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- 저자 : Dongyi Du, 김대광(Dae-Kwang Kim) (검색결과 1 건)
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Change in Expression of Keratin and Proto-oncogene Induced by Beta-propiolactone in HaCaT Cell
류음(Yin Liu),성언기(Eon-Gi Sung),송인환(In-Hwan Song),Dongyi Du, 김대광(Dae-Kwang Kim),박정현(Jeong-Hyun Park),성훈기(Hoon-Ki Sung),이융창(Yungchang Lee),김주영(Joo-Young Kim) 대한해부학회 2001 Anatomy & Cell Biology Vol.34 No.4
사람 각질화 세포주인 HaCaT 세포를 Beta-propiolactone (BPL)으로 처리한 후 형태학적인 변화와 kerain 및 protooncogoen 사이의 관계를 밝히기 위해, keratin (K8, K10, K13)과 proto-oncogene (c-fos, c-jun, c-myc)의 발현 변화를 조사하였다. 다양한 농도 (0, 0.1, 1 μg/ml)의 BPL을 이 세포들에 2시간 또는 6시간 동안 처리하였다. BPL에 의해 다각형 모양의 세포들은 섬유세포형으로 변화하였다. 많은 소엽을 보이는 핵들이 나타났으며, 부착반의 수 는 감소하였다. 면역형광법과 Northern blotting의 결과, 이 약제는 K10 (정상적인 각질화세포의 분화 표지자)의 발현은 감소시켰고, 반면에 K8과 K13 (병적인 상태와 관련된 표지자)의 발현을 증가시켰다. 또한 BPL은 c-fos와 c-jun의 발현은 상향조절 시킨 반면에, c-myc의 발현은 감소시켰다. 유세포분석으로 각각의 keratin 또는 proto-oncogene, 그리고 DNA의 양을 동시에 측정하였는데, K8의 발현이 S-G2-M기에서 급격히 증가되었다. 약제 노출 2시간 이내에서 c-Fos의 경우 S-G2-M기에서 증가되었지만, c-Jun은 S-G2-M기에서 처리시간에 따라 차츰 증가되었다. G0-G1기와 S-G2-M기에서 c-Myc의 발현은 용량 및 시간에 비례하여 억제되었다. 결론적으로 BPL에 의해 유발된 이들 결과들은 형태학적인 변화와 keratin 또는 proto-oncogene들의 발현 사이에 밀접한 연관성을 반영한다. To investigate the relationship between the morphologic changes and the expression of keratin and proto-oncogene induced by Beta-propiolactone (BPL), we assessed on the expression of keratins (K8, K10, K13) and proto-oncogenes (c-fos, c-jun, c-myc) in human HaCaT cell line. The cells were treated with 0, 0.1, 1 μg/ml BPL for 2 or 6 hours. Morphologic studies revealed that BPL changed the cells into fibrocyte-shaped, caused highly lobulated nuclei and reduced desmosomes in their number. Findings of immunofluorescence and Northern blotting indicated that BPL consistently decrease expression of K10 representing a normal differentiation marker of keratinocytes, while increasing expression of K8 and K13 associated with a pathologic differentiation. This reagent also up-regulated expression of cfos and c-jun, and down-regulated expression of c-myc. Together with staining for each keratin or proto-oncogene and DNA content in flow cytometry, BPL increased K8 expression dramatically at S-G2-M phase. The induction of c-Fos at S-G2-M phase appeared within 2 hours, and c-Jun gradually occurred. However, c-Myc was inhibited regardless of phases of cell cycle. In conclusion, these changes caused by BPL demonstrate a close relationship between the morphologic evidence and the altered expression of each keratin and proto-oncogene.
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