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- 저자 : 변지예 ( Ji Ye Byeon ) (검색결과 1 건)
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효율적인 유전자 전달을 위한 Transferrin과 PEI가 도입된 O-carboxymethyl Chitosan의 합성
박순정 ( Sun Jeong Park ),변지예 ( Ji Ye Byeon ),박소영 ( Soyoung Park ),김영민 ( Young Min Kim ),남정표 ( Joung Pyo Nam ),박성철 ( Seong Cheol Park ),박영훈 ( Yung Hoon Park ),나재운 ( Jae Woon Nah ),장미경 ( Mi Kyeong Jang ) 한국키틴키토산학회 2014 한국키틴키토산학회지 Vol.19 No.2
본 연구에서는 키토산의 유전자 전달 효율과 암세포 표적효율을 향상시키기 위하여 OCMCh의 amine group과 carboxyl group에 각각 표적물질인 TF와 양이온고분자인 PEI를 도입하여, 유전자 전달체인 POPT를 제조하였다. 제조된 POPT는 1 H-NMR 을 통해 성공적으로 합성되었음을 확인하였고, DLS를 통해 입자크기를 측정한 결과 POPT의 비율이 증가함에 따라 입자크기가 작아지며, POPT가 나노 크기의 입자를 형성함을 확인하였다. 또한 전기영동 실험을 통해 POPT가 pEGFP-N1와 복합체를 잘 형성하며, heparin 실험결과 혈액 내에서 pEGFP-N1를 잘 방출할 수 있으며, DNase로부터 pE GFP-N1를 보호할 수 있음을 확인하였다. POPT의 유전자 전달효율은 정상세포와 암세포를 사용하여 확인한 결과 POPT 가 증가할수록 유전자 전달 효율이 향상되며, TF의 표적능력으로 인해 암세포에서만 유전자가 전달됨을 확인할 수 있었다. 이 같은 실험 결과들을 통해 POPT는 암세포만을 표적해 유전자를 전달할 수 있는 전달체로써 사용 가능성이 있는 우수한 물질로 사료된다. 추후에 수행할 실험에서는, 이러한 시스템의 가능성을 보다 더 정확히 확인하기 위하여 동물실험을 진행할 예정이며, 질병을 치료할 수 있는 유전자를 전달체를 통하여 전달하는 실험을 통하여 유전자 치료를 수행할 수 있는지 여부를 확인하는 연구를 진행할 것이다. The polyethyleneimine / O-carboxymethyl chitosan / polyethyleneglycol / transferrin (POPT) copolymer was evaluated as nonviral gene delivery carrier. The structural analysis of POPT copolymer was confirmed by 1-proton nuclear magnetic resonance ( 1 H-NMR). The particle size of - pEGFP-N1/POPT polyplexes was confirmed by dynamic light scattering (DLS). The results of DLS showed that the particle sizes of pEGFP-N1/POPT polyplexes has small size of 130~260 nm. The binding ability with pEGFP-N1, pEGFP-N1 protecting assay against DNase, and pEGFP-N1 release assay through heparin of POPT were evaluated by gel retardation assay. In addition, gene transfection effect of pEGFP-N1/POPT polyplexes was evaluated in fibroblast cell line (L929, without transferrin receptor) and cervical cancer cell line (HeLa-S3, with transferrin receptor) cells. The results of transfection were shown that green fluorescence was cancer cell more expression than normal cell due to receptor mediated endocytosis between transferrin of POPT and transferrin receptor on the cancer surface. Therefore, pEGFP-N1/POPT polyplexes could be a promising gene delivery system.
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