A Study on inhibition of nicotinic receptors by dryobalanops aromatica : 용뇌추출물이 니코틴성 아세틸콜린 수용체의 활성억제에 관한 연구

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

Effect of the water extract from a medicinal plant Dryobalanops aromatica (Dipterocarpaceae) on catecholamine secretion was investigated in bovine adrenal chromaffin cells. The water extract inhibited [³H]norepinephrine ([³H)NE) secretion induced by a nicotinic acetylcholine receptor (nAChR) agonist DMPP with a half maximal inhibitory concentration (IC_(50)) of ∼6 ㎍/ml. The rises in cytosolic calcium ([Ca^(2+)]_i) and sodium [Na^+]_i) induced by DMPP were also inhibited by the extract. However, the binding of [³H]nicotine to nAChRs was not influenced by the addition of the extract in receptor binding competition analysis, suggesting that the extract and nicotine do not share the binding site in nAChR. On the other hand, [Ca^(2+)]_i increases induced by high K^+, ionomycin, bradykinin, angiotensin II, and thapsigargin were not affected by the extract. The data suggest that the extract from D. aromatica specifically inhibits catecholamine secretion by blocking nAChR in a noncompetitive manner.

국문 초록 (Abstract)

약용식물인 용뇌향수 (Dryobalanops aromatica)의 추출물인 용뇌 (龍腦)가 카데콜아민 분비에 어떠한 영향을 미치는 지를 소의 부신수질세포를 이용하여 연구하였다. 용뇌는 니코틴성 아세틸콜린 수용체를 활성화시키는 약물인 DMPP를 처리했을 때 나타나는 [³H]노르에피네프린 분비를 농도의존적으로 저해하였으며, 약 6 ㎍/ml 농도에서 50% 저해효과를 나타냈다. DMPP를 처리했을 때 나타나는 세포내 칼슘농도의 증가와 소디움농도의 증가가 다같이 용뇌에 의해서 비슷한 양상으로 저해를 받는 것으로 보아 니코틴성 아세틸콜린 수용체가 직접적으로 용뇌에 의해서 저해됨을 알 수 있었다. 하지만 수용체 결합경쟁 실험결과 [³H]니코틴이 니코틴성 아세틸콜린 수용체에 결합하는 것은 용뇌에 의해서 영향을 받지 않는 것으로 나타나, 용뇌와 니코틴의 수용체 결합부위는 서로 다른 것으로 추측된다. 한편 용뇌는 전압의존성 칼슘채널을 활성화시키는 고농도의 K^+이나 Ca^(2+) ionophore를 형성하는 ionomycin, phospholipase C와 연결된 수용체를 활성화시키는 펩타이드 호르몬인 bradykinin이나 angiotensin II, 그리고 calcium release-activated calcium channels을 활성화시킨다고 알려져 있는 Ca^(2+)-ATPase 저해제인 thapsigargin을 처리했을 때 나타나는 세포내 칼슘증가 등에 아무런 영향을 미치치 않았다. 이리한 실험결과를 종합하여 볼 때, 용뇌는 특이적으로 니코틴성 아세틸콜린 수용체를 저해함으로써 카테콜아민 분비를 억제함을 알 수 있다.

목차 (Table of Contents)

• ABSTRACT = 2
• MATERIALS and METHODS = 5
• MATERIALS = 5
• Preparation of plant extract = 5
• Chromaffin cell preparation = 5
• Measurement of [³H]norepinephrine([³H)NE) secretion = 6
• [Ca^(2+)]_i measurement = 8
• [Na^+]_i measurement = 8
• [³H]Nicotine binding analysis = 10
• RESULTS = 11
• Inhibitory effect of Dryobalanops aromatica on [³H]NE secretion = 12
• Inhibitory effects of D. aromatica on [Ca^(2+)]_i rise = 12
• Inhibitory effect of D. aromatica on [Na^+]_i rise = 12
• Time course of the D. aromatica effects = 13
• Effect of D. aromatica on [³H]nicotine binding = 14
• Specific action of D. aromatica = 14
• DISCUSSION = 16
• Acknowledgments = 17
• REFERENCES = 19
• FIGURE LEGENDS = 21
• Fig. 1. = 21
• Fig. 2. = 21
• Fig. 3. = 21
• Fig. 4. = 22
• Fig. 5. = 22
• Fig. 6. = 23
• Fig. 7. = 24
• Korean Abstract = 32