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- 저자 : 진덕희 (검색결과 2 건)
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고등 진핵 생물의 globin유전자는 family를 형성하여 그 발현은 혈액계 세포 에 있어서 특이적으로, 더우기 발생단계에 특이적으로 전사되는 유전자가 결 결 되고 있다. 또한 포유류와 조류의 α- 및 β-globin유전자는 각각 다른 염 색 체상에 복수로 위치하며 유전자군을 형성한다. 그러나 어류에 있어서는 거 의보고되어있지 않으므로 어류유전자의 발현조절기구의 해명을 위해 globin유 전자의 구조를 해석하는 것은 유용하다고 생각하여 잉어 β-globin유전자를 cloning하여 그 유전자의 구조해석을 행하고 조사하였으며, 순계가 확립되어 있는 Medaka의 β-globin cDNA를 clone화하여 구조해석을 행하였다. 잉어 혈액으로 부터 염색체 DNA를 추출정제하여 여러가지 제한효소를 조합하 여 소화한 후 southern blot hybridization을 행하여 상동성을 갖는 단편을 얻어 clone화 하였다. 얻어진 clone을 dideoxy 법으로 염기배열을 결정하고 구조해석을 하였다. 또한 Medaka 간장으로 부터 mRNA를 추출 정제하고 이것을 주형으로 cDNA를 합성화여 cDNA library를 만들어 Medaka β-globin cDNA를 clone화, 그 구조해석을 행하였다. 이러한 결과로서, 잉어 염색체 DNA로부터 clone화한 β-globin 유전자의 전 사개시부위 ATG의 상류에는 promoter 영역인 CCAAT TATA box가 존재하여 전 사종결부위 TAG의 하류에는 polyadenylation signal 부위가 두군데 존재하였 다. 단백질은 번역하는 coding 영역은 세개의 Exon과 두개의 Intron으로 구 성되어 있으며 전장은 441 염기이었다. 기존에 보고된 어류 β-globin의 아 미노산 배열과 비교하였을때 금붕어와 가장 높은 상동성을 보였으며, 잡종잉 어, 야생잉어, 거울잉어, 독일우로코잉어, 사구야마도잉어에 있어서도 β-gl obin유전자는 다형을 나타내었다. 염기배열의 해석 및 Southern hybridizatio n 그리고 PCR 방법에 의하여 잉어 α및 β-globin유전자는 유전자의 상류측 이 서로 마주보며 연좌하고 있는 것을 증명하였다. Medaka 간장 cDNA library 로 부터 다수의 clone이 얻어졌으며 그 중 한개의 clone에 대하여 전염기배 열을 결정, 구조해석을 한결과 438염기의 단백질 번역영역이 존재했다.
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