Linker peptide가 cell penetrating peptide(CPP)-FKBP12 융합단백질의 세포침투 활성에 미치는 영향에 관한 연구 = The Effect of Linker Peptides on Cell Transduction Activities of the Cell Penetrating Peptide (CPP)-FKBP12 Fusion Proteins

국문 초록 (Abstract)

세포 침투성 펩타이드(Cell-penetrating peptide, CPP)는 단백질을 포함한 다양한 생체 고분자 물
질을 세포내로 운반 할 수 있는 것으로 알려져 있다. CPP로 알려진 PEP-1은 여러 단백질을 여러
세포주와 조직에 효율적으로 전달할 수 있다. 실제로 PEP-1-FKBP12 융합 단백질은 세포주에 성
공적으로 전달되어 항염증 활성을 나타내었다. 이는 PEP-1-FKBP12가 염증성 질환 치료에 유용
할 수 있음을 시사한다. 치료제를 개발하려는 노력으로 FKBP12를 기반으로 하여 PEP-1-FKBP12
융합 단백질의 형질 도입 효율을 향상 시키려고 노력하였다. 이를 위해 우리는 PEP-1과 FKBP12
단백질 사이에 여러 가지 linker 펩타이드를 삽입했는데, 그 이유는 linker가 안정한 생체 활성을
보이는 재조합 융합 단백질의 생성에 중요성을 보여 주었기 때문이다. 놀랍게도, 어떤 linker 펩
타이드가 사용되는지에 따라 PEP-1-FKBP12의 형질 전환 활성의 현저한 변화가 관찰되었다. 또
한, N- 말단과 C- 말단에서 융합된 Oct4와 FKBP12 단백질의 형질 전환 활성에 대한 linker 펩타
이드의 영향을 시험 하였다. 이는 FKBP12의 말단에 존재하는 다양한 CPP와 최적의 linker에 대
한 조합은 모두 다른 것으로 나타났다. 이러한 결과는 cargo 단백질의 최적의 형질 도입을 위한
적절한 CPP뿐만 아니라 적절한 linker 펩타이드를 선택하는 것이 중요 할 수 있음을 시사한다.

목차 (Table of Contents)

• ABSTRACT KOREAN 1
• I. Introduction 2
• II. Materials and Methods 9
• 1. Cell culture 9
• 2. Construction of plasmid&DNA purification&Ligation 9
• 3. Transformation&Microorgaganism inoculation 10
• 4. Protein expression test&Purification 11
• 5. Endotoxin Removal&Desalting 12
• 6. Bradford assay 12
• 7. Transduction&SDS-PAGE 12
• 8. Transfer&Western Blot 13
• III. Results 14
• IV. Discussion 30
• V. References 32
• ABSTRACT 35