항 Pseudomonas tolaasii 및 Psedomonas agarici 항체의 면역측정법을 위한 평가와 그 이용

전낙범,이향범,손동화,유승헌 한국식물병리학회 2003 식물병연구 Vol.9 No.2

항 Pseudomonas tolaasii 및 Pseudomonas agarici 항체의 면역측정법을 위한 평가와 그 이용

전낙범,이향범,손동화,유승헌,Jeon, Nak-Beom,Lee, Hyang-Burm,Shon, Dong-Hwa,Yu, Seung Hun 한국식물병리학회 2003 식물병연구 Vol.9 No.2

느타리버섯에 발생하여 갈색부패병을 일으키는 P. tolaasii 및 P.agarici 를 면역화학적 방법으로 신속하게 검출하기 위한 항체를 생산하였고 면역확산법과 ELISA 로 본 항체의 특이성을 조사하였다. $\alpha$-P tolaasii 항체는 P. tolaasii와 반응하여 선명한 침강선을 형성하지 않아 P. tolaasii 에 대하여만 특이적으로 반응하는 항체임을 알 수 있었다. 한편 $\alpha$-P. agarici 항체는 P.agarici뿐만 아니라 다른 세균에 대해서도 침강선을 형성하지 않는 특징을 나타내었다. 비경합 간접 ELISA의 표준곡선으로부터 P.agarici의 검출에 대하여 최고 발색치의 50% 갑을 나타내는 균의 밀도는 $2{\times}10^4$ cfu/ml로 나타났으며, 검출한계농도는 $2{\times}10^3$ cfu/ml 이었다.${\alpha}$-P. agarici 항체는 P. tolaasii의 특이적인 검출에도 효과를 나타냈다. ${\alpha}$-P. tolaasii, ${\alpha}$-P. agarici 항체를 이용하여 확립한 ELISA법은 직접 균체나 버섯 자실체내 P. tolaasii 와 P. agarici의 신속한 검출을 가능하게 하였고, P. tolaasii 와 P. agarici에 오염된 시료를 간단하게 진단하는데 아주 유용하게 사용될 수 있을 것으로 판단되었다. To produce antibodies against Pseudomonas tolaasii and P. agarici, lyophilized P. tolaasii and P. agarici ($5{\times}10^7$ cfu/ml) and Freund, s adjuvant were immunized into rabbits 4 times. The specificity and sensitivity of the antibodies were evaluated by immunodiffusion test and indirect enzyme-linked immunosorbent assay (id ELISA). The ${\alpha}$-P. tolaasii antibody was very specific only against P. tolaasii, while ${\alpha}$-P. agarici antibody was not specific and showed a high cross reactivity toward P. tolaasii with detection limit concentration of $2{\times}10^3$ cfu/ml. However, the cross reactivities of ${\alpha}$-P. agarici antibody toward the related species including P. reactans were very low. Our results showed that ${\alpha}$-P. tolaasii and ${\alpha}$-P. agarici antibodies against P. tolaasii and P. agarici, respectively, might be useful for rapid and simple detection of the causal agents of bacterial brown and yellow blotches in cultivated oyster mushrooms.

화단국화 시설재배 시 질소와 인산 시비농도가 생육에 미치는 영향

전낙범(Nak-Beom Jeon),김동찬(Dong-Chan Kim),박하승(Ha-Seung Pak),최현구(Hyun-Gu Choi),손국성(Kuk-Seong Son),최종진(Jong-Jin Choi) 한국원예학회 2014 한국원예학회 학술발표요지 Vol.2014 No.5

시설국화에서 아메리카잎굴파리에 대한 피해정도와 굴파리좀벌에 안전한 약제 선발

이영혜,최용석,전낙범,김동찬,유용만 한국응용곤충학회 2013 한국응용곤충학회 학술대회논문집 Vol.2013 No.04

시설국화에 아메리카잎굴파리 성충 접종마리수를 달리하여 국화의 피해엽율 과 피해굴수, 피해초장율을 조사하였고 국화에 등록된 약제를 대하여 굴파리좀벌 에 안전한 약제를 선발하였다. 국화에 아메리카잎굴파리 4, 10, 20, 30마리를 접종 하였을 경우 국화에 대한 피해엽률과 피해굴수는 아메리카잎굴파리의 밀도가 높 을수록 피해수준이 높았다. 피해엽률은 12.5%, 13.7%, 21.2%, 25.4%였으며 피해 굴수는 8.8%, 12.8%, 17.4%, 19%였다. 또한 전체 초장에서 피해엽이 보이는 높이 까지의 피해초장율은 36.2%, 38.1%, 42.9%, 43.8% 였다. 아메리카잎굴파리의 접 종밀도에 따른 생육 특성은 접종밀도별로 유의한 차이는 없었다. 굴파리좀벌에 대한 저독성 약제로 살균제에서는 디비이디시유제, 크레속심메 틸액상수화제, 트리플루미졸수화제, 테트라코나졸유탁제, 비티타놀․프로피네브 수화제, 아족시스트로빈수화제, 테부코나졸수화제, 플루퀸코나졸수화제가 영향 이 없는 것으로 나타났다. 또한 살충제에서는 이미다클로프리드수화제, 아세타미 프리드액제, 티아클로프리드액상수화제, 아크리나트린수화제는 약간 영향이 있 는 것으로 나타났으며 살비제에서는 비페나제이트액상수화제, 아세퀴노실액상수 화제, 에톡사졸액상수화제는 굴파리좀벌 성충에는 영향이 없는 것으로 나타났다. 생장조정제인 에테폰액제와 전착제인 카바액제에서도 굴파리좀벌의 치사율이 낮 아서 영향이 없는 것으로 나타났다.

자주색 홑꽃화형 스프레이국화 ‘예스루비’ 육성

최현구,박하승,손국성,김동찬,전낙범,최종진 한국육종학회 2014 한국육종학회 심포지엄 Vol.2014 No.07

스프레이국화 ‘예스루비(Yes Ruby)’는 2010년 10월 충남농업기술원 예산국화시험장에서 고온기 화색발현이 우 수하고 고생장성인 스프레이국화 신품종 개발을 위해 연분홍색 홑꽃화형의 ‘보라미(Borami)’품종을 모본으로 하 고 자주색 홑꽃화형의 ‘예스라인(Yes Line)’을 부본으로 인공 교배하여 얻어진 500개의 종자를 2011년에 파종하였 고, 이중에서 성장 세력이 빠르고 화색이 선명한 320번째 개체를 선발하여 ‘SP11-148-01’으로 계통명을 부여하였 다. 이 품종의 주년재배 특성검정을 위하여 2011년부터 2012년까지 1, 2차 생육특성 검정을 수행하였고, 2013년 안 정성, 균일성 등 3차 특성검정 및 기호도 평가를 수행한 결과 기호도가 4.21/5.0(n=90)로 높아 ‘예산SP-44호’로 명명 하였다. 2013년 농촌진흥청 농작물 직무육성 신품종선정위원회 심의를 거쳐 ‘예스루비(Yes Ruby)’로 명명하고 품 종등록 출원을 하였다. ‘예스루비(Yes Ruby)’의 생육 및 개화특성은 구미시설공단 수출품종인 ‘킹피셔(Kingfisher)’ 를 대조품종으로 하여 조사하였다. ‘예스루비(Yes Ruby)’는 자주색(RP71A)의 화심이 녹색인 고생장형 절화용 스 프레이국 품종이다. 착화수는 20.0개/본으로 대조품종 19.5개와 비슷하였으나 꽃직경이 6.2cm이고 설상화의 꽃잎 수는 25.7매로 대조품종의 5.0cm에 23.3매와 비교하여 화형이 크고 꽃잎수가 많아 볼륨감이 우수하였으며, 절화장 이 94.9cm로 대조품종의 89.2cm보다 커 초세 및 줄기가 강건하였다. ‘예스루비(Yes Ruby)’는 자연개화기가 10월 24일로 대조품종보다 평균 5일 빠른 경향을 보였고 개화반응주수는 7.0주로 빠른 편이며 주년재배가 가능하였다. 재배상 유의사항은 동계 재배시 균일한 개화 및 개화지연 방지를 위하여 적정온도를 유지해 주어야 한다.

황색 홑꽃화형 스프레이국화 ‘예스미키’ 육성

최현구,박하승,이철휘,김동찬,전낙범,이영혜,원미경,최병준,최종진 한국육종학회 2013 한국육종학회 심포지엄 Vol.2013 No.07

스프레이국화 ‘예스미키(Yes Mickey)’는 2008년 예산국화시험장 육종온실내에서 네덜란드에서 육성된 홑꽃화형의 ‘포워드(Forward)’를 방임수분하여 얻어진 280개의 종자를 2009년에 파종하였고, 이중에서 다화성으로 화색이 선명하고 녹색의 짙은 화심을 갖고 있는 ‘SP09-182-03’계통을 선발하였다. 이 품종의 주년재배 특성검정을 위하여 2009년부터 2011년까지 1・2차 생육특성 검정을 수행하였고, 2012년 3차 특성검정 및 기호도 평가를 수행한 결과 기호도가 4.08/5.0로 높아 ‘예산SP-40호’로 명명하였으며 2012년 직무육성 신품종선정위원회를 통과하여 ‘예스미키(Yes Mickey)’로 명명하고 품종등록 출원하였다. ‘예스미키(Yes Mickey)’의 생육 및 개화특성은 모본으로 사용된 황색의 ‘포워드(Forward)’를 대조품종으로 하여 조사하였다. ‘예스미키’는 황색(7A)의 화심이 진한녹색인 조기개화성 절화용 스프레이국 품종이다. 본당 착화수는 23.7개로 대조품종 17.2개보다 월등히 많았으며 꽃직경이 3.6cm이고 꽃잎수는 31.0매로 대조품종의 2.7cm에 43.0매와 비교하여 볼륨이 크고 녹심이 뚜렷한 산티니계열의 수출용 꽃다발로 적합하였다. 개화소요일수는 자연재배에서 45일로 대조품종보다 5일 빠른 경향을 보였다. 재배상 유의사항은 개화반응기간이 짧아 영양생장기에 비배관리를 철저히 하고 다화성으로 적정 재식거리를 준수하여야 한다.

토마토 여름 육묘시 어린묘 정식과 육묘방법이 생육 및 수량에 미치는 영향

이희경,이문행,박권서,이은모,전낙범,서상덕,조평화,김영식,김성은,조숙경 한국유기농업학회 2015 韓國有機農業學會誌 Vol.23 No.1

Effect of seedling type and early transplanting of summer grown seedling on the growth and yield of tomato was investigated to minimize problems caused by legginess of seedling in summer. Grafted seedling, 20 days seedling (young seedling), 40 days seedling, and rooted cutting were raised from July 20 to Sept. 7 and young seedling was transplanted 20 days earlier than other seedling types. Young seedling growth was weaker than other seedling types and fresh weight was only 1/10 of 40 days seedling. Growth of young seedling at 20 days after transplanting was better than other seedling types and fresh weight was 3 times higher than 40 days seedling. Creased stem did not appear and trusses developed faster in young seedling. Total yield and commercial yield were highest in young seedling as 8,535 kg/10a, and 7,575 kg/10a. There is no significant difference among seedling types in fruit quality. This result shows that early transplanting of summer grown seedling is more effective to attain stable growth and yield in tomato.

백색 홑꽃형 스프레이국화 ‘예스미미’ 육성

최현구,박하승,이철휘,김동찬,이영혜,전낙범,최병준,원미경,조만현 한국육종학회 2012 한국육종학회 심포지엄 Vol.2012 No.07

스프레이 국화 ‘예스미미(Yes Mimi)’는 충남농업기술원 예산국화시험장에서 네덜란드에서 육성된 홑꽃 화형의 ’포워드(Forward)’를 방임수분하여 얻어진 280개의 종자를 2009년에 파종하였고, 이중에서 다화성이면서 화색이 맑고 선명한 ‘SP09-182-08’계통을 선발하였다. 이 계통의 주년재배 특성검정을 위하여 2009년부터 2010년 까지 1·2차 생육특성검정을 수행하였고, 2011년 3차 특성검정 및 기호도 평가를 수행한 결과 기호도가 3.95/5.0로 높아 ‘예산SP-38호’로 명명하였으며 2011년 직무육성신품종 선정위원회를 통과하여 ‘예스미미(Yes Mimi)’로 명명하고 품종등록 출원하였다. ‘예스미미(Yes Mimi)’의 생육 및 개화특성은 백색의 로이드(Lloyd’s)’를 대조품종으로 하여 조사하였다. ‘예스미미(Yes Mimi)’는 백색(GW, 157C)의 다화성인 절화용 스프레이국 품종이다. 개화소요일수는 46일로 대조품종보다 5일 빠르며 설상화수는 25.3개로 대조품종보다 24개 적었다. 꽃직경이 2.4cm로 작았고 줄기당 두상화의 총수는 28.2개로 대조품종보다 7개가 많아 산티니계열의 꽃다발용으로 적합하였다. 재배상 유의사항은 절화장이 작은 편이므로 초기생육 증진을 위한 비배관리를 철저히 하여야 한다.

느타리버섯 세균성갈빈병균 Pseudomonas tolaasii의 효소면역검출법

이향범,전낙범,손동화,유승헌 충남대학교 생물공학연구소 1999 생물공학연구지 Vol.7 No.-

느타리버섯의 세균성갈반병균인 P. talaasii(PT)를 신속 간편하게 검출할 수 있는 효소면역측정법(ELISA)을 개발하였다. 특이항체를 생산하기 위하여 PT(5×10 exp (7) cfu)를 Freund's adjuvant와 함께 토끼에 수차례 면역하였으며, 가장 높은 역가를 나타낸 항혈청을 이용하여 비경합 ELISA 및 경합 ELISA를 각각 확립하였다. 표준곡선으로부터 PT의 그 검출한계는 각각 2×10 exp (2) cfu/ml 및 3×10 exp (2) cfu/ml가량으로 나타났다. 교차반응은 비경합 ELISA의 경우 P. agarici, P. reactans 및 비병원성 Pseudomonas속 균주와 1/10^3이하의 매우 미약한 반응을 보였으나 P. salanacearum, Erwinia chrysanthemi, Streptococcus mutans, Xanthomonas citri 및 곰팡이인 Fusarium oxysporum 등 다른 균주와의 반응성이 거의 없었으며, 경합 ELISA의 경우 PT이외에는 같은 속 균주에 대하여도 반응성이 거의 없었다. ELISA를 이용하여 버섯으로부터 분리된 18균주에 대하여 PT의 여부를 조사하였을 때 병원성과 white line 반응성을 동시에 나타내었던 11균주에 대하여만 명확한 양성으로 나타나, 본 연구에서 확립한 ELISA는 간편하고 정확한 PT검출법임이 확인되었다. For simple and rapid detection of Pseudomonas tolaasii (PT), a bacterial brown blotch pathogen of oyster mushroom, enzyme-linked immunosorbent assays (ELISA) were developed. To produce specific antibody, PT (5 × 10 exp (7) cfu) and Freund's adjuvant were subcutaneously immunized into rabbits several times. By using the antiserum showing the highest titer, we established noncompetitive and competitive ELISA's. Standard curves of the ELISA's showed that the detection limits were 2 × 10 exp (2) cfu/ml and 3 × 10 exp (2) cfu/ml, respectively. When investigated by noncompetitive ELISA, cross reactivities of the anti-PT antibodies against P. agarici, P. reactans, and other fluorescent Pseudomonas spp. were very low (<1/10^3), but those against P. solanacearum, Erwinia chrysanthemi, Streptococcus mutans, Xanthomonas citri, and a fungus Fusarium oxysporum were almost none. However, when investigated by competitive ELISA, the reactivities against any other strains except PT were almost none. When the ELISA's were applied to 18 strains derived from mushrooms in order to identify PT, only 11 strains showing both pathogenicity and white line reactivity were obviously positive. These results showed that the ELISA's could be convenient tools to detect PT in accordance with existing methods.

몇가지 항생제의 느타리버섯 Pseudomonas tolaasii에 의한 세균성갈색무늬병 방제 효과

서건식,전낙범,김병련,유승헌,Seo, Geon-Sik,Jeon, Nak-Beom,Kim, Byung-Ryun,Yu, Seung-Hun 한국버섯학회 2003 한국버섯학회지 Vol.1 No.1

느타리버섯 세균성갈색무늬병 방제 약제를 선발하기 위하여 33종의 항생제를 공시하여 P. tolaasii에 대한 항균활성을 조사하고 선발된 4종의 항생제를 이용하여 방제효과를 검정한 결과는 다음과 같다. Kanamycin등 19개의 항생제가 병원균 P. tolaasii에 대하여 항균활성을 나타내었으며, 그 중에서 tetracycline, streptomycin, kanamycin과 kasugamycin이 강한 항균활성을 나타내었다. Tetracycline과 kanamycin은 10ppm에서도 세균생장을 완전히 억제시켰고 Kasugamycin은 100ppm, streptomycin은 200ppm 이상의 농도에서 병원세균에 항균활성을 보였다. Tetracycline, kanamycin, kasugamycin, streptomycin을 이병균상에 처리한 결과 각각 72.9, 71.2, 68.1 그리고 62.7%의 방제가를 보였다. tetracycline 처리구의 느타리버섯 생산량은 무처리구보다 31.8% 이상의 증수효과를 보였다. 항생제 처리가 느타리버섯 균사생장에 미치는 영향을 조사한 결과 kanamycin을 처리한 배지에서는 항생제 처리의 영향을 전혀 받지 않았으며 오히려 균사생장을 촉진하는 것으로 밝혀졌다. Streptomycin을 처리한 배지에서는 항생제 무처리 배지에서와 동등한 수준의 균사생장을 보였다. Tetracyclin의 경우는 무처리에 비해 약 10에서 20%의 균사 생장 억제를 보였으나 Kasugamycin 100ppm 이상의 농도에서는 약 40%의 균사생장 억제를 보였다. Antibacterial activities of 33 antibiotics against Pseudomonas tolaasii causing the brown blotch disease on the edible mushroom Pleurotus ostreatus, were tested in vitro for the control of the disease. Tetracyclin, kanamycin, kasugamycin, and streptomycin showed strong antibacterial activity against P. tolaasii, having the minimal inhibitory concentration of 10, 10, 100 and 200ppm, respectively. These antibiotics showed similar control value of 72.9, 71.2, 68.1 and 62.7%, respectively when applied on the artificially infected mushroom beds. Mushroom yields in the tetracycline treated boxes were increased about 31.8% comparing to the control ones. Mycelial growth of P. ostreatus on the PDA supplemented with streptomycin and kanamycin were not affected, but were inhibited 10~20% and 40% with tetracyclin and kasugamycin treatment, respectively.