Corynebacterium glutamicum에서 hisI 유전자의 분자적 클로닝 = Molecular Cloning of the hisI gene from Corynebacterium glutamicum

국문 초록 (Abstract)

Corynebacterium glutamicum의 DNA library를 이용하여 Escherichia coli histidine 영양요구균주에 complementation하는 방법으로 hisI 유전자를 클로닝하였다. E. coli hisI mutant에 complementation하는 7.8 kb와 6.0 kb fragment를 포함하는 recombinant DNA를 pHI1와 pHI2로 명명하고 여러 가지 제한효소들로 제한효소지도를 작성하였다. pHI1와 pHI2의 overlap되는 4.Okb fragment 부위가 phosphoribosyl-AMP cyclohydrolase를 암호화하는 hisI 유전자를 포함함을 알 수 있었다. phosphoribosyl-AMP cyclohydrolase를 암호화하는 hisI 유전자의 위치를 결정하는데 있어서 DNA조각을 subcloning하고 형질 전환하여 hisI 유전자의 최소단위는 PstI-HindIII 1.8kb를 포함하는 pHI12임을 확인하였다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

Complementation cloning of the hisI gene in Corynebacterium glutamicum was done by transforming the genomic DNA library into the corresponding histidine auxotrophs of Escherichia coli. Recombinant plasmids containing 7.8 kb and 6.0 kb fragments were also able to complement the E. coli hisI mutant. The insert DNA fragments in the recombinant plasinids, named puIl and pHI2, were physically mapped with several restriction enzymes. By further subcloning the entire DNA fragment containing the function and by complementation analysis, we located the hisI gene of C. glutamicum on the 1.8kb PstI-HindIII pHI12 fragment.

목차 (Table of Contents)

• I. 서론
• 재료 및 방법
• 1. 사용균주와 Plasmid 및 성장조건
• 2. DNA 조작
• 3. Histidine 생합성 유전자의 클로닝
• 4. Restriction endonuclease mapping과 insert DNA의 subcloning
• 결과 및 고찰
• 1. C. glutamicum로부터 histidine 생합성 유전자의 클로닝
• 2. Histidinol dehydrogenase를 암호화하는 hisI 유전자의 위치결정
• 3. Histidine 생합성에 관여하는 유전자들의 연관관계
• 사사
• 참고문헌