동위원소희석 액체크로마토그래피 질량분석법을 이용한 유아 분유 중 엽산 분석에 대한 연구 = Determination of folic acid in infant formula using isotope dilution liquid chromatography/mass spectrometry

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

An isotope dilution-liquid chromatography/mass spectrometric method was developed as a candidate reference method for the accurate determination of folic acid in infant milk formula. Sample was spiked with 13C5-folic acid and then extracted with phosphate buffer (pH 6) solution. The extract was further cleaned up with deproteinization followed by a C18 solid-phase extraction cartridge. The extract was analyzed by using LC/ESI/MS on positive ion mode with selectively monitoring [M+H]+ions of the analyte and its isotope analogue at m/z 442 and m/z 447, respectively, and was also analyzed by using LC/ESI/MS/MS with selectively monitoring the collisionally induced dissociation channels of m/z 442 -> m/z 295 and m/z 447 ->295. The LC/MS/MS chromatogram showed substantially reduced background chemical noise compared to the LC/MS chromatogram. An repeatability and reproducibility study showed that the LC/MS/MS method is a reliable and reproducible method providing less than 1.5 relative percentage of method precision while the LC/MS results can be interfered by chemical interferences.

국문 초록 (Abstract)

엽산은 세포 대사의 정상적인 진행을 위해 반드시 필요한 영양소이다. 신생아가 먹는 유아식이나 분유에도 엽산이 필수적으로 포함되어 있는데, 한 번 제조되면 그대로 신생아에게 공급되기 때문에 이러한 영양소들의 함량을 인증된 분석법으로 분석해서 검증하는 것이 필요하다. 따라서 본 연구에서는 분유 중의 엽산의 LC/MS 및 LC/MS/MS 분석을 위한 적절한 전처리법을 확립하고 이를 바탕으로 동위원소희석 질량분석법을 적용하여 식품 중 엽산 분석의 기준 분석법으로 활용되도록 하고자 한다.NIST가 보급하는 분유 인증 표준물(NIST SRM 1846)과 시중에 판매되고 있는 유아분유를 대상으로 엽산을 분석하였고, 내부 표준물질로 13C5-folic acid을 사용하였다. 인산칼륨 용액(pH 6)으로 추출한 후, C18 고체상 카트리지를 이용한 전처리법을 확립하였다. 추출물은 m/z 442 -> 295와 m/z 447 ->295인 충돌유도분해 채널을 선택적으로 모니터링 하게 되는 LC/ESI/MS/MS로 분석되었다. LC/MS/MS법의 크로마토그램은 LC/MS법의 크로마토그램보다 바탕선의 noise의 영향이 현저히 줄어드는 것을 보여주었고 1.5 %의 상대 표준 불확도를 나타내었다.