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- 저자 : 모에 테수야다나 (검색결과 1 건)
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이 실험의 목적은 시험 관내 MAC-T 세포를 이용하여 6 개의 농도 및 5 개의 배양 시간을 갖고 L- 히스티딘을 첨가함으로써 MAC-T 세포, 배양 배지 및 모두(세포 + 배지)에서 단백질 발현 양을 실험하는 것입니다. 이 연구는 2 가지 실험을 통해 수행되었으며 1차 실험은 최적 배양 시간을 평가하기위해, 2차 실험은 L-히스티딘을 시험 관내 MAC-T세포에 첨가함으로써 단백질 양의 분석에 대한 최적 농도 수준을 결정하기위해 수행되었습니다. 첫 번째 실험은 다섯 가지 농도 수준 (0, 0.3, 0.6, 0.9, 1.2 및 1.5 mM L- 히스티딘)과 함께 5 가지 다른 배양 시간 (0, 24, 48, 72 및 96 시간)으로 진행되었고, 총 단백질, 배지 단백질 및 세포 단백질로부터의 최적의 단백질 발현이 96 시간에 보였습니다. 따라서, 96 시간의 배양 시간이 최적의 단백질 양의 발현을 위한 최상의 배양 시간으로 평가되었고, 96 시간의 배양 시간이 2차 농도 수준의 실험에서 배양 시간 0 시간과 비교하는데 사용되었습니다. MAC-T 세포에서 0 시간 (대조군) 및 96 시간의 배양 시간 에서 6 가지 농도 수준 (0mM, 0.3mM, 0.6mM, 0.9mM, 1.2mM 및 1.5mM L- 히스티딘)으로 2 차 실험을 진행하였습니다. 이 실험에서 가장 높은 세포 단백질 양의 발현은 1.2 mM 첨가 (P <0.05), 가장 높은 배지 단백질 발현은 1.2 mM (P <0.01)와 1.5 mM (P <0.05) 그리고 최적 총 단백질 발현은 0 시간 (대조군) 및 96 시간의 배양 시간과 비교했을 때 모두 1.2 mM (P <0.01)이었습니다. 또한 6 가지 농도 수준 (0, 0.3, 0.6, 0.9, 1.2 및 1.5 mM의 L-히스티딘) 내의 단백질 발현은 96 시간의 배양 시간 내에서만 비교되었으며, 배지 단백질 발현에서 유의적인 차이가 있었습니다 (P <0.05 ). 세포 단백질 발현 및 총 단백질 발현은 96 시간 배양 시간에서 첨가량 간에 유의적인 차이가 없었다. 두 연구의 단백질 양 발현은 BCA 피어스 단백질 분석 키트 분석에 의해 수행되었습니다. 결론적으로, 이 연구는 필수 아미노산 (EAA) L- 히스티딘이 젖소의 유방 상피 세포 (MAC-T) 내에서 우유 단백질 합성 유도에 영향을 줄 수 있음을 검증하고 있습니다. 또한, MAC-T 세포에서의 히스티딘 아미노산 첨가는 96 시간에 1.2 mM을 첨가했을 때 최적의 단백질 양을 합성하는 것으로 보였습니다. The aim of this experiment was to examine the quantity of protein expression in MAC-T cell, culture medium and both (cell + medium) by supplementing L-histidine with six different concentrations and five different incubation length times in MAC -T cells in vitro experiment. So, this study was conducted with two experimental studies in vitro, 1st experimental study was to evaluate the optimal incubation time and 2nd was also to determine the optimal concentration levels for analysis on protein quantity expression by supplementing of L-Histidine in vitro MAC-T cell line. For the 1st study was conducted with five different incubation times (0, 24, 48, 72 and 96 hr) together with 5 different concentration levels (0, 0.3, 0.6, 0.9, 1.2 and 1.5 mM of L-Histidine) and the optimal protein quantity expression from total protein, medium protein and cell protein were revealed at 96 hr incubation time. Therefore, 96 hr incubation time was assessed as the best incubation time for optimal protein quantity expression and 96 hr incubation time was used to compare with 0 hr incubation time in 2nd concentration levels experimental study. The 2nd experimental study was investigated with 6 concentration levels (0 mM, 0.3 mM, 0.6 mM, 0.9 mM, 1.2 mM and 1.5 mM of L-Histidine) at 0 hr (Control) and 96 hr as incubation times on MAC-T cells line. In this study-2, the results for the highest cell protein quantity expression was at 1.2 mM supplementation (P < 0.05),) and highest medium protein expression was at 1.2 mM (P < 0.01) and 1.5 mM (P < 0.05), peak total protein expression also was at 1.2 mM (P < 0.01) respectively when compared with 0 hr (Control) and 96 hr incubation times. Moreover, the protein expression within 6 different concentrations level (0, 0.3, 0.6, 0.9, 1.2 and 1.5 mM of L- His) were compared at within only 96 hr incubation time, there was significant difference in medium protein expression and cell protein expression and total protein expression were not significantly different between the dosages at 96 hr incubation time. Protein quantity expression for both studies was performed by BCA pierce protein assay kit analysis. In conclusion, these studied results proved that the essential amino acid (EAA) L-Histidine could effect on induction of milk protein synthesis within the bovine mammary epithelial cell (MAC-T). In addition, supplementation of histidine amino acid in MAC-T cells showed the highest amount of protein synthesis when added 1.2 mM at 96 hours.
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