Methodological development of an antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity (ADCC) and antibody-dependent cell-mediated phagocytosis (ADCP) by using flow cytometry : 항체의존성세포독성(ADCC)과 항체매개식세포작용(ADCP)을 유세포 분석기를 이용하여 판단 할 수 있는 방법론적 연구

국문 초록 (Abstract)

이 논문은 치료용 완전인간항체 개발을 위해서 항체의 효과를 입증할 수 있는 실험방법에 관한 내용이다. 항체가 인식하고 있는 세포를 죽일 수 있도록 면역세포를 유도하고 활성화된 면역세포가 지정된 세포를 죽이는 기전이 항체의 주된 효과 기전이며 대표적인 예로 항체의존성세포독성 (ADCC)과 항체매개식세포작용(ADCP)가 있다.
본 연구에서는 기존에 항체의존성 세포독성을 측정하던 방법인 젖산탈수소효소(LDH) 검출 방법과 연구자가 개발한 유세포 분석기를 활용하여 죽은 세포를 검출하는 방법, 이 두 방법을 이용하여 항체의 세포독성 효과를 입증하는 방법에 대하여 다루었으며 결과적으로 이 항체가 간암세포를 인식하여 면역세포를 유도해 간암세포를 죽이는 능력이 있음을 두 가지 실험 모두에서 입증하였다. 젖산탈수소효소 검출방법을 통해서는 단순히 이 항체가 포함된 조건에서만 세포가 더 많이 죽는 다는 것을 확인하였으며 유세포 분석기를 이용한 방법을 통해서는 간암세포를 죽이는 방법에 있어서 ADCP와 ADCC가 모두 작용함을 확인할 수 있었다. 본 결과는 두 가지 다른 실험방법을 이용하여 간암 특이적 항체의 효과기전을 확실하게 입증하였으며 특히 유세포 분석기를 이용한 방법은 연구자와 다른 세포나 항체를 이용해서도 적용이 가능한 방법이기에 앞으로의 항체 연구에 많이 응용 될 것이라 사료된다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

This study demonstrates the method to identify the ability of antibody to induce immune-mediated cell killing like antibody dependent cell mediated cytotoxicity (ADCC). In general, the 51Cr release assay and LDH release assay have been used for identifying ADCC, but their principles are detection of substances from dead cells, so cannot explain about the mechanism of cell death. To overcome this limitation, I developed the method to distinguish the mechanism of cell death which is caused by ADCC or ADCP with flow cytometric assay. I first identified that EF21-1 has an ADCC activity with LDH release assay and then confirmed the same result in flow cytometric assay. Additionally, The ADCP activity of EF21-1 was identified with this flow cytometric assay.

목차 (Table of Contents)

• 1. Introduction 1
• 2. Materials and Methods 4
• 3. Results 9
• 4. Discussion 19
• 5. Summary 21
• Reference 22
• 한글초록 25