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Cell-Free Translation and Isolation of Metallotionein mRNA from Rat Liver
김형모,신환철,최명언,Kim, Hyung-Mo,Shin, Whan-Chul,Choi, Myung-Un 생화학분자생물학회 1986 한국생화학회지 Vol.19 No.3
메탈로사이오닌(MT)의 mRNA을 쥐 간으로부터 28배 정제 했으며 그의 단백질 생합성 능력을 번역을 통하여 식별하였다. 세포내의 모든 RNA는 카드뮴을 주사한 쥐의 간으로부터 guanidinium thiocyanate방법으로 추출하였으며, oligo(dT)-cellulose 친화성 크로마토그래 리법을 이용하여 mRNA을 분리하였다. MT-mRNA의 단백질 합성 능력을 검사하기 위하여 토끼의 reticulocyte와 밀배알을 이용하였으며, 각각 단백질 합성에 대한 최적 조건을 조사하였다. MT생합성에 대해 mRNA의 양은 $1\;{\mu}g$까지 비례했으며 마그네슘은 4-5 mM, 그러고 칼륨 농도는 75-85 mM가 가장 적당한 단백질 합성 조건이었다. [$^{35}S$]-메사이오닌으로 치환된 합성 단백질은 전기영동 한 후 과산화수소수로 젤을 녹여 방사능을 측정하는 방법과 형광 투시법에 의해 분석하였다. MT-mRNA는 추출된 모든 mRNA중 reticulocyte로 조사한 경우 약 16%, 밑 배알로 조사한 경우 약 30%로 나타났다. Metallothionein(MT) messenger RNA was purified 28-fold from rat liver and was identified by its ability for the protein biosynthesis in cell-free translation systems. Total cytoplasmic RNA was extracted from the Cd injected rat liver by guanidinium thiocyanate method. The total RNA was further fractionated by oligo(dT)-cellulose affinity chromatography. For cell-free biosynthesis of MT-mRNA, rabbit reticulocyte lysate and wheat germ lysate were tested and established the optimal translational conditions for MT-mRNA. The incorporation of [$^{35}S$]-methionine into MT was a linear function of the amount of poly($A^+$) RNA up to $1\;{\mu}g$. 4-5 mM $Mg^{2+}$ and 75-85 mM $K^+$ were found to be the optimal conditions for the MT biosynthesis. Analysis of labelled product was carried out by SDS-PAGE and the gel was analyzed by $H_2O_2$ gel solubilization and fluorography methods. The activity of MT-mRNA was approximately, 16% and 30%, of the total RNA in the reticulocyte lysate and wheat germ system, respectively.
김형모 경기대학교 사회과학연구소 2016 한국사회연구 Vol.19 No.-
이 연구에서는 지역아동복지센터 모형을 개발하고 그 발전방 안을 모색함으로써, 아동복지전달체계 내에서의 지역사회 아동복 지 통합관리시스템을 구축하는 방향을 제시하고자 하였다. 지역 아동복지센터 모형 개발에서는 아동복지서비스 기능들을 복합적 으로 반영할 수 있는 모형을 구축하고자 하였으며, 지역아동복지 센터 모형의 명칭을 ‘아동복지관(Child Welfare Center)'로 제 안하였다. 지역아동복지센터의 모형에서는 사업목적, 사업대상, 사업지역, 사업흐름도를 제시하고, 서비스 유형으로 기본서비스, 필수서비스 및 선택서비스를 제시하였다. 아울러 지역아동복지센 터 종사자의 인력배치 기준, 자격기준, 인건비 지급 기준을 제시 하고, 지역아동복지센터의 예산, 이용절차, 표준 프로그램 구성(안)을 제시하였다. 이 연구의 결론인 지역아동복지센터 발전방 안으로 아동양육시설과 지역아동복지센터가 함께 설치․운영되고 있는 아동복지시설들을 통합하여 ‘아동복지종합시설’로 발전 하는 방안을 제안하였다. 아울러 지역아동복지센터의 추가 설 치, 지역사회의 청소년에 대한 개입 강화, 가족에 대한 개입 강 화, 지역가정위탁지원센터로서의 역할 등을 제안하였다. The purpose of this study was to develop a model for community child welfare center and to suggest development plan for community child welfare center. In the development of community child welfare center model, we tried to build a model that can reflect the functions of child welfare services and suggested the model of community child welfare center as 'Child Welfare Center'. In the model of community child welfare center, service purpose, service object, service area and service flow chart were presented, and basic service, essential service and optional service were presented as service type. In addition, the staffing standard, qualification standard, and labor payment standard of the community child welfare center were presented, and the budget, the use procedure, and the standard program composition (plan) of the community child welfare center were suggested. As a conclusion of this study, it was proposed to develop 'Child Welfare Comprehensive Facility' by integrating a child welfare facility which is installed and operated together with child care facility and community child welfare center. In addition, it was suggested that the establishment of additional child welfare centers in the community, strengthening intervention for the youth in the community, strengthening family involvement, and acting as a regional family foster care support center.