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공홍식 韓京大學校 生物情報通信專門大學院 2006 국내박사
본 연구는 항산화제 첨가배양에서 먼저 체외수정 후 체외배양 48시간에 난구세포의 제거 유·무에 따라 CR_(1)aa 배양액에 hemoglobin을 0, 1, 5㎍/㎖를 첨가한 구의 상실배기이상 체외발육성적은 난구세포를 제거한 구에서 23.8%, 33.3% 및 26.8%였으며, 난구세포를 제거하지 않은 구에서는 각각 39.5%, 54.8% 및 48.8%로서 난구세포를 제거하지 않은 구에서 Hb를 1㎍/㎖를 첨가한 구가 다른 여타구 보다 통계적으로 높은 결과를 얻었다(P<0.05). 체외수정 후 체외배양 96시간 후 난구세포의 제거 유·무에 따라 Hb를 0, 1, 5㎍/㎖를 첨가하였을 때, 상실배기 이상 체외발육성적은 난구세포를 제거한 구에서 각각 28.6%, 46.2% 및 39.1%였으며, 난구세포를 제거하지 않은 구에서는 각각 33.9%, 67.2% 및 46.0%로서, 난구세포를 제거하지 않은 구에 Hb를 1㎍/㎖ 첨가구가 다른 여타구에 비해 통계적으로 유의하게 높게 나타났다( P<0.05). CR_(1)aa배양액에 L-NAME를 0, 10, 50 및 100mM을 첨가한 구에서 상실배 이상 발육된 체외발육성적은 각각 55.6%, 64.9%, 58.8% 및 66.7%로써 L-NAME 첨가구가 무첨가구에 비해 커다란 차이가 나타나지 않았다(P>0.05). 마지막으로 모든 처리구에 배반포까지 발육된 체외수정란의 세포수에는 커다란 차이가 인정되지 않았다. 두 번째 연구에서는 분석대상 MS marker에 대한 Single position test를 실시하였고 유전자형과 경제형질(냉도체중, 배장근 단면적, 근내지방, 등지방 두께) 사이에 유의한 연관성이 있는 것과 유전자형과 경제형질 육종가 추정치 사이에 유의한 연관성 있는 것을 발견하였다. 경제형질뿐 아니라 분석대상 MS 유전자형과 성장형질(도체중, 도체율, 6·12·18·24개월령 체중)과의 유의한 연관성이 있다고 발견하였다. 각각의 유전자 표지에서 출현되는 대립유전자 종류를 나타내었다. 이는 실제 유전자감식방법을 적용하기 위해 유용한 대립유전자의 선별을 통해 multiplex PCR 수행 등 분석 효율을 높이기 위해 다양한 크기의 대립유전자가 발현되는 유전자표지가 선정되는 것이 바람직하다. 본 연구에서 분석된 한우 집단의 경우 발현되는 대립유전자수가 최소 2종 내에서 13종까지 다양하게 발현되었다. 유전자 감식을 통해 한우개체를 확인하기 위해서 6~7개의 대립유전자 발현될 경우 분석의 효율성 면에서 가장 바람직한 것으로 판단된다. This study was designed to evaluate the effects of antioxidants (astaxanthin, aesculetin and taurine) of bovine IVM/IVF embryos. In preimplantation Hanwoo embryos, the relative abundance of various developmentally important gene transcripts were determined by a modified semi-quantitative single cell RT-PCR assay to analyze the effects of two medium supplement, serum or antioxidant. When CR1aa medium was supplemented with different dosages of astaxanthin at 48hrs for in vitro culture, the proportion of embryos developing beyond morula stage in 0, 1, 5 and 10uM were 31%, 36% and 38% and 22%, respectively. There was a significant difference in the developmental rate of 5uM astaxanthin compared with any other groups. When added to esculetin(1㎍g/㎖) and taurine(2.5mM), the percentage of developing into morulae and blastocysts were significantly increased. The proportions of embryos developing into morulae and blastocysts were 41.2% in 0, 57.1% in esculetin treated group and 53.5% in taurine treated group, respectively. Cell numbers of blastocysts were not increased in all experimental groups. Genetic expression of three antioxidant enzymes involved in mechanisms protecting embryos against reactive oxygen species (ROS) was studied in vitro culture condition. The enhancement ROS of in Hanwoo embryos induces expression of cox-2, p53, bcl-2 and catalase mRNA results in activation of the signaling pathway for embryo apoptosis Mapping quantitative trait loci(QTL) for continuous traits of economical importance in livestock species is a frequently used application of genetic markers. Many studies in dairy cattle have shown that QTLs with major influence on economic traits are spread on the chromosomes. This study analyzed microsatellite markers for a single position test in Hanwoo. Significant association between some genotypes of microsatellite markers and economic traits(carcass weight, LMA, MS, BF) and significant association between some genotypes of microsatellite markers and breeding values(carcass weight, LMA, MS, BF) were found. Also some microsatellite genotypes showed significant effects on growth traits(6, 12, 18, 24 month).
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