GC-MS 법을 이용한 Leuconostoc mesenteroides 내의 아미노산 프로파일 분석 연구 = Amino Acid Profiling Analysis in Leuconostoc mesenteroides by GC-MS

국문 초록 (Abstract)

기체크로마토그래피-질량분석법의 선택적인 이온 모드를 이용하여 N-Ethoxycarbonyl/tert-butyldimethylsilyl(EOC/TBDMS) 유도체로써 Leuconostoc mesenteroides 균주에서의 단백질성과 비단백질성 아미노산의 동시 프로파일 분석을 위한 효율적인 방법이 개발 되었다.
본 연구에서는 29 종의 아미노산에 대하여 염기성 수용액 (pH12) 상태에서 아미노기와 티올기를 메틸렌클로라이드층에 들어있는 ethyl chloroformate와 반응시켜 EOC 유도체화 한 다음, 10% 황산으로 pH를 산성으로 조절한 후, diethyl ether와 ethyl acetate를 이용하여 추출하고, 질소 기류 하에서 완전히 건조시켰다. 그리고 남아 있는 활성 수소를 직접 기체크로마토그래프-질량분석기로 분석하기 위해 TBDMS 유도체화 하였다.
최적의 조건에서, 분석법에 대한 타당성 검증결과 0.02-5.0 g/L 범위에서 r=0.999 이상으로 좋은 직선성을 나타냈고, 정밀도 (% RSD)는 14.2 이하였고, 정확도 (% RE)는 -13.9~11.1로 나타났다. 최종적으로 본 아미노산 프로파일링 분석법을 Leuconostoc mesenteroides의 균주와 배지에 적용해 본 결과, 총 19 종의 단백질성 아미노산과 10 종의 비 단백질성 아미노산이 검출 되었다. 그러므로, 본 연구에서 개발된 분석 방법은 다양한 미생물 균주와 배지에서 아미노산의 프로파일 분석에 유용하게 사용될 것으로 사료된다.

목차 (Table of Contents)

• 차례
• 제 1장 서론 7
• 제 2실험재료 및 방법 9
• 2.1 실험 재료 및 기기 9
• 2.1.1 표준품 및 시약 9
• 2.1.2 아미노산류의 표준 용액 조제 13
• 2.1.3 분석 기기 14
• 2.2 실험방법 16
• 2.2.1 아미노산의 동시프로파일 분석을 위한 유도체화 반응 및 시료 전 처리 16
• 2.2.2 아미노산의 프로파일 분석법에 대한 타당성 검증 19
• 2.2.3 Leuconostoc mesenteroides 균주에서 아미노산 분석을 위한 시료 전처리 21
• 2.2.4 Leuconostoc mesenteroides 배지에서 아미노산 분석을 위한 시료 전처리 23
• 제 3장 실험결과 및 고찰 25
• 3.1 아미노산 표준품에 대한 프로파일 분석법 개발 및 분석법의 타당성 검증 25
• 3.2 Leuconostoc mesenteroides 균주와 배지에서의 아미노산 프로파일 분석 32
• 제 4장 결론 36
• 제 5장 참고문헌 37
• ABSTRACT 40