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      • Effect of S100A8/S100A9 on UV induced apoptosis

        정남지 충남대학교 대학원 2011 국내석사

        RANK : 247615

        Background : S100 protein is a superfamily of EF-hand calcium binding proteins, associated with various cellular process, which including cell growth, differentiaton, cell cycle regulation, and inflammation. S100A8 and S100A9 are member of the S100 proteins, exist as a heterodimer, expressed in various inflammatory cells, such as activated monocyte, macrophage, neutrophil, which are known to be up-regulated in hyperproliferative psoriatic epidermis. Objective : This study has the purpose investigated the effect of S100A8 and S100A9 on Ultraviolet(UV) induced cell death using UVB irradiated keratinocyte. Methods : After UVB irradiation onto keratinocyte which are transduced with S100A8 and S100A9, we measured cell proliferation and apoptosis using EZ cytox cell viability assay kit. And we performed immunohistochemistry to localized the S100A8 and S100A9 expression in UVB irradiated mouse skin. Keratinocytes were transduced with the recombinant adenovirus expressing GFP-S100A8 and Red-S100A9, and then measured the effect of cell prolifecation and apoptosis using Western blot. Results: We confirmed that UVB irradiation markedly induced S100A8 and S100A9 expression by immunochemistry in mouse buttock skin, especially extracellular matrix in epidermis. Over-expression of S100A8 and S100A9 by adenoviral transduction led to the enhancement of cell proliferation, reduced of cell apoptosis in UVB irradiation, compared with control group. In Western blotting, the addition of S100A8 and S100A9 exhibited higher Bcl-2 and PCNA protein synthesis on compared with control, but lesser prominent in S100A8. And detection of cleaved PARP are prominent in control than S100A8 and S100A9. Conclusions: These results indicate that S100A8 and S100A9 have an antiapoptotic role in UV treated keratinocyte, the antiapoptotic effect prominent in S100A9 than S100A8. And there are no synergenic effect of antiapoptotis in S100A8/A9 heterodimer. S100 protein은 EF-hand calcium binding protein의 한 종류로서 세포의 성장이나 분화, 세포 주기의 조절과 염증의 조절의 관련된 일련의 과정과 연관이 되어 있는 경우가 많다. 이러한 S100 protein의 한 종류인 S100A8과 S100A9는 이합체로 존재를 하는 경우가 많으며 활성화된 단핵구와 대식세포, 호중구 등에서 발현이 증가 되고 이는 건선의 표피를 과증식 시키는 등의 역할을 수행하게 된다. 본 연구에서는 UVB 를 가한 각질세포 에서의 UVB로 유도되는 세포의 죽음과 관련하여 S100A8과 S100A9가 어떠한 영향을 미치는 지에 대하여 알아보고 UVB를 가한 각질세포에서의 S100A8과 S100A9의 발현과 세포의 증식이 어떠한 관련성이 있는지에 대하여 알아보도록 하겠다. UVB를 가한 각질세포에 S100A8 과 S100A9가 유도되는 것을 확인하기 위하여 UVB를 가한 쥐의 둔부 조직에 S100A8과 S100A9에 대한 면역화학조직염색을 시행하였고 결과적으로 쥐의 표피에 S100A8과 S100A9의 발현이 증가되는 것을 관찰할 수 있었다. 또한 UVB를 가한 각질세포에 S100A8과 S100A9를 과발현 시켰을 때 세포의 증식과 생존률이 증가되는 것을 관찰 할 수 있었다. 따라서 결론적으로 본 연구에서는 S100A8과 S100A9가 UVB를 가한 각질세포에 대하여 세포의 자멸사를 감소시키는 역할을 하며 세포의 증식을 일으키는 방향으로 작용을 한다고 결론을 내릴 수 있었다.

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