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      • 양배추 은무늬밤나방의 유약호르몬 에폭시드 가수분해효소의 조직특이성

        안기홍 ( Ki Heung Ahn ),오세원 ( Se Won Oh ),이경로 ( Kyung Ro Lee ) 건국대학교 기초과학연구소 1999 理學論集 Vol.24 No.-

        유약호르몬 에스테라제와 더불어 유약호르몬의 조절에 중요한 역할을 하는 유약호르몬 에폭시드 가수분해효소를 양배추 은무늬밤나방 종령유충에서 조사, 정제하였다. 이들의 효소활성을 측정하기 위하여 유약호르몬 에스테라제와 유약호르몬 에폭시드 가수분해효소가 포함된 시료에서 유약호르몬 Ⅲ의 대사과정을 분획분석법(partition assay)을 이용하여 조사하였다. 유약호르몬 에스테라제의 저해 제는 3-octylthio-1, 1, 1-trifluoro-2-proparlone (OTFP)을 이용하였고, 기질인 유약호르몬 Ⅲ와 함께 배양하여 가수분해되지 않은 유약호르몬은 isooctane 층에, 분해산물인 유약호르몬 acid, diol 그리고 diol-acid 는 물층으로 분획되어 유약호르몬의 대사과정을 측정하였다. 기질의 농도 5×10-4 M에서 조직별 유 약호르몬 에폭시드 가수분해효소의 활성 측정을 위하여 혈림프, 지방체, 중장, 체벽을 분리하였고, 또한 세포 소분획별로는 세포질, 핵, 미토콘드리아, 마이크로솜을 각각 분리하여 비교하였다. 유약호르몬 에폭시드 가수분해효소 활성이 가장 높은 마이크로솜 단백질을 정제하기 위해 DEAE-sephacel sephacryl S-200, hydroxylapatite column 등 칼럼크로마토그래피법을 이용하여 약 168. 5배의 활성을 가진 유약호르몬 에폭시드 기수분해효소 분획을 얻었다. Juvenile hormone epoxide hydrolase (JHEH), which may play a pivotal role in regulating insect juvenile hormone (JH) titer along with JH esterase (JHE), was identified in cabbage looPer, Trichoplusia ni A Partition assay was developed to measure insect JH Ⅲ metabolism in biological samples containing both JH esterase and JHEH activity. The assay utilizes commercially available radiochain [3H]-labeled JH as substrate and the selective JH esterase inhibitor 3-octylthio-1, 1, 1, -trifluoro-2-propanone (OTFP). JH partitions into an isooctane phase and the metabolites JH acid, JH diol and JH diol-acid into aqueous methanol after incubation of JH substrate with inhibited and uninhibited sample. In vitro metabolism of JH Ⅲ(5X10-4M) was measured in hemolymph, fat body, midgut and integument homoginate. It was also measured in different subcellular fraction(cytosol, nuclear, mitochondria, microsome)Microsomal Protein was co-purified 168. 5-fold with the JHEH activity through DEAE-sephacel, sephacry S-200 and hydroxylapatite columns.

      • 밤바구미의 변태에 따른 트리하로스의 함량변화

        이경로 ( Kyung Ro Lee ),안기홍 ( Ki Heung Ahn ) 건국대학교 기초과학연구소 1987 理學論集 Vol.12 No.-

        Changes in the trehalose concentration in the whole body during metamorphosis of the chestnut weevil, Curculio dentipes Roelofs, were measured by using Anthrone method and Thin layer chromatography method. Healthy specimens were chosen as samples at each developmental stage; mature larvae emerged from the chestnut, diapausing mature larvae in soil and pupae, adult. The trehalose concentration reached the maximum at the mature larvae which emerged from the chestnut and reached mininum at the diapausing mature larvae in soil. The trehalose concentration at the mature larvae diapaused in soil increased gradually at the pupae and adult stage. Changes of trehalose concentration showed the physiological cycle formed in a U-shape during the metamorphosis. Therefore, the present study indicated that the trehalose concentration of the chestnut weevil is closely related to metamorphosis.

      • Changes in Trehalose Content during Metamorphosis of the Chestnut Weevil,Curculio dentipes Roelofs

        Lee,Kyung-Ro,Ahn,Ki-Heung 建國大學校基礎科學硏究所 1987 理學論集 Vol.12 No.-

        밤바구미(Curculio dentipes Roelofs)의 변태에 따른 생리학적 기초조사로써 trehalose의 함량변화를 측정한 결과는 다음과 같다. 1. Trehalose의 함량은 밤을 가해한 후 탈출한 유충기에서 최고의 함량을 나타냈다. 2. 흙속에서 휴면한 유충기에서 trehalose의 함량은 최저로 나타났다. 3. Trehalose의 비교함량은 밤을 가해한 후 탈출한 유충에서 최고를 보였고, 흙속에서 휴면한 유충기에서 급격히 감소하여 용기와 성충기에서 서서히 증가하였다. 4. 전 변태기의 trehalose함량변화는 생리적 곡선인 U자형을 나타내어 밤바구미의 변태와 밀접한 상관을 갖는 것으로 나타났다. Changes in the trehalose concentration in the whole body during metamorphosis of the chestnut weevil, Curculio dentipes Roelofs, were measured by using Anthrone method and Thin layer chromatography method. Healty specimens were chosen as samples at each developmental stage; mature larvae emerged from the chestnut, diapausing mature larvae in soil and pupae, adult. The trehalose concentration reached the maximum at the mature larvae which emerged from the chestnut and reached mininum at the diapausing mature larvae in soil. The terhalose concentration at the mature larvae diapaused in soil increased gradually at the pupae and adult stage. Changes of trehalose concentration showed the physilogical cycle formed in a U-shape during the metamorphosis. Therefore, the present study indicated that the trehalose concentration of the chestnut weevil is closely related to metamorphosis.

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