한국 시화호와 중국 Aha호 저질토에 분포하는 이화성 아황산염 환원효소 유전자의 비교 분석

김인선,김옥선,전선옥,안태석,Kim, In-Seon,Kim, Ok-Sun,Jeon, Sun-Ok,Witzel, Karl-Paul,Ahn, Tae-Seok 한국미생물학회 2008 미생물학회지 Vol.44 No.2

한국의 시화호와 중국의 Aha호 저질토에서 서식하는 황산염 환원세균(sulfate reducing bacteria, SRB)의 깊이에 따른 군집구조를 비교하기 위하여, 이화성 아황산염 환원효소(EC 1.8.99.1; dissimilatory sulfite reductase, dsr) 유전자를 대상으로, polymerase chain reaction (PCR), denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE) 및 클론 라이브러리를 이용하여 미생물의 군집구조를 분석하였다. DGGE band 양상을 분석한 결과, Aha호 보다는 시화호에서 더 맡은 밴드를 보여 다양성이 높았고, 깊이별 차이는 나타나지 않았다. 두 서식지에서 얻은총68개 클론의 염기서열을 가지고 계통학적 분석을 한 결과 시화호에서는 Deltaproteobacteria 그룹, Firmicutes 그룹에 속해있는 Desulfotomaculum 종과 archaeal thermophilic SRB 그룹에 속해있는 Archaeoglobus 종이, Aha호에서는 Desulfotomaculum 그룹과 유사성이 높았다. 분리된 대부분의 클론들(59%)은 배양된 황산염 환원세균과는 매우 낮은 유사도를 보였고, 환경에서 분리된 클론들과도90% 이하의 유사도를 나타냈다. 총 클론을 88% 유사도를 기준으로 9그룹으로 나뉘었을 때 시하호와 Aha호의 각 클론은 서로 다른 그룹으로 존재하였다. 이러한 결과는 두 서식지의 이화성 아황산염 환원효소를 가지고 있는 미생물의 군집구조는 확연히 다르고 각 서식지에 특이적인 황산염 환원 미생물이 존재함을 시사한다. The diversity of sulfate reducing bacteria was investigated in different depths of sediments in Lake Sihwa, Korea and Lake Aha, China by PCR amplification, denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE) and clone libraries targeting dissimilatory sulfite redectase (dsr) gene. In the analysis of DGGE band patterns, the community compositions of dsr gene in the sediments of both lakes were significantly different whereas bands in all depths of each environment revealed similar patterns. Bands from Lake Sihwa were produced much more than those from Lake Aha, demonstrating a higher diversity of dsr gene in Lake Sihwa. Total 68 clones containing dsr gene were obtained to analyze their sequences. Sequences from the sediment of Lake Sihwa were affiliated to Deltaproteobacteria, the Gram-positive thermophilic sulfate reducers belonging to the genus Desulforomaculum and archaeal thermophilic SRB belonging to the genus Archaeoglobus, whereas sequences from the sediments of Lake Aha were related to genus Desulfotomaculum. Clones retrieved from sediment of Lake Sihwa revealed a higher numbers than those of Lake Aha, demonstrating a higher diversity of dsr gene in Lake Sihwa. Most of clones (59%) were distantly related to the known cultivated SRB with $60\sim65%$ of similarity, which were clustered only the sequences from the environments showed less than 90% similarity. These habitat specific sequences suggested that the clustered dsr sequences represent species or groups of species that were indigenous to these environments. This study showed that these lakes have a specific bacterial communities having dsr gene distinct from those in other environments such as soil and marine ecosystems around the world.

초고압전자현미경에 의한 엽육세포 색소체 미세구조의 3차원적 분석

김인선,박상찬,한성식,김은수,Kim, In-Sun,Park, Sang-Chan,Han, Sung-Sik,Kim, Eun-Soo 한국현미경학회 2006 Applied microscopy Vol.36 No.3

발달중인 Sedum 및 Salsola의 엽육조직을 chemical fixation과 high pressure freezing (HPF) 등으로 고정한 후, 초박 및 후박절편으로 제작 carbon coating하여 TEM 및 UHVEM으로 연속절편에 의한 2-D영상과 tilt image data를 수집하였다. 이후 초미세 구조들에 대하여 tilting 및 tomography 기법, 그리고 디지털화한 image의 3-D 입체구조 재구현에 필수적인 IMOD 프로_그램을 적용한 image 처리과정을 거쳐 UHVEM data에서 색소체내 초미세구조의 정보를 추출하여 세포수준에서의 3-D image를 분석하였다. 색소체 기질에서 녹말입자 및 틸라코이드에 인접하여 형성되는 CAM및 $C_4$ 식물 색소체 결정체들은 어떤 막으로도 둘러싸이지 않는 구조로서, Sedum rotundifolium 색소체내 결정체는 수 ${\mu}m$에 이르는 커다란 크기로 형성된다. 결정체 내에는 약 20nm격자거리로 이루어진 기원을 알 수 없는 수백-수천 개의 미세소관성 요소들이 평행 또는 격자상태로 정교한 구조를 이루며, 티라코이드 및 녹말입자와 인접하여 발달하였다. $C_4$ 광합성 수행 Salsola komarovii의 경우, 결정체는 엽육세포 색소체에서만 발달하며 결정체 구성 기본요소들이 비교적 규칙적인 격자거리를 이루며 수십 개 배열하는 구조를 형성하였다. 특히, tilted image및 3-D 입체구조 연구에서 결정체 형성에는 이들과 인접하여 발달하는 틸라코이드막이 관여함을 알아 낼 수 있었다. 이는 엽육세포 색소체에는 결정체들이 식물이 수행하는 광합성 유형에 따라 각기 다른 구성요소로 형성되어 Sedum의 경우와 같이 발달 중인 엽육조직에서 분화하거나 Salsola에서와 같이 세포 유형에 따라 상이하게 발달하는 것으로 추정되었다. Image processing by ultra high voltage electron microscopy (UHVEM) and tomography has offered major contributions to research in the field of cellular ultrastructure. Furthermore, such advancements also have enabled the improved analysis of three-dimensional cellular structures in botany. In the present study. using UHVEM and tomography, we attempted to reconstruct the three-dimensional images of plastid inclusions that probably differentiate during photosynthesis. The foliar tissues were studied Primarily with the TEM and further examined with UHVEM. The spatial relationship between tubular elements and the thylakoidal membrane and/or starch grains within plastids mainly have been investigated in CAM-performing Sedum as well as in $C_4$ Salsola species. The inclusion bodies were found to occur only in early development in the former, while they were found only in mesophyll cells in the latter. The specimens were tilted every two degrees to obtain two-dimensional images with UHVEM and subsequently comparison has been made between the two types. Digital image processing was performed on the elements of the inclusion body using tilting, tomography, and IMOD program to generate and reconstruct three-dimensional images on the cellular level. In Sedum plastids, the inclusion bodies consisted of tubular elements exhibiting about 20 nm distance between elements. However, in Salsola, plastid inclusion bodies demonstrated quite different element structure, displaying pattern, and origin relative to those of the Sedum. The inclusion bodies had an integrative relationship with the starch grains in both species.

Structural Differentiation of Photosynthetic Tissue in Kranz Anatomy of Salsola Species

김인선,Kim, In-Sun Korean Society of Electron Microscopy 2001 Applied microscopy Vol.31 No.4

Salsoloid Kranz구조를 지닌 다육질성의 Salsola komaravii의 두 단계 잎의 광합성 엽육조직에 대하여 LM 및 TEM에 의한 구조적 분화발달 양상을 연구하였다. 수분저장조직을 둘러싸는 내부 유관속세포층 및 외부 엽육세포층으로 구성된 두 층의 광합성조직은 어린 잎에서는 연결되어 발달하나 성숙한 잎에서는 불연속적으로 발달하였다. 중앙의 유관속 외 다수의 미세맥들은 대개 내부 유관속세포층과 접하여 형성되며 발달초기에는 이 두 세포층의 구조적 차이는 뚜렷하지 많았다. 이들 엽육조직이 신장 발달하면 franz구조 내 내부 유관속 세포층과 외부 엽육세포층은 세포형태, 세포소기관의 분포, 엽록체의 내부 특성, 세포벽의 비후, 원형질연락사의 발달양상 등에서 현저한 차이를 보이며 구조적으로 분화하였다. 특히 이들이 지닌 엽록체의 미세구조 및 원형질 연락사 등의 특성은 생화학적으로 알려진 NADP-ME 유형과 거의 일치하였다. 이들은 세포특이성을 나타내는 C-4 광합성 효소의 발현양상을 조사하는 세포 면역화학법과 접목되어 연구될 것이다. Leaves of two developmental stages of Salsola species, young and mature, were examined to reveal the structural and functional relationships in the photosynthetic tissue using anatomical and ultrastructural criteria. Both young and mature leaves had Kranz anatomy of the Salsolid type with two layers of chlorenchyma on the leaf periphery: an outer layer of palisade mesophyll cells and an inner layer of compact bundle sheath cells with centripetally arranged organelles. The chlorenchyma was continuous in young leaves , while it was discontinuous in mature leaves. The main vascular bundle occupied the central position in the leaf. but the small peripheral vascular bundles were in contact with the chlorenchyma. Structural dimorphism of chloroplasts was obvious in bundle sheath cells of mature leaves exhibiting noticeable grana reduction, whereas mesophyll cell chloroplasts had well developed grana in all cases. Plasmodesmata were less numerous and rather simple in young leaves relative to well-developed secondary plasmodesmata of the later stage. According to the current data, features of two stages of Salsola leaves corresponded to NADP-ME bio-chemical subtype on the basis of photosynthetic cell ultrastructure. Implications of developing such anatomical and ultrastructural data of Sulsola species and biochemical characteristics reported in other C-4 species have been discussed.

연꽃식물 조직의 표피 특성과 연잎효과

김인선,Kim, In-Sun 한국현미경학회 2012 Applied microscopy Vol.42 No.2

연잎효과는 연꽃의 잎에서 규명된 현상으로 표피세포에서 기원하는 미세구조에 의해 물방울이 잎 표면이나 내부조직에 침투하지 않고 경사면으로 흘러내리며 표면 위 먼지나 이물질을 함께 떨어지게 한다. 잎 표면을 항상 깨끗한 상태로 유지하는 자기정화 능력인 연잎효과에 대해서는 여러 영역에서 연구되고 다방면으로 응용되고 있으나 구조적인 측면에서 연잎을 생장단계별 또는 표피조직 부위별로 비교 조사한 연구는 거의 없는 실정이다. 이에 본 연구에서는 연잎과 줄기를 대상으로 생장단계별, 부위별 표피조직의 미세 표면구조를 연구하여 연잎효과 표면 특성을 조사하였다. 본 연구에서 조사된 연잎효과는 미세돌기와 왁스결정체가 발달한 잎의 상피조직에서만 나타나고, 왁스결정체만 발달한 하피 및 줄기의 표피조직에서는 확인되지 않았다. 이는 미세돌기의 발달이 연잎효과를 나타내는데 가장 중요한 요인이고, 왁스결정체가 돌기표면 위에 축적되면 연잎효과는 더 증가하는 것으로 밝혀졌다. The cell surface sculpture of the plant epidermis has received great interest recently. It has also been an active area of research, as the biological microstructures of the surface, such as papillae and waxes, exhibit several unique properties, including self-cleaning character; namely the "Lotus effect" first described in the leaves of the lotus, Nelumbo nucifera. The Lotus effect is the phenomenon in which the super-hydrophobic and water-repellent nature of lotus leaves allow water drops to run off easily on the surface in a rolling and sliding motion thereby facilitating the removal of dirt particles. It is well-known that surface roughness on the micro- and nanoscale is a primary characteristic allowing for the Lotus effect. This effect is common among plants and is of great technological importance, since it can be applied industrially in numerous fields. In the present study, Nelumbo nucifera leaf and stem epidermal surfaces have been examined with a focus on the features of papillae and wax crystalloids. Both young and mature Nelumbo nucifera leaf epidermis demonstrated the Lotus effect on their entire epidermal surface. The central area of the upper epidermis, in particular, formed extremely papillose surfaces, with an additional wax layer, enabling greater water repellency. Despite the presence of wax crystalloids, epidermal surfaces of the lower leaf and stem lacking papillae, were much more easily wetted.

연구발표논문초록 ( 촉매 (Ⅲ) ) : 수축핵 모델을 이용한 중공원통형 연탄의 연소 특성 연구

김인선,윤세중,이현구 (정) ( In Sun Kim,Se Joong Yoon,Hyun Ku Rhee ) 한국화학공학회 1988 춘계학술발표회 Vol.- No.-

HVEM에 의한 둥근잎꿩의 비름 (Sedum rotundifolium L.) 색소체의 결정체 구조

김인선,Kim, In-Sun 한국현미경학회 2006 Applied microscopy Vol.36 No.2

둥근잎꿩의비름(Sedum rotundifolium L.) 엽육조직에 대한 초박절편 및 연속 후박절편의 시료를 제작하여 TEM 및 HVEM 고압전자현미경으로 연구하였고, 이로부터 수합된 색소체 결정체 구조의 tilting 및 연속절편 결과에 image processing을 실시하여 세포수준에서의 초미세구조 정보를 추출 3-D 입체구조로 재구현하였다. ${\pm}60^{\circ}$에서의 tilting과 $0.125{\sim}1{\mu}m$에 이르는 연속절편에서 결정체를 구성하는 미세한 관상요소(tubular elements)의 구조적 특성을 조사한 결과, 결정체는 일시적으로 분화 초기단계에서 형성되어 $4{\sim}5{\mu}m$에 이르기까지 크게 여러 형태로 발달하나, 엽육조직이 성숙하면 이들 구조는 색소체에서 완전히 사라지는 특성을 보였다. 결정체를 구성하는 관상의 요소는 절단각도에 따라 격자구조 또는 평행구조를 이루었으며, 이들 구조 내에 형성되어 있는 정교한 구조적 pattern은 회절분석에 의해 확인되었다. 결정체 내에는 규칙적으로 약 20nm의 격자간격으로 이루어진 초미세관상의 요소들이 수백-수천 개 무리지어 발달하였다. 색소체 내에는 이러한 결정체가 하나 이상 형성되기도 하며, 일부 결정체의 경우 결정구조의 말단부위가 국소적으로 융합 또는 분지되기도 하였다. 결정구조는 막으로 둘러싸이지는 않으나, 대부분 틸라코이드 막성계와 밀착하여 발달하였다. 일차적으로 수집된 HVEM 상의 2-D 결과는 디지털화 과정을 거친후 Imod와 3-D Max를 이용하여 3-D 입체구조로 재구현되었다. Major contributions has been made in cellular ultrastructure studies with the use of high voltage electron microscopy (HVEM) and tomography. Applications of HVEM, accompanied by appropriate image processing, have provided great improvements in the analysis of three-dimensional cellular structures. In the present study, structural patterns of the crystalline bodies that are distinguished in mesophyll plastids of CAM-performing Sedum rotundifolium L., have been investigated using HVEM and tomography. Tilting, and diffraction pattern analysis were performed during the investigation. The titlting was performed at ${\pm}60^{\circ}\;with\;2^{\circ}$ increments while examining serial sections ranging from 0.125 to $1{\mu}m$ in thickness. The young plastids exhibited crystalline inclusion bodies that revealed a peculiar structural pattern. They were irregular in shape and also variable in size. Their structural attributes affected the plastid morphology. The body consisted of a large number of tubular elements, often reaching up to several thousand in number. The tubular elements typically aggregated to form a fluster The elements demonstrated either a parallel or lattice arrangement depending on the sectioning angle. The distance between the elements was approximately 20nm as demonstrated by the diffraction analysis. HVEM examination of the serial sections revealed an occasional fusion or branching of elements within the inclusion bodies. Finally, a three-dimensional reconstruction of the plastid crystalline bodies has been attempted using two different image processing methods.

Microbial Colonization of the Aquatic Duckweed, Spirodela polyrhiza, during Development

김인선,Kim, In-Sun Korean Society of Electron Microscopy 2004 Applied microscopy Vol.34 No.2

수생식물 개구리밥(Spirodela polyrhiza)의 식물체 발달 과정에서 나타나는 미생물과의 상호관계를 주사전자현미경 및 세포학적으로 추적하여 연구하였다. 개구리밥은 부유성 식물로 분화 발달 초기부터 잠수부위에 여러 종류의 박테리아, 남조류, 규조류 등이 서식하였다. 미분화된 어린 식물체에는 성숙 발달한 식물체에 비해 미생물들이 낮은 빈도로 출현하였고, 성숙한 식물체에서는 특히 엽상체 하피에 가장 많은 미생물들이 서식하였으며, 그 다음으로는 점액성 물질이 층을 이루는 근관에 많이 관찰되었다. 반면, 신장 발달 중의 뿌리에는 일반적인 분포를 보였으며, 상피에는 미생물이 거의 분포하지 않는 양상을 보였다. 이들 미생물이 개구리밥 조직 내에 침입하여 식물체에 어떠한 영향을 미치는가를 조사하기 위해 엽상체, 연결사, 뿌리, 근관, 무성생식낭 등의 구조를 세포학적으로 추적한 결과, 어느 부위에서도 조직 내로 미생물이 침입하여 세포를 괴사시키거나 감염시키는 일은 거의 관찰되지 않았다. 그러므로, 개구리밥 식물체의 발달과정에 있어 미생물들은 어떠한 해를 주지 않는 것으로 추정된다. 이후 개구리밥에 서식하는 미생물의 질소고정치를 측정하여 그 기능을 식물체의 세포학적 측면과 접목시켜 연구하면 개구리밥과 미생물과의 상호관계가 공생적인지를 더 확실하게 밝힐 수 있을 것이다. Fresh specimens of the aquatic macrophyte, Spirodela polyrhiza, have been examined employing scanning and transmission electron microscopy. Observations revealed the occurrence of microbial colonization during development. Submerged parts of the small, free-floating S. polyrhiza body exhibited a variety of microorganisms such as bacteria, cyanobacteria, and diatoms throughout their development. However, immature and/or young plants normally demonstrated much less microbial colonization compared to mature plants. During the study, heavy colonization by the microorganisms was routinely encountered at maturity, especially in the fully developed abaxial fronds and root caps. The mucilaginous layer was shown along the root caps, and the microorganisms appeared to be either clustered or attached to this layer. In contrast, only moderate degrees of colonization were observed in the root, and little to no colonization was observable in the adaxial frond surface. Transmission electron microscopy clearly demonstrated the microbial colonization to be external in the S. polyrhiza specimen examined in the current study. The association between the microorganisms and S. polyrhiza has been considered non-harmful, as no frond senescence and almost no mechanical penetration of the plant by the microorganisms were noticed during the study.

연구발표논문초록 ( 촉매 · 반응공학 (Ⅲ) ) : 무연탄입자의 연소특성에 관한 연구

김인선,이현구 (정) ( In Sun Kim,Hyun Ku Rhee ) 한국화학공학회 1986 추계학술발표회 Vol.- No.-

수생형 통발(Utricularia japonica)의 흡입식 포충낭 형태 연구

김인선,Kim, In-Sun 한국현미경학회 2010 Applied microscopy Vol.40 No.2

본 연구에서는 뿌리 없이 분지된 줄기에서 기원한 포충낭으로 먹이를 빠르게 포획하는 수생형 통발 포충낭의 형태 구조적 특징을 전자현미경으로 연구하였다. 이들의 흡입식 포충낭에서는 입구 부위 및 덧문에 발달하는 구조들이 능동적 먹이 포획에 있어 다른 어느 구조보다도 중요한 기능을 수행할 수 있도록 분화되어 있다. 포충낭 입구에는 분지된 안테나 및 부속지들이 위치하고, 덧문 중앙 부위에는 4개의 감각모가 발달하여 먹이의 접촉자극을 감지하였다. 자극신호는 입구의 무병, 유병의 다양한 capitate형 분비모들이 소수성 점액물질을 분비하게 하여 이들을 피복하며 덧문을 닫아 먹이를 포획하였다. 덧문 안쪽의 threshold는 입구부분, pavement epithelium 층, 내부 구역으로 구분되며, 입구와 내부구역의 중간에 있는 pavement epithelium 층에는 소수성 큐티클이 피복된 밸름층이 형성되었다. 먹이가 포충낭의 내강으로 들어오면 내벽에 발달하는 2분지선과 4분지선들이 효소 등의 물질을 분비하여 이들을 소화 및 흡수하는 중요한 기능을 하였다. 이와 같이 통발의 흡입식 포충낭에서는 안테나, 감각모, 덧문, capitate형 분비모, 내벽의 분지선 등이 체계적이고 효율적인 방법으로 그 구조와 기능이 분화되어 식충의 기작을 수행하였다. 이후 포충낭의 분화발생을 생장단계별로 추적 연구하여 본 연구의 결과에 접목시키면 더 유용한 통발속 포충낭 구조 자료가 될 것이다. Morphology and microstructure of the suction trap in aquatic Utricularia japonica were examined using scanning electron microscopy. Branched stems bear numerous suction traps without root formation. The traps are derived axillary from the node, and their antennae and appendages extend in a peculiar fashion. The trap walls are thin, two-celled, parenchyma tissue and simple, small glands are scattered in both internal and external surface of the trap. The entrance of the trap is surrounded by one pair of dorsal antennae and ventral appendages, where the former guides the prey to the entrance. Trap door is situated below the entrance and numerous sessile and stalked capitate trichomes cover the entrance and even on the door surface. The capitate trichomes are secretory, but four trigger hairs formed on the central areas of the door are not. They are believed to function in activating and tripping the trap door. A specialized region of the threshold come in contact with the lower portion of the door upon closing. The secretory capitate trichomes near this region are responsible for producing and secreting a mucilage-like substance which composes the velum. Two-armed bifid glands are located in the interior side of the threshold, while four-armed quadrifid glands are considerably numerous occurring over the entire inner trap wall. Bifid and quadrifid glands develop semi-spherical basal cells that connect them to the inner wall surface. Antennae, trigger hairs, capitate trichomes, bifid and quadrifid glands are more important structures in the carnivory of U. japonica.

Sequential Changes of Pericarp Ultrastructure in Citrus reticulata Hesperidium

김인선,Kim, In-Sun Korean Society of Electron Microscopy 2003 Applied microscopy Vol.33 No.1

Citrus reticulata 감과 과피조직 내에서 탈리를 전후하여 신속하게 진행되는 특정 미세구조의 분화양상을 전자현미경적으로 연구하였다. 특히, 색소체 전환이 진행되어 뚜렷한 외과피층을 이루는 후각세포 내에서 일어나는 미세소기관 분해물질의 형성 및 특성에 초점을 두어 연구하였다. 색 변화가 수반된 발달 중의 외과피 유세포들은 세포벽이 비후되면서 1차공역이 잘 발달하는 후각세포로 분화하며, 대부분의 색소체는 유색체로 전환되어 티라코이드는 거의 소실되고 지질입자를 다량 함유하는 불규칙적인 형태로 변형되었다. 이때 세포막이나 액포막에서는 국부적으로 형성된 수많은 소낭들이 집적되어 세포질 내부로 이동하였고, 세포간 1차공역에 발달하는 원형질연락사를 통한 소낭의 집적현상 또한 빈번히 일어났다. 집적된 소낭들은 융합되어 전자밀도가 높은 구형 또는 일정한 형태가 없는 구조(EDB)로 되며, 이동하여 엽록체, 미토콘드리아 등의 주요 세포소기관을 점차 포위하였다. 소액포들은 융합하여 거대액포가 되며, 세포질 및 EDB에 포위된 소기관들은 점차 분해되기 시작하였다. EDB는 리파제 확인실험에 의해 지질성 물질로 이루어진 구조로 확인되었다. 과피발달 초기에 선행된 중과피 분화는 세포 내에서 급격히 진행된 용해현상에 의해 수많은 소액포들로 이루어진 거대한 세포 공강을 형성하며 밀착되어 불규칙적인 세포벽과 함께 해면성으로 되었다. 이와 같이 본 연구에서는 감과가 식물체에서 분리되기 직전에서부터 탈리 후까지 일어나는 과피의 발달 및 노화현상을 추적하였다. Ultrastructural changes of the pericarp in Citrus reticulata has been investigated during hesperidium abscission. The pericarp was composed of compactly arranged parenchyma cell layers during early stages of fruit development. The outermost exocarp was green and active in photosynthesis. However, cells in the exocarp soon changed into collenchyma cells by developing unevenly thickened walls within a short time frame. As the fruit approached maturation, the chlorophyll gradually disappeared and chloroplasts were transformed into carotenoid-rich chromoplasts. In the mature fruit the exocarp consisted of large, lobed collenchyma cells with primary pit fields and numerous plasmodesmata. The immature mesocarp was a relatively hard and thick layer, located directly under the exocarp. With development, the deeper layers of the exocarp merged into the white, spongy mesocarp. Before separation of the hesperidium from the plant, some unusual features were detected in the plasma membrane of the exocarp cells. The number of small vacuoles and dark, irregular osmiophilic lipid bodies also increased enormously in the exocarp collenchyma after the abscission. They occurred between the plasma membrane and the wall, and invaginated pockets of the plasma membrane containing double-membraned vesicles were also frequently noticed. The lipid bodies in the cytoplasm were often associated with other organelles, especially with plastids and mitochondria. The plastids, which were irregular or amoeboid in shape, contained numerous large lipid droplets, and occasional clusters of phytoferritin, as well as few loosely -oriented peripheral lamellae. Myelin-like configurations of membrane were frequently observed in the vacuoles, as was the association of lipid bodies with the vacuolar membrane. Most vacuoles had an irregular outline, and lipid bodies were often connected to the tonoplast of the vacuoles. The structural changes underlying developmental, particularly to senescence, processes in various hesperidium will be reported in the separate paper.