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ア ァ カ サ ザ タ ダ ナ ハ バ パ マ ヤ ャ ラ ワ ヮ ン イ ィ キ ギ シ ジ チ ヂ ニ ヒ ビ ピ ミ リ ウ ゥ ク グ ス ズ ツ ヅ ッ ヌ フ ブ プ ム ユ ュ ル エ ェ ケ ゲ セ ゼ テ デ ヘ ベ ペ メ レ オ ォ コ ゴ ソ ゾ ト ド ノ ホ ボ ポ モ ヨ ョ ロ ヲ ―

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      주제어 : phosphoribosyl-AMP cyclohydrolase (검색결과 2 건)
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      • Corynebacterium glutamicum에서 hisI 유전자의 분자적 클로닝

        천재연,이명석 숙명여자대학교 자연과학연구소 2000 자연과학논문집 Vol.- No.11

        Corynebacterium glutamicum의 DNA library를 이용하여 Escherichia coli histidine 영양요구균주에 complementation하는 방법으로 hisI 유전자를 클로닝하였다. E. coli hisI mutant에 complementation하는 7.8 kb와 6.0 kb fragment를 포함하는 recombinant DNA를 pHI1와 pHI2로 명명하고 여러 가지 제한효소들로 제한효소지도를 작성하였다. pHI1와 pHI2의 overlap되는 4.Okb fragment 부위가 phosphoribosyl-AMP cyclohydrolase를 암호화하는 hisI 유전자를 포함함을 알 수 있었다. phosphoribosyl-AMP cyclohydrolase를 암호화하는 hisI 유전자의 위치를 결정하는데 있어서 DNA조각을 subcloning하고 형질 전환하여 hisI 유전자의 최소단위는 PstI-HindIII 1.8kb를 포함하는 pHI12임을 확인하였다. Complementation cloning of the hisI gene in Corynebacterium glutamicum was done by transforming the genomic DNA library into the corresponding histidine auxotrophs of Escherichia coli. Recombinant plasmids containing 7.8 kb and 6.0 kb fragments were also able to complement the E. coli hisI mutant. The insert DNA fragments in the recombinant plasinids, named puIl and pHI2, were physically mapped with several restriction enzymes. By further subcloning the entire DNA fragment containing the function and by complementation analysis, we located the hisI gene of C. glutamicum on the 1.8kb PstI-HindIII pHI12 fragment.

      • Corynebacterium glutamicum hisI 유전자의 염기서열 결정과 유사성 분석

        천재연,이명석 숙명여자대학교 자연과학연구소 2002 자연과학논문집 Vol.- No.13

        Corynebacterium glutamicum의 DNA library를 이용하여 Escherichia coli histidine 영양요구 균주에 complementation하는 방법으로 hisI 유전자를 클로닝하였다. E. coli hisI mutant에 complementation하는 7.8 kb와 6.0 kb fragment를 포함하는 recombinant DNA를 pHI1와 pHI2로 명명하고 여러 가지 제한효소들로 제한효소 지도를 작성하였다. pHI1와 pHI2의 overlap되는 4.0 kb fragment 부위가 phosphoribosyl-AMP cyclohydrolase를 암호화하는 hisI 유전자를 포함함을 알 수 있었으며, 제한효소 지도를 이용하여 DNA 조각을 subcloning하고 형질 전환하여 hisI 유전자의 최소단위는 PstⅠ-HindⅢ 1.8 kb를 포함하는 pHI11임을 확인하였다. 염기서열 결정결과pHI1은 357 bp의 ORF를 가지며 118개의 아미노산으로 구성된 분자량 13 kDa의 polypeptide 를 암호화암을 알 수 있었다. 또한 이 유전자는 Gram-positive bacteria의 Mycobacterium tuberculosis의 hisI 유전자와 71%로 높은 유사성을 보인다. Complementation cloning of the hisI gene in Corynebacterium glutamicum was done by transforming the genomic DNA library into the corresponding histidine auxotrophs of Escherichia coli. Recombinant plasmids containing 7.8 kb and 6.0 kb fragments were able to complement the E. coli hisI mutant. The insert DNA fragments in the recombinant plasmids, named pHI1 and pHI2, were physically mapped with several restriction enzymes. By further subcloning of the entire DNA fragment and by their complementation analysis, we identified the hisI gene of C. glutamicum to the 1.8 kb PstⅠ-HindⅢ pHI12 fragment. The length corresponding to the ORF of hisI was 357 bp and it contained 118 amino acid with a molecular weight of 13 kDa.

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