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      • Vibrio vulnificus cytolysin의 폐혈관투과성에 미치는 영향

        김형수 ( Hyung Soo Kim ),고영종 ( Young Jong Koh ),조정림 ( Zheng Lin Zhao ) 전북대학교 의과학연구소 2001 全北醫大論文集 Vol.25 No.2

        본 연구에서 폐내피세포, CPAE 세포의 Transwell system으로 폐혈관투과성에 미치는 cytolysin의 영향을 조사하였다. 1. 혈관투과성 실험 시스템은 CPAE 세포를 Tranwell에서 4일간 배양함으로써 완성되었다. Tranwell의 완성은 CPAE 세포에 trypsin처리 후 혈관투과지표인 albumin flux를 측정하여 control에 비해 trypsin 처리 군에서 의미있게 증가함을 관찰함으로써 확인되었다. 2. Vibrio υulnificus cytolysin은 시간 및 농도에 비례하여 혈관투과성을 증가시켰다. 이상의 결과는 V. υulnificus cytolysin이 폐혈관내피세포에 직접 작용하여 폐혈관투과성을 증가시켜 pulmonary edema을 유도함을 제시하여준다. Vibrio υulnificus cytolysin is a pore forming exotoxin that causes lethality through pulmonary edema. We investigated the effect of V. υulnificus cytolysin on albumin permeability across the pulmonary endothelial monolayer in vitro. CPAE cells, bovine pulmonary artery endothelial cell line were grown on micropore membrane (Transwell), and permeability through pulmonary endothelial monolayer was determined by the clearance of 125I-albmin. V. υulnificus cytolysin produced time- and concentration-dependent increase of albumin flux. V. υulnificus cytolysin may cause pulmonary edema by enhancing the pulmonary vascular permeability.

      • Vibrio vulnificus cytolysin의 호중구에 대한 폐내피세포의 유착성의 증가

        김동윤 ( Dong Youn Kim ),고영종 ( Young Jong Koh ),박진희 ( Jin Ny Park ) 전북대학교 의과학연구소 2001 全北醫大論文集 Vol.25 No.2

        Vibrio υulnificus cytolysin은 pore-forming exotoxin으로서 폐혈관 투과성의 증가와 neutrophi1의 폐장내 침착을 일으켜 치사작용을 보인다고 알려져있다. 폐 내피세포주인 CPAE 세포를 이용하여 neutrophi1에 대한 폐장 내피세포들의 adhesiveness에 cytolysin이 영향을 보이는지 관찰하였다. Cytolysin을 CPAE 세포에 반응시키면 51 kDa monomer cytolysin의 tetramer에 해당하는 210 kDa oligomer로 전환됨이 관찰되었다. Fura-2/AM을 이용하여 CPAE 세포의 [Ca2+]i을 측정함으로서 cytolysin이 CPAE 세포에 작용하여 세포 외부로부터 influx되어 유도되는 [Ca2+]i의 증가가 확인되었다. Cytolysin은 농도에 비례하여 CPAE 세포의 neutrophi1에 대한 hyperadhesiveness을 유도하였으며, 이는 수분 내에 발생하여 90분 이상 지속되었다. 또한 hyperadhesiveness는 cycloheximide의 영향을 받지 않음으로 이 반응은 단백질 합성에 의존하지 않고 CPAE 세포에서 이미 합성된 형태의 세포내 granule로부터 세포막으로 유리되는 P-selectin 또는 ICAM-1같은 adhesion분자들에 의해서 유도됨을 예측 할 수 있었다. 본 논문의 결과는 cytolysin monomer들은 CPAE 세포의 세포막과 결합하여 oligomerization 됨으로써 세포막에 transmembrane pore를 형성하는데 결과적으로 이 pore를 통하여 세포외부로부터 Ca2+의 influx가 야기되어 cytolysin이 CPAE 세포의 neutropil에 대한 hyperadhesiveness를 유도한다는 것을 시사하여준다.

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