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        Purification and Characterization of Chinese Cabbage Pectinesterase

        고영환,박관화,Ko, Young-Hwan,Park, Kwan-Hwa Korean Society of Food Science and Technology 1984 한국식품과학회지 Vol.16 No.2

        배추로부터 얻은 펙틴에스테라제 조효소액을 DEAE-셀를로오스 이온교환 수지를 통과시켜 두개의 분획F-A와 F-B를 분리했으며. 그중 주종을 이루고 있는 F-A는 DEAE-셀룰로오스 이온교환수지. CM-셀를로오스 이온교환수지를 통과시켜서 약 340배 정제하였다. F-A와 F-B는 비슷한 염효과를 나타내었는데, 최적 염농도는 $Ca^{++}$ $Mg^{++}$등 2가 양이온의 경우 $20{\sim}50mM$ $K^{+}$, $Na^{+}$등 1가 양이온의 경우 250mM부근이었다. 최적pH는 F-A와 F-B에 대해서 각각 8.0 및 $7.5{\sim}8.0$이였으며. 이들 두 분획은 pH $5.0{\sim}8.0$에서 적어도 한 시간동안 안정했다. F-A에 대한 Km은 펙틴기질에 대해서 0.01%이었다. F-A와 F-B의 최적온도는 각각 $48^{\circ}C$와 $55^{\circ}C$이었으나 $55^{\circ}C$에서 급격히 역가가 감소되었다. 열불활성화 경향은 1차반응을 나타내었으며 $35^{\circ}C{\sim}55^{\circ}C$사이에서 F-B의 D-Value는 F-A보다 커서 F-B가 F-A보다 열에 더 안정한 것으로 나타났다. 한편 Z-value는 F-A 의 경우 $10.5^{\circ}C$, F-B의 경우 $8.3^{\circ}C$이었다. Two fractions of pectinesterase from Chinese cabbage were isolated by ammonium sulfate fractionation, ion exchange chromatography on DEAE-cellulose and Sephadex G-150 gel filtration. The fraction F-A and F-B were purified approximately 340- and 10-fold. The similar salt effects and pH optima (pH 7.5-8.0) were obtained for the two pectinesterase fractions. The maximum activity of both two. fractions were obtained at 20-50mM of divalent rations and at 250mM of monovalent rations. The apparent Michaelis constant of the F-A was 0.01% for citrus pectin. The temperature optima for F-A and F-B were $48^{\circ}$ and $55^{\circ}C$, respectively and both fractions were stable in the region of pH 5.0-8.0 at room temperature. The thermal inactivation of the two fractions followed the first order reaction kinetics. From D and Z-values obtained the thermal resistance of the two fractions were characterized.

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