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Streptomyces sp. SAR01 균주에서의 항진균 관련 단백질 분석
이영근,김재성,조규성,장병일,추철형 한국환경생물학회 2002 환경생물 : 환경생물학회지 Vol.20 No.3
항진균 활성 관련 단백질을 탐색하기 위해 미역류로부터 식물병원성 곰팡이의 생장을 저해하는 SAR01균주를 분리하였고, FAME (fatty acid methyl ester) 분석결과, Streptomyces sp.로 동정되었다. 방사선 조사(^60Co)를 실시한 결과, Botrytis cinerea를 포함한 5종의 식물병원성 곰팡이에 대한 항진균 활성을 소실한 SAR535 균주 외 6종의 돌연변이 균주가 유도되었다. SAR01 야생형 균주와 SAR535 돌연변이 균주의 세포내 단백질의 이차원 전기영동 분석결과, 6종의 단백질이 야생형 균주인 SAR01 균주의 세포내에만 존재하였다. 이들 6종의 단백질 중, 5종은 heat shock protein 70 (HSP70), Fe-containing superoxide dismutase Ⅱ (Fe - SODⅡ), ribo-some recycling factor (RRF), 10 kD chaperonin (GroES) 및 inorganic pyrophosphatase(PPAse)와 각각 75%, 93%, 100%, 96% 및 83%의 유사성을 보였다. 이들 6종의 단백질들은 Streptomyces sp. SAR01 균주의 항진균 활성과 밀접한 관계가 있을 것으로 사료된다. To analyze proteins related to antifungal activity, SAR01 strain was isolated from seaweed and identified as Streptomyces sp. from the result of FAME(fatty acid methyl ester) analysis. The isolated strain had antifungal activities against 7 species of plant pathogenic fungi. Antifungal activity deficient mutant (SAR535) of Streptomyces sp. SAR01 was induced by gamma radiation (^60Co, 5 kGy). By 2 D electrophoresis analysis, 6 protein spots were found in wild strain (SAR01) but these spots disappeared in mutant strain (SAR535). Among them, 5 proteins showed similarities to heat shock protein 70 (HSP70), Fe-containing superoxide dismutase Ⅱ (Fe-SODⅡ), ribosome recycling factor (RRF), 10 kDa chaperonin (GroES) and inorganic pyrophosphatase (PPAse), respectively. It suggested that the above 6 proteins could be closely related to the antifungal activity of Streptomyces sp. SAR01.
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Streptomyces sp. SAR01 균주에서의 항진균 관련 groES의 발현
이영근,김재성,조규성,장병일,추철형 한국미생물학회 2002 미생물학회지 Vol.38 No.3
항진균 활성 관련 단백질을 찾기 위해 미역류로부터 Streptomyces sp. SAR01을 분리하고, FAME (fatty acid methyl ester)분석으로 동정하였다. 감마선(sup $({60}^Co)$)조사를 이용하여 항진균 활성 결핍 돌연변이체(SAR535)를 유도한 후, 이차원전기영동으로 단백질을 분석한 결과 SAR01에만 존재하는 6종의 단백질을 확인할 수 있었다. 이중 10 kDa chaperonin cpn10 (GroES)과 96%의 상동성을 가진 10 kDa의 단백질을 클로닝하였으며, E. coli Ml5에서 과대 발현됨을 확인하였다. 또한 SAR535에 형질전환시킨 결과 SAR01과 유사한 항진균 활성이 나타났다. 이것으로 볼 때 groES는 Streptomyces sp. SAR01의 항진균 활성에 관련된 것으로 사료된다. To analyse proteins and gene related to antifungal activity, SAR01 strain was isolated from a brown seaweed and identified as Streptomyces sp. by FAME(fatty acid methyl ester) analysis. Antifungal activity deficient mutant(SAR535) of Streptomyces sp. SAR01 was induced by gamma radiation$({60}^Co)$. It was found that 6 specific protein spots appeared only in SAR01 by 2-D electrophoresis analysis. Among them, a protein of 10 kDa had homology of 96% with 10 kD chaperonin cpn 10 (GroES) by Basic Local Alignment Search Tool(BLAST, NCBI) analysis. SAR535 transformants into which groES was transferred by electroporation revealed antifungal activity newly similar with SAR01 It suggested that groES be supposed to be related to the antifungal activity of Streptomyces sp. SAR01.
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