원유에서 분리한 Lactobacillus fermentum 450의 생리적 특성과 면역활성

한누리 ( Noo Ri Han ),박선영 ( Sun Young Park ),임상동 ( Sang Dong Lim ) 한국유가공기술과학회 2015 한국유가공기술과학회지 Vol.33 No.2

본 연구는 원유로부터 면역증진 젖산균을 분리 및 동정하고, 이 균주의 생리적 특성을 규명하여 상업적으로의 이용가능성을 검토하고자 실시하였다. 이를 위해 Modified MRS 분별배지를 사용하여 노란색 집락을 형성하는 균주를 대상으로 면역활성이 높은 균주를 선발한 결과, D205 균주가 최종선발되었다. D205 균주는 IL-1α, TNF-α, NO 값이 각각 2,500pg 이상/mL, 2,000 pg 이상/mL, 11.55±2.95 μM로 나타났으며, 동정결과 Lactobacillus fermentum으로 판명되었고, Lactobacillus fermentum 450으로 명명하였다. Lactobacillus fermentum 450의 최적 생장 온도는 40℃이었으며, 답즙산과 산성의 pH에서 모두 우수한 생존력을 나타내었다. 효소활성은leucine arylamidase와 acid phosphatase가 비교적 높게 나타났다. 항생제 내성 실험 결과, kanamycin, neomycin, polymyxin B에 내성이 있는 반면 novobiocin에 감수성을 나타냈으며, Salmonella Typhimurium에 대해 63.86%의 억제 효과를 지니고 있으나, Escherichia coli와 Staphylococcus aureus에 대해서는 항균력이 거의 없는 것으로 나타났다. 본 연구는 농림축산식품부 농림수산식품기술기획평가원 농림기술개발사업(No. 107074-3)의 지원에 의하여 이루어진 것으로 이에 감사드립니다. The aim of this study was to investigate the physiological characteristics and immunomodulatory activity of Lactobacillus fermentum 450 isolated from raw milk. L. fermentum 450 showed optimum growth at 40℃ and exhibited immunomodulatory effects on interleukin-1α, tumor necrosis factor-α, and nitrous oxide at concentrations of >2,500 pg/mL, >2,000 pg/mL, and 11.55±2.95 μM, respectively. Of the 16 antibiotics tested, L. fermentum 450 exhibited the highest sensitivity to rifampicin, followed by penicillin-G, and the highest resistance to kanamycin, followed by neomycin and polymyxin B. The strain showed high acid phosphatase activity and was comparatively tolerant to bile juice and acid. Moreover, the strain displayed high resistance to Salmonella Typhimurium (63.86%). These results demonstrate that L. fermentum 450 has potential for use as a probiotic with immunomodulatory activity.

면역 활성능을 가진 Streptococcus macedonicus LC743을 이용한 모짜렐라 치즈 제조의 최적 배양조건 확립

박선영 ( Sun Young Park ),한누리 ( Noo Ri Han ),임상동 ( Sang Dong Lim ) 한국유가공기술과학회 2015 한국유가공기술과학회지 Vol.33 No.3

면역활성능이 높은균주로 선발된 Streptococcus macedonicusLC743를 이용하여 모짜렐라 치즈를 제조하기 위해 배양온도 별(32℃, 35℃), 균주의 접종량 별(1.0%, 2.0%)로 모짜렐라 치즈를 제조하여 일반성분, 균수, 총고형분 및 수율 및 면역 활성을 측정하여 최적조건을 설정하였다. S. macedonicus LC743균주를 이용하여 치즈 제조 시 2.0% 접종하여 32℃에서 배양할 경우 가장 제조 시간이 단축되었고, 가공적성 및 면역활성이 우수하였다. This study aimed to establish the optimum culture conditions for Mozzarella cheese by using Streptococcus macedonicus LC743, a strain selected for its immunomodulatory activity. For process optimization, 1.0% and 2.0% strain was inoculated and incubated at 32℃ and 35℃, respectively. The general components, bacterial count, total solids, yields, and immunomodulatory activity of the Mozzarella cheese were investigated. When the strain was inoculated at 2.0% and incubated at 32℃, the product quality and immunomodulatory activity was optimal and required minimal processing time. Therefore, 2.0% of S. macedonicus LC743 starter culture was added to milk at 32℃, after pasteurization at 63℃ for 30 min, and agitated for 4~5 min after addition of 230 μL/kg of rennet. Curd was made by setting the milk 25~35 min after addition of 0.01~ 0.02% calcium chloride. The curd was cut at 0.1~0.12% acidity (81 min later) and after heating the cheese to up to 43℃. Whey was removed at an acidity of 0.17~0.18% by agitation for 53 min. Next, cheddaring for 210 min up to an acidity of 0.6~0.65%, stretching at 72~75℃, and molding at 65~70℃ were performed, and the product was allowed to cool down to 5℃. Salting was done with a solution of 18~20 ˚Be at 12℃ for 20 min and drying occurred at 80~90% relative humidity at 10℃ for 2~3 days.

원유에서 분리한 Enterococcus faecalis MD366의 생리적 특성 및비만 억제 효과

박선영 ( Sun Young Park ),조성아 ( Seong A Cho ),한누리 ( Noo Ri Han ),임상동 ( Sang Dong Lim ) 한국유가공기술과학회 2014 Journal of Dairy Science and Biotechnology (JMSB) Vol.32 No.2

본 연구는 원유로부터 비만 억제 능력이 있는 젖산균을 분리 및 동정하고, 이균주의 생리적 특성을 규명하여 상업 적으로의 이용가능성을 검토하고자 실시하였다. 이를 위해 Modified MRS 분별배지를 사용하여 노란색 집락을 형성하는 균주를 대상으로 각각 Anti-lipase activity와 Anti-adipogenic activity가 우수한 균주를 선발한 결과, MD366 균주가 최종 선발되었다. MD366 균주는 lipase 억제활성 65.03±0.94%, 지방분화억제활성27.4±1.4%로나타났으며, 동정결과Enterococcus faecalis로 판명되었고, Enterococcus faecalis MD366으로 명명하였다. E. faecalis MD366의 최적 생장 온도는 37℃이 었으며, 담즙산과 산성의 pH에서 모두 우수한 생존력을 나타내었다. 효소활성은 전반적으로 낮았으나 acid phosphatase 에 대해 비교적 높은 효소 활성을 나타내었다. 항생제 내성 실험 결과 neomycin, kanamycin, vancomycin에 내성이 있는 반면, novobiocin에 감수성을 나타냈으며, Escherichia coli, Salmonella Typhimurium과 Staphyloccous aureus에 대해 각각 80.4%, 60.2%와 65.4%의 억제 효과를 지니고 있는 것으로 나타났다. The aim of this study was to investigate the physiological characteristics and anti-obesity effects of E. faecalis MD366 isolated from raw milk. E. faecalis MD366 inhibited lipase activity (65.0±0.9%) and differentiation of 3T3-L1 adipocytes (27.4±1.4%) at a concentration of 100 μg/mL (108 CFU/g E. faecalis MD366). The optimum growth temperature of E. faecalis MD366 was 37℃. Among 16 tested antibiotics, E. faecalis MD366 demonstrated the highest sensitivity to novobiocin and the highest resistance to neomycin, kanamycin, and vancomycin. The strain also showed high acid phosphatase activity. Moreover, E. faecalis was relatively tolerant to bile juice and acid, and displayed high resistance to Escherichia coli, Salmonella Typhimurium, and Staphylococcus aureus (80.4%, 60.2%, and 65.4%, respectively). These results demonstrate that E. faecalis MD366 can be potentially used as a probiotic with anti-obesity effects.

원유에서 분리한 Enterococcus faecalis MD366가 고지방식이를 급여한 마우스의 비만 억제에 미치는 영향

박선영 ( Sun Young Park ),조성아 ( Seong A Cho ),한누리 ( Noo Ri Han ),성기승 ( Ki Seung Seong ),임상동 ( Sang Dong Lim ) 한국유가공기술과학회 2014 Journal of Dairy Science and Biotechnology (JMSB) Vol.32 No.2

본 연구에서 우리는 고지방식이로 유도된 비만 마우스의 몸무게, 장기 무게, 부고환 지방조직 무게, 부고환 지방조직의 지방세포 크기 및 혈장 지질 농도가 E. faecalis MD366균주의 투여로 어떤 영향을 미치는지 연구하였다. E. faecalis MD366균주의 항비만 효과를 알아보기 위하여 C57BL/6J 마우스를 정상식이군 (ND), 고지방식이군(HFD), 고지방식이와 함께 E. faecalis MD366 균주를 경구투여한 군(HFD+MD366)으로 나누어 6주 동안 실험을 진행하였다. 6주 후 무게는 ND, HFD+MD366, HFD군 순으로 높게 나타났으며, 초기 무게 대비 체중 증가율은 HFD+MD366군이 HFD 군에 비해 18.10% 감소하였다. 간과 신장, 고환의 장기조직 무게는 세 군 모두 비슷하였으며, 부고환 지방의 평균무게 의 경우 ND군이 가장 작았으며, HFD+MD366군은 HFD군보다 작게 나타났지만 유의적 차이는 보이지 않았다. E. faecalis MD366의 투여가 혈청 지질 농도에 미치는 영향을 본 결과, TG의 농도는 HFD+MD366군이 HFD군에 비해 감소하기는 했지만 유의적 차이는 없었으며, 총 콜레스테롤과 LDL-콜레스테롤 수치에 있어서도 HFD+MD366군이 HFD군에 비해 평균적으로 적은 수치를 나타내었으나, 유의적 차이는 보이지 않았다. 부고환 지방세포 크기의 분포를 본 결과 ND와 HFD+MD366군은 2,000 μm2 크기의 지방세포 가 가장 많이 분포하였고, HFD군에서는 5,000 μm2 이상 크기의 지방세포가 가장 많이 분포하였으며, 지방 세포의 평균 크기는 ND, HFD+MD366, HFD 순으로 큰 것으로 나타났다. 비록 체중과 장기, 지방 무게와 혈청 지질농도 수치에는 E. faecalis MD366 균주가 큰 효과를 보이지 못했지만 부고환 지방세포 형성 및 지방세포 크기 증가를 저해함으로써 항비만 효과가 있을 것으로 사료된다. This study aimed to investigate the anti-obesity effects of Enterococcus faecalis MD366, isolated from raw milk, in diet-induced obese mice. To examine the effect, male C57BL/6J mice were fed for six weeks on three different diets, i.e., a normal diet and orally administrated saline solution (ND), a high-fat diet and orally administrated saline solution (HFD), and a high-fat diet and orally administrated E. faecalis MD366 (109 CFU/day) in saline solution (HFD+MD366). After six weeks, the rate of increase in body weight was 18.1% lower in the HFD+MD366 group compared to that in the HFD group. In addition, the weight of epididymal fat pad in the HFD+MD366 group was lower than that in the HFD group. The average levels of triglycerides, total cholesterol (TC), and low-density lipoprotein cholesterol (LDL-C) were slightly reduced in the HFD+MD366 group compared to those in the HFD group. However, there were no significant differences between the groups. Measuring the adipocytes revealed that the percentage of adipocytes with a size of 2,000 μm2 was higher than the percentages of other size classes in ND and HFD+MD366 groups, while the percentage of adipocytes larger than 5,000 μm2 was highest in the HFD group. The mean adipocyte size in the HFD+MD366 group was smaller than that in the HFD group.