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    Antigen identification of fully human monoclonal antibody by using immunoprecipitation : 면역침강법을 이용한 완전인간항체의 항원 동정에 관한 연구

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    이 논문은 치료용 완전인간항체 개발을 위한 항원동정 방법을 이용한 연구결과이다. 완전인간항체는 인간화항체에 비하여 면역부작용이 적다는 장점을 가지고 있다. 이번 연구에서 이용한 간암환자유래 간암특이 완전인간항체를 치료용으로 사용하기 위해서는 먼저 해당 항원의 동정을 통하여 항체의 효과 및 성격을 규명해야만 한다.
    본 연구에서 사용한 항원동정 방법은 면역침강법이며 이는 침강반응을 응용하여 시료 중에서 목적하는 항원에 대한 항체를 첨가한 다음 불용화 시킨 프로테인A를 사용하여 항체에 결합된 항원을 침강시키는 방법이다. 본 연구에서 이 시스템의 적용 가능성을 증명하였으며, 희소한 양의 항원과 항체의 항원에 대한 친밀성이 적은 경우를 동정해 내야 하는 상황을 극복하기 위해 농축하는 방법을 추가하여 연구를 진행하였다. 그 결과, 농축하기 전 면역침강법만을 이용한 샘플 결과에서는 해당 단백질의 양이 매우 희소하여 LC-MS 분석이 불가하였지만 면역침강법을 이용한 뒤 여러 샘플들을 농축한 결과에서 해당 단백질의 LC.-MS 분석 가능한 수준의 단백질을 얻을 수 있었다. 그러나, LC-MS 분석결과로 얻은 단백질 후보 중에서 우리의 완전인간항체가 인지하는 해당 항원과 일치하는 단백질은 찾아내지는 못하였다.
    본 결과는 면역침강법을 이용하여 항체에 대한 항원을 규명할 수 있다는 것과 해당 항원의 양이 희소하더라도 농축을 이용하여 항원을 동정할 수 있음을 밝힘으로써 앞으로의 항체 연구에 많이 응용될 것이라 생각된다. 또한 단일클론항체를 이용한 항원 규명을 증명해 내기 위한 연구의 필요성을 논하고자 한다.
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    이 논문은 치료용 완전인간항체 개발을 위한 항원동정 방법을 이용한 연구결과이다. 완전인간항체는 인간화항체에 비하여 면역부작용이 적다는 장점을 가지고 있다. 이번 연구에서 이용한 ...

    이 논문은 치료용 완전인간항체 개발을 위한 항원동정 방법을 이용한 연구결과이다. 완전인간항체는 인간화항체에 비하여 면역부작용이 적다는 장점을 가지고 있다. 이번 연구에서 이용한 간암환자유래 간암특이 완전인간항체를 치료용으로 사용하기 위해서는 먼저 해당 항원의 동정을 통하여 항체의 효과 및 성격을 규명해야만 한다.
    본 연구에서 사용한 항원동정 방법은 면역침강법이며 이는 침강반응을 응용하여 시료 중에서 목적하는 항원에 대한 항체를 첨가한 다음 불용화 시킨 프로테인A를 사용하여 항체에 결합된 항원을 침강시키는 방법이다. 본 연구에서 이 시스템의 적용 가능성을 증명하였으며, 희소한 양의 항원과 항체의 항원에 대한 친밀성이 적은 경우를 동정해 내야 하는 상황을 극복하기 위해 농축하는 방법을 추가하여 연구를 진행하였다. 그 결과, 농축하기 전 면역침강법만을 이용한 샘플 결과에서는 해당 단백질의 양이 매우 희소하여 LC-MS 분석이 불가하였지만 면역침강법을 이용한 뒤 여러 샘플들을 농축한 결과에서 해당 단백질의 LC.-MS 분석 가능한 수준의 단백질을 얻을 수 있었다. 그러나, LC-MS 분석결과로 얻은 단백질 후보 중에서 우리의 완전인간항체가 인지하는 해당 항원과 일치하는 단백질은 찾아내지는 못하였다.
    본 결과는 면역침강법을 이용하여 항체에 대한 항원을 규명할 수 있다는 것과 해당 항원의 양이 희소하더라도 농축을 이용하여 항원을 동정할 수 있음을 밝힘으로써 앞으로의 항체 연구에 많이 응용될 것이라 생각된다. 또한 단일클론항체를 이용한 항원 규명을 증명해 내기 위한 연구의 필요성을 논하고자 한다.

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    목차 (Table of Contents)

    • 1. Introduction 1
    • 2. Materials and Methods 4
    • 3. Results 9
    • 4. Discussion 19
    • 5. Summary 22
    • 1. Introduction 1
    • 2. Materials and Methods 4
    • 3. Results 9
    • 4. Discussion 19
    • 5. Summary 22
    • Reference 23
    • 한글초록 27
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