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      • DNA 및 RNA 의 특수한 순서를 검지 할 수 있는 새로운 표식방법

        Lenore Gardner 생화학분자생물학회 1983 생화학분자생물학회 소식 Vol.3 No.4

        이 논문은 동위원소를 쓰지 않고 DNA probe를 labeling하는 방법에 관한 것이다. Biotinylate된 deoxyuridine triphosphate를 nick translation에 의하여 DNA probe에 끼운다. 이렇게 만든 probe의 녹는점은 약 5°C 정도 낮아지지만, 이 Biotinylate된 DNA probe의 hybridization kinetics는 p-label된 DNA probe의 그것과 비슷하다. 이 Probe의 여러 가지 사용법이 여기서 논의되고 있고 in situ hybridization이나 nitrocellulose membrane에 hybridize된 것을 볼 수 있는 두 가지 방법도 (??)되어 있다. Detek Ⅰ-f는 첫 단계에서 goat anti-biotin 항체를 사용하고 그 다음에 FITC rabbit anti-goat conjugate를 사용하고 있다. 그러므로 이 hybridize된 것은 일반적인 형광 현미경으로 그 위치를 알 수 있다. Detek Ⅰ- hrp는 streptavidinhorseradish peroxidase complex를 사용한다. 그러므로 hybridize 된 것은 표준 peroxidase assay 에 의하여 검출할 수 있다. viral DNA, Viral mRNA, cellular DNA(highly-re-peated mouse satellite DNA)의 위치를 알기 위하여 Biopro be를 사용한 예가 제시되어 있다.

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