영양아층세포에서 혈관내피성장인자 발현에 미치는 사이토카인들의 영향 = (The) effect of cytokines on the expression of vascular endothelial growth factor in trophoblast

국문 초록 (Abstract)

혈관내피성장인자(vascular endothelial growth factor, VEGF)는 강력한 맥관형성인자로서 임신초기의 태반형성 및 착상과 태아발육에 중요한 역할을 한다. VEGF의 발현은 저산소증, 저혈당에 의해 항진되며 이외에 fibroblast growth factor, platelet derived growth factor 및 interleukin(IL)-6등에 의해서도 증가한다. 임신초기의 태아-모체간 계면에서 적절하게 혈관이 형성되려면 VEGF 발현이 정상적으로 조절되어야 한다. 그러나 태아-모체간 계면의 혈관형성에 중요한 영양아층세포에서 VEGF 발현이 어떻게 조절될 것인가에 관한 연구는 매우 미미한 실정이다. 본 연구에서는 사람의 임신 1기의 태반으로부터 얻은 영양아층세포를 대상으로 하여 사이토카인들이 VEGF발현과 분비에 미치는 영향을 각각 역전사중합효소연쇄반응과 ELISA 방법을 이용하여 알아보았다.
사람의 영양아층세포는 일정한 양의 VEGF를 발현 및 분비하고 있었으며 VEGF isoform 중에서 VEGF121, VEGF165 isoform을 주로 발현하고 있었다. 영양아층세포에 IL-1β, interferon-γ(IFN-γ) 및 tumor necrosis factor-α(TNF-α)를 처리한 군에서 VEGF 발현 및 분비가 증가되었으며 특히 IFN- γ를 처리한 경우는 VEGF분비가 현저히 증가되었다. 그러나 IL-2와 IL-10을 처리한 경우는 VEGF 발현과 분비에 별다른 영향이 없었다.
이상의 결과로 IL-1β, IFN-γ, TNF-α는 사람의 영양아층세포에서 VEGF 생성과 분비를 증가시키는 인자로 생각되며 이는 VEGF 유전자 전사를 활성화한 결과라 생각된다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

Embryo implantation and development are critically dependent upon the regulation of angiogenesis and localized vascular permeability. These local angiogenesis and vascular permeability are regulated by the interaction between fetal trophoblast, uterine decidua, and endothelial cells. Vascular endothelial growth factor(VEGF) may be a key mediator of these effects. VEGF has been shown to promote endothelial vascular permeability, fetal vasculogenesis and placental, fetal and maternal angiogenesis. However, the mechanism through which this regulation occurs in the placenta is poorly understood. In this study, we investigated the effects of various cytokines on VEGF expression in human fetal trophoblast.
The level of VEGF secreted by trophoblast cell line was determined using enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA). The trophoblast cells expressed VEGF constitutively and the main isoforms were VEGF121 and VEGF165. When cultured in the presence of IL-1β, IFN-γ or TNF-α, there was significant increase of the level of VEGF. VEGF secretion was most significantly increased by IFN-γ treatment but not affected by IL-2, IL-10 treatment. The level of intracellular VEGF was also increased by IFN-γ, IL-1β, TNF-α treatment. Additionally the trophoblast cells showed an increase in VEGF mRNA levels when cultured in the presence of either IL-1β, IFN-γ, TNF-α. These results suggest that IL-1β, IFN-γ, TNF-α may regulate the production of VEGF in early gestational trophoblasts.

목차 (Table of Contents)

• 목차
• 국문요약 = 1
• I. 서론 = 2
• II. 재료 및 방법 = 5
• 1. 임신 첫 3개월기 영양아층세포의 배양 = 5
• 2. 영양아층세포에 사이토카인 처치 = 5
• 3. 영양아층세포로부터 RNA의 분리와 cDNA합성 = 6
• 4. 중합효소연쇄반응 = 6
• 5. 세포질내 단백분리 = 7
• 6. Enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) = 7
• III. 결과 = 8
• 1. 영양아층세포의 VEGF 분비 = 8
• 2. 영양아층세포내의 VEGF생성 = 10
• 3. 영양아층세포에서 VEGF mRNA 발현 = 11
• IV. 고찰 = 14
• V. 결론 = 18
• 참고문헌 = 19
• 영문요약 = 25