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Phosphorylation modulators에 의한 항암제 다제내성 유전자의 발현 조절
김선희,곽남희,강치덕,정병선 부산대학교 유전공학연구소 1995 분자생물학 연구보 Vol.11 No.-
암을 치료함에 있어서 항암제에 대한 다제내성(MDR)의 획득이 중대한 장애로서 지적되고 있으며, MDR 현상은 MDRI 유전자의 과잉 발현에 의한 것으로 알려져 있다. MDRI promoter 활성이 mutated ras 또는 raf-1 발현에 의하여 증강되는 현상을 좀 더 명확히 하기 위하여 암 환자의 조직검체를 사용하여 RNA slot-blot 분석법으로 MDRI 유전자의 발현과 이들 암 유전자의 발현과의 관련성을 조사하였다. 3개의 대장암 검체에서 이들 암유전자의 높은 발현과 함께 MDRI gene도 높은 발현을 나타내었다. Raf-1에 의한 MDRI promoter의 최대 활성 증강을 나타내는 DNA 배열은 이 promoter 영역내의 HSE 영역과 일치하며, 또한 이 promoter에 작용하는 regulatory clement가 has70 promoter와 매우 유사하여 heat-induced(42℃) p432-CAT 발현에 있어 protein phosphatase inhibitor의 효과를 조사하였다. Okadaic acid나 calyculin은 농도 의존적으로 heat-induced p432-CAT의 발현을 증강시켰다. 또한 p56-CAT 발현이 forskolin에 의한 증강 또는 H-87에 의한 감소를 나타내어 이러한 현상은 MDRI promoter내의 CRE 유사 배열이 기능을 나타내는 것으로 사료되어 MDRI promoter가 has70 promoter와 유사하게 조절되며, Raf-1 발현에 의한 MDRI promoter의 활성화는 MDRI promoter내에 존재하는 HSE와 관련됨을 시사하였다. Multidrug resistance(MDR) poses a serious clinical problem in chemotherapy of cancer. MDR results from overexpression of the MDRI gene which encodes a drug-efflux pump called P-glycoprotein. To confirm our observation that the expression of mutated ras or raf-1 gene increased MDRI promoter activity, it was examined whether MDRI gene expression were correlated with the expression of these oncogenes in clinical tumor samples using RNA slot-blot analysis. These oncogenes were correlated with the expression of MDRI gene in 3 colon tumor samples. Since DNA sequence exhibiting maximum activation of MDRI promoter by Raf-1 is associated with heat shock element of MDRI promoter region, and regulatory element contained in MDRI promoter is very similar to that of hsp70 promoter. The effects of okadaic acid or calyculin on the heat-induced(42℃) expression of p432-CAT were determined. Okadaic acid or calyculin A potentiated the heat-induced expression of p432-CAT in dose-dependent manner. In addition, stimulation or inhibition of p56-CAT expression by forskolin or H-87, respectively suggests functional operation of CRE element in MDRI promoter. It is suggested that the regulation of MDRI promoter activity is very similar to that of hap70 promoter.
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