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< 전시-P-75 > 소나무 단리 화합물의 항산화 및 Glucokinase 활성 평가
민희정 ( Heejeong Min ),이민성 ( Minsung Lee ),배영수 ( Youngsoo Bae ) 한국목재공학회 2019 한국목재공학회 학술발표논문집 Vol.2019 No.1
소나무는 학명 Pinus densiflora로써 중국, 일본 및 우리나라 전역에서 자생하는 수종으로써 소나무과에 속하는 상록교목이다. 소나무는 주로 정원수, 조림용, 약용 및 식용 등으로 많이 이용되고 있다. 선행 연구를 통해 소나무로부터 (+)-catechin(1), (-)-epicatechin(2), taxifolin(3), taxifolin-3’-O-β-D-(+)-glucose(4), quercetin(5) 및 quercitrin(6) 총 6개의 화합물을 단리하였다. 본 연구에서는 단리 화합물에 대한 항산화 및 항당뇨(Glucokinase) 활성을 평가하였다. 항산화 활성평가에는 DPPH radical 소거법을 사용하였으며, Blois 등의 방법을 변형하여 측정하였다. 증류수를 이용하여 농도별로 희석한 시료 0.2 mL에 0.15 mM DPPH (1,1-diphenyl-2- picrylhydrazyl) 0.6 mL를 첨가하여 암조건에서 30분간 반응시킨 후 517 nm에서 흡광도를 측정하였다. negative control은 증류수를 사용하였으며, positive control은 ascorbic acid를 사용하여 실험을 진행하였다. 실험 결과 taxifolin-3’-O-β-D-(+)-glucose을 제외한 모든 화합물이 0.1 mg/mL의 농도에서 기준 물질인 ascorbic acid와 상응하는 항산화 활성을 보였다. Glucokinase 활성평가에는 hexokinase colorimetric assay kit를 이용하여 수행하였다. GK 활성에 의해 생성된 glucose-6-phosphate (G6P)가 G6P dehydrogenase (G6PDH)와 반응할 때 nicotinamide adenine dinucleotide (NAD+)가 NADH로 환원되는 것을 이용하여 GK 활성도를 측정하였다. HepG2 세포에 시료 (1 mg/mL)를 24시간 배양한 후 단백질을 정량하여 각 well 당 40μg/50μL씩 처리한 후 각 well 당 assay buffer 34μL, enzyme Mix 2μL, developer 2μL, coenzyme 2μL, hexokinase 10μL을 처리한 후 450nm에서 3분 간격으로 흡광도를 측정하였다. 실험결과 qurecitirn은 기준물질인 insulin의 70 % 이상의 효과를 보였으며, 나머지 화합물은 insulin의 50 %의 효과를 나타냈다.