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Overexpression of Clast4 Reduces Cell Proliferation
Minkook Kang(강민국),Seung Jin Han(한승진) 한국생명과학회 2014 생명과학회지 Vol.24 No.10
eIF4E는 번역개시과정에서 중심조절자 역할을 한다. eIF4E와 eIF4G의 결합이 mRNA의 번역을 촉발하기 때문에, 여러 단백질들이 이 결합을 저해함으로써 번역과정을 조절한다. 인간 4E-T는 eIF4E 결합단백질 중의 하나로, 결합한 mRNA의 번역을 저해할 뿐 아니라, eIF4E를 processing body (P-body)로 이동시키는 기능을 가지고 있다. Clast4는 인간의 4E-T와 상동성을 가지는 생쥐 단백질로 번역 조절에 중요한 기능을 할 것으로 추측되지만, 그 특징은 아직 잘 알려져 있지 않다. 본 연구에서는 Clast4의 인산화된 상태와 eIF4E와의 결합력, Clast4 과발현시 세포증식의 변화에 대한 특징을 관찰하였다. Clast4는 PKA에 의해 in vivo에서 아미노말단의 몇몇 잔기가 인산화되는 것으로 확인되었다. 그러나 PKA에 의해 인산화된 Clast4는 eIF4E와의 결합력이나 Clast4의 세포 내 위치에는 큰 변화가 없었다. Clast4는 eIF4E1과 CPEB와 결합하며, Clast4의 보존된 eIF4E 결합 서열인 YXXXXL?가 eIF4E1A와의 결합에서는 중요하지만 eIF4E1B와의 결합에서는 큰 영향이 없는 것으로 관찰되었다. 잘 알려져 있는 eIF4E 조절자인 4E-BP의 경우와 유사하게 Clast4를 과발현하였을 때 세포의 증식이 감소되었다. 이러한 결과는 Clast4가 세포 내에서 전반적인 번역 조절에 관여하고 있다는 것을 시사한다. The eIF4E protein is the key regulator of translation initiation. The interaction of eIF4E with eIF4G triggers the translation of mRNA, and several proteins interrupt this association to modulate translation. Human 4E-T is one of the eIF4E-binding partners that represses the translation of bound mRNAs, and it is involved in the transport of eIF4E to processing bodies (P-bodies). Although Clast4, the mouse homolog of human 4E-T, might play critical roles in the regulation of translation, its properties are not well known. In this report, we deciphered the properties of Clast4 by determining its phosphorylation state, binding to eIF4E, and effects of overexpression on cell proliferation. Clast4 was phosphorylated by protein kinase A (PKA) in vivo on several residues of its amino terminus. Nevertheless, the PKA phosphorylation of Clast4 appeared to have no effect on either its eIF4E-binding ability or localization. Clast4 interacted with eIF4E1 and CPEB. The conserved eIF4E-binding sequence in Clast4, YXXXXL?, was important for binding eIF4E1A but not eIF4E1B. Similar to that of another well-known eIF4E regulator, the eIF4E binding protein (4E-BP), the overexpression of Clast4 decreased cell proliferation. These results suggest that Clast4 acts as a global translation regulator in cells.
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