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Selective Estrogen Receptor Modulator에 의한 자궁근종의 증식 억제
이민용 ( Min Yong Lee ),조치흠 ( Chi Heum Cho ),권상훈 ( Sang Hoon Kwon ),송대규 ( Dae Kyu Song ),정선욱 ( Sun Wok Chung ),강형옥 ( Hyoung Ok Kang ),윤성도 ( Sung Do Yoon ),차순도 ( Soon Do Cha ) 대한산부인과학회 2004 Obstetrics & Gynecology Science Vol.47 No.6
Selective estrogen receptor Modulator (SERM)은 에스트로겐 수용체와 결합하여, 조직마다 다르게 작용하여 길항이나 대항의 역할을 수행한다. 이러한 SERM 중의 하나인 raloxifene은 여성호르몬 수용체와 nanomolar 친화력을 가지고, 조직에 따라 길항제와 대항제로 작용한다. 즉 뼈와 지질에는 에스트로겐 길항제로 작용하고, 유방과 자궁에는 대항제로 작용한다. Tamoxifen은 다른 종류의 SERM으로 길항제와 대항제의 양면성을 자궁 내막에 작용한다. 그러므로 자궁근종은 에스트로겐 의존성이므로 SERM을 이용하여 사람 자궁근종 세포에 투여함으로써 치료의 가능성을 보고자 이 연구를 계획하였다. 자궁근종과 정상 자궁 근 세포를 일차 배양하여 에스트로겐의 투여 전후의 반응을 보았으며, SERM 투여후의 반응을 MTS 및 생존세포수 계산을 하였고, 세포주기회로 및 세포자멸사를 보기 위해 FACS와 Western-blot을 시행하였다. 일차 배양된 자궁근종와 정상 자궁근 세포에서 에스트로겐과 황체호르몬 수용체의 발현을 확인하고 수용체 양성군과 음성군으로 구별하였다. 에스트로겐 수용체 음성군에서는 에스트로겐을 10^-12에서 10^-6 mol/L까지 용량을 증가하면서 투여하였으나 세포의 증식은 자궁근종 세포나 정상에서는 보이지 않았다. 반대로 에스트로겐 수용체양성군에서는 에스트로겐을 용량의 증가와 투여 일수를 증가하여 세포의 증식이 용량에 비례하여 증가하는 것을 보여주었다. 자궁근종와 정상 자궁근 세포에 에스트로겐을 10^-6 mol/L을 6일간 투여 후 raloxifene을 10^-11에서 10^-7 mol/L까지 용량을 증가하면서 투여하여, 에스트로겐 수용체 음성군에서는 세포 증식의 억제가 거의 없었으나, 양성군에서는 증식의 억제를 관찰하였다. 같은 조건으로 tamoxifen을 10^-11에서 10^-7 mol/L까지 용량을 증가하면서 투여하여, 에스트로겐 수용체 음성군에서는 변화가 없었고, 수용체 양성군에서는 증식의 억제가 관찰되었으나 raloxifene의 증식 억제보다는 적었다. ELT-3 세포주에 tsmoxifen, raloxifene을 투여하여 효과를 비교하여, 두 약제에 모두 세포 증시 억제의 효과를 확인하였다. ELT-3 세포를 FACS를 이용한 세포 주기회로 분석에서 어느 특정한 주기도 증가하는 것을 보이지 않았다. ELT-3 세포를 FACS를 이용한 세포 주기회로 분석에서 어느 특정한 주기도 증가하는 것을 보이지 않았다. 세포 증식의 억제가 세포자멸사와 세포 주기 회로에 관계하는 유전자의 발현을 보았으나, 약제 투여 전이나 후의 발현의 차이가 없었다. 이상의 결과로 보아 SERM은 자궁근종의 세포 증식을 억제하는 역할을 하며, raloxifene의 억제작용이 tamoxifen보다 우수하여 raloxifene이 가임기 여성의 자궁근종의 약물 치료법에 가능성을 보여주었다고 생각한다. 향후 좀더 많은 조사 군을 상대로 다양한 용량에 따른 변화를 조사하여, SERM이 자궁근종에 미치는 기전을 더 확실하게 밝혀, raloxifene이 가임기 여성의 자궁근종 약물치료 개발에 길잡이가 될 것으로 사료된다. Objective : Our purpose was to evaluate potential efficacy of selective estrogen receptor modulators (raloxifene and tamoxifen) to human uterine leiomyoma cells. Methods : The samples were collected from ten hysterectomized specimen. we evaluated the estrogen-responsive growth of human uterine leiomyoma and normal myometrial cells. The potential efficacy of Selective Estrogen Receptor Modulators (SERMs: raloxifene and tamosifen) to human uterins leiomyoma cells were conducted by MTS, cell count assay and Western-blot. Results : Human uterine leiomyoma and normal myometrial cells that expressed estrogen receptor (ER) showed increases the cell number in the presence of estrogen compared with ER negative uterine leiomyoma cells. Raloxifene and tamoxifen inhibited estrogen-stimulated proliferation of ER-containing human uterine leiomyoma and normal myometrial cells. Raloxifene was more effective in inhibiting estrogen-induced increases of cell number compared with tamoxifen. Conclusion : The effect of SERMs on leiomyoma was inhibited the cell proliferation without apoptosis or cell cycle arrest. These data suggest that SERM should be examined as candidate of nonsurgical therapeutic agents for uterine leiomyoma.
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