전립선암에서의 안드로겐 수용체 활성 조절에 대한 SIRT1과 SAP10의 상반된 역할 연구

국문 초록 (Abstract)

전립선암(prostate cancer, PC)은 매년 발생률과 사망률이 10위 안에 드는 암이며 이를 치료하는 방법 중에는 주된 신호 전달에 관여하는 호르몬을 억제하는 호르몬 결핍 치료법이 있다. 하지만 이 치료법은 수술 직후에는 전립선암 세포가 감소하여 치료 효과가 보이지만 시간이 지남에 따라 전립선암 세포들의 세포 사멸이 멈추고 거세 저항성 전립선암(castration resistant prostate cancer, CRPC)으로 변환된다. 변환된 CRPC는 호르몬 치료에 효과가 없으며 신호 체게 또한 호르몬 중심이 아닌 호르몬 수용체인 안드로겐 수용체(androgen receptor, AR) 중심으로 작동된다. 이에 따라 CRPC의 치료제 개발을 위해 AR의 활성을 조절하는 단백질 및 기작을 중심으로 하는 연구가 진행되고 있다.
SIRT1은 NAD+ 의존적인 탈아세틸화효소로 AR과 결합하여 탈아세틸화시켜 활성을 억제하고 AR과 보조 활성자 간의 결합을 억제하여 전립선암의 성장을 저해하는 것으로 최근 밝혀졌다.
본 논문에서는 SIRT1과 결합하는 신규 단백질로 SAP10을 발굴하였다. SAP10은 전사 활성을 촉진하는 증폭자로서 작용하는 단백질로 종양 유전자의 발현에도 관여하여 암의 발병과 진행을 촉진하는 역할을 한다. 이로 인해 SAP10을 억제하는 약물을 이용한 암 치료제 개발에 대한 연구 및 임상 시험이 활발하게 진행되고 있어 최근 관련 연구들이 주목받고 있다.
본 논문에서는 전립선암과 CRPC에서 AR의 전사 활성이 SAP10에 의해 증가하며, SAP10에 의해 증가된 AR의 전사 활성이 SIRT1에 의해 억제되는 결과를 확인하였다. 반대로 전립선암 세포주에서 SAP10의 발현을 감소시켰을 때 AR의 표적 유전자들의 발현이 감소하는 것을 확인하였다. SIRT1 활성제와 SAP10 억제제를 병용했을 때 전립선암세포의 성장이 더 감소하는 결과를 확인하였다. 따라서, 현재 암 치료제로 개발 중인 SAP10 억제제를 본 연구에서 병용 효능을 입증한 SIRT1 활성제와 같이 활용한다면 AR의 전사 활성이 더욱 효과적으로 억제되는 새로운 전립선암 치료법의 개발에 기여할 수 있을 것으로 기대한다.

목차 (Table of Contents)

• 국문 초록··························································· i
• 감사의 글··························································· iii
• 목 차··························································· iv
• 그림 목차··························································· v
• Ⅰ. 서 론···························································· 1
• Ⅱ. 실험 재료 및 방법················································ 3
• 1. Plasmid DNA cloning
• 2. Cell culture
• 3. Transfection and infection
• 4. Cell viability assay (MTT assay)
• 5. Colony formation assay
• 6. Flow cytometric assay (FACS)
• 7. Luciferase reporter assay
• 8. Western blotting (WB)
• 9. Immunofluorescence assay (Co-localization assay)
• 10. Real-time quantitative reverse transcription Polymerase chain reaction (qRT-PCR)
• Ⅲ. 결 과···························································· 9
• 1. SIRT1과 SAP10의 결합
• 2. SIRT1과 SAP10에 의한 AR의 전사 조절
• 3. SIRT1 활성제와 SAP10 억제제가 AR의 전사 활성에 미치는 영향
• 4. SIRT1 활성제와 SAP10 억제제에 의한 전립선암 세포 성장 억제
• 5. SIRT1 활성제와 SAP10 억제제에 의한 전립선암 세포 주기 진행 억제 및 세포 사멸 증가
• 6. SAP10의 유전적 억제에 의한 AR 표적 유전자의 발현 감소
• Ⅳ. 그 림··························································· 13
• V. 논 의···························································· 30
• Ⅵ. 참고 문헌······················································· 32
• Ⅶ. 영문 초록······················································· 37