were found in the control group. The transcriptional activities of ER-α in seminal vesicle from high-dose group(p<0.05) were significantly higher than those from the control group, and ER-β expression was significantly decreased in low-dose group(p<0.05) compared to the control. In ventral prostate, ER-β mRNA levels from low-dose group(p<0.05) were significantly lower than those from the control group, and significantly increased in high-dose group(p<0.001). AR expressions, however, were not significantly different in all experimental groups of both seminal vesicle and ventral prostate. In conclusion, the present study demonstrated that (i) adverse effect(s) of DEHP on sexual maturation during prepubertal period could be limited, (ii) seminal vesicle and prostate gland were sensitive targets to DEHP in prepubertal rats and (iii) the deleterious effects of DEHP might be mediated through ER-associated mechanism

      • KCI등재후보

        수컷 흰쥐의 시상하부-뇌하수체 축 호르몬 유전자 발현에 미치는 6-Hydroxydopamine(6-OHDA)의 영향

        허현진,안련섭,이성호 한국발생생물학회 2009 발생과 생식 Vol.13 No.4

        6-hydroxydopamine(6-OHDA)는 파킨슨 질환 동물 모델의 제조에 널리 사용되는 신경독소로 도파민성 뉴런에 대한 특이적인 독성을 나타낸다. 도파민 신호는 중추신경계의 광범위한 영역에서 생리 기능을 조절하는데, 이에 따라 파킨슨병 환자와 6-OHDA를 처리한 동물들의 신경내분비 활성에 극심한 변화가 있을 것으로 예상할 수 있다. 하지만 6-OHDA 주사 모델에서 시상하부-뇌하수체 신경내분비 회로에 관한 연구들은 전무한 실정이다. 본 연구는 6-OHDA에 의한 뇌 카테콜아민 합성의 차단이 성체 수컷 흰쥐의 시상하부-뇌하수체 호르몬 유전자들의 전사 활성에 일으키는 변화를 조사한 것이다. 생후 3개월의 수컷 흰쥐(SD strain)에 개체 당 200 ㎍의 6-OHDA를 10 ㎕의 생리식염수에 녹여 뇌실 내 주사(icv)하였고, 2주 후에 모든 실험동물들을 희생시켰다. 시상하부-뇌하수체 호르몬 유전자들의 mRNA 수준을 조사하기 위해 total RNA를 추출하여 반-정량적 RT-PCR을 시행하였다. 카테콜아민 생합성에서 속도조절효소로 작용하는 tyrosine hydroxylase(TH)의 경우 6-OHDA군에서 대조군에 비해 유의한 발현 감소가 나타났고(대조군:6-OHDA군=1:0.72±0.02AU, p<0.001), 이를 통해 6-OHDA 주사의 효력을 확인하였다. 시상하부에서 gonadotropin-releasing hormone(GnRH)과 corticotropin releasing hormone(CRH)의 mRNA 수준은 6- OHDA군이 대조군에 비해 유의하게 낮았다(GnRH, 대조군:6-OHDA군=1:0.39±0.03AU, p<0.001; CRH, 대조군:6-OHDA군=1:0.76±0.07AU, p<0.01). 뇌하수체에서 glycoprotein hormone들의 공통적인 alpha subunit(Cgα)과 LH beta subunit(LH-β) 그리고 FSH beta subunit(FSH-β)의 mRNA 수준의 경우 모두 6-OHDA군에서 대조군에 비해 유의한 감소를 나타냈다(Cgα, 대조군:6-OHDA군=1:0.81±0.02AU, p<0.001; LH-β, 대조군:6-OHDA군=1:0.68±0.04AU, p<0.001; FSH-β, 대조군:6-OHDA군=1:0.84±0.05AU, p<0.01). 이와 유사하게, 6-OHDA군에서의 뇌하수체 adrenocorticotrophic hormone(ACTH) 전사 수준 역시 대조군에 비해 유의하게 낮았다(대조군:6-OHDA군=1:0.86±0.04AU, p<0.01). 본 연구는 중추신경계로의 도파민 신경독소 주입에 의해 두 가지의 시상하부-뇌하수체 신경내분비 회로인 GnRH-성선자극호르몬 회로와 CRH-ACTH 회로의 전사 활성이 하향조정됨을 증명하였다. 이러한 결과는 시상하부로의 CA입력은 시상하부-뇌하수체 기능 조절을 통해 생식소와 부신의 활성에 영향을 미침을 시사하는 것으로, 파킨슨병 환자들에게서 빈번하게 발생하는 성 기능 장애와 열악한 스트레스 반응을 설명할 단서를 제공한다.

      • KCI등재

        미성숙한 암컷 흰쥐 시상하부의 신경회로에 미치는 Genistein의 직접 작용 : 에스트로겐 수용체 베타아형 경로?

        허현진,이성호 한국발생생물학회 2011 발생과 생식 Vol.15 No.2

        콩이나 적포도주의 식물성 에스트로겐(phytoestrogen)은 건강에 부정적이기보다는 긍정적인 효과를 갖는 것으로 알려져 있는데, 특히 콩류 섭취는 유방암이나 골다공증, 그리고 심혈관계 질환 예방과 높은 상관관계가 있는 것으로 보인다. 그러나 콩류, 특히 그 주성분인 genistein(GS)이 상기한 긍정적인 효과 외에도 여성의 생식계에 잠재적으로 부정적인 영향을 미칠 가능성에 대한 의문이 계속되어왔다. 선행 연구에서 본 연구자들은 사춘기 전에 genistein(GS)을 경구 투여했을 때 암컷 흰쥐의 생식계가 활성화되어 사춘기 개시가 조기에 유도되고, 암컷 성체에 GS를 뇌실내로 미세주입했을 때 kisspeptin-GnRH 뉴런회로 활성화가 일어남을 관찰하였다. 본 연구에서는 사춘기 전 암컷 흰쥐에서 의 시상하부 특이적인 GS 투여 효과와 이에 관여하는 에스트로겐 수용체 아형(ERα과 ERβ)을 조사하였다. 사춘기 전 암컷 흰쥐(SD strain, PND 30)를 마취시킨 후 GS(3.4 ㎍/animal)를 1회 뇌실내로 미세 주입하고, 2시간 후 희생시켰다. 시상하부내 생식조절 유전자 발현을 조사하기 위해, RNA를 추출한 후 semi-quantitative reverse transcription polymerase chain reaction(RT-PCR)을 시행하였다. GS 투여는 KiSS-1 유전자 발현의 상위조절자인 mTOR(1:0.361±0.058 AU, p<0.001) 발현을 유의하게 감소시켰고, GnRH 분비의 상위조절자인 GAD67(1:1.285±0.099 AU, p<0.05) 발현을 유의하게 증가시켰다. GS 투여는 KiSS-1(1:1.458±0.078 AU, p<0.001) mRNA 수준을 유의하게 증가시켰지만, kisspeptin 수용체인 GPR-54 (1:1.29±0.08 AU) mRNA 수준은 변화가 없었고, GnRH(1:0.379±0.196 AU, p<0.05)의 경우는 유의하게 감소시켰다. GS 투여군에서 ERα(1:1.180±0.390 AU) 발현은 대조군 대비 차이가 없었지만, ERβ(1:4.209±0.796 AU, p<0.01) 발현은 유의하게 증가했다. 본 연구결과는 사춘기 전 암컷 흰쥐에서 GS의 단기 노출이 시상하부의 GnRH 조절시스템을 직접 변화시킴을 보여준 것으로, 이러한 GS의 시상하부 특이적 효과에 ERβ 경로가 관여함을 강력히 시사한다. 이는 잘 알려진 ERβ 경로를 매개로 하는 GS의 유방암 억제 효과와 일치한다.

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