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Zebrafish에서 human cytochrome b<SUB>5</SUB>의 발현
한세미(Se Mi Han),유민(Min Yoo) 한국생명과학회 2017 생명과학회지 Vol.27 No.6
본 연구에서는 zebrafish에 사람의 cyt b5 유전자를 microinjection하여 발현시키고, 그 결과를 형광으로 확인하였다. HeLa cell에서 RT-PCR을 진행한 결과 414 bp의 cyt b5 band가 증폭되었다. 염기서열 분석으로 재확인된 cyt b5 insert를 pEGFP-N3의 형광 vector에 클로닝하였고, 이렇게 준비된 pEGFP-N3-cyt b5 plasmid DNA를 1세 포기의 수정란에 microinjection하였다. cyt b5를 microinjection한 치어를 형광현미경으로 관찰한 결과 대조군 치어보다 훨씬 선명한 형광을 띠는 것이 확인되었다. 최종적으로 치어에서 RNA를 분리하여 RT-PCR하였고 전기영동과 DNA sequencing으로 fusion 단백질의 발현을 재확인하였다. Cyt b5의 발현으로 인해 zebrafish의 생존율이 다소 떨어지는 것으로 확인되었기에 독성 문제를 해결하기 위한 연구가 계속 필요할 것으로 사료된다. 이 연구는 향후 cyt b5가 결핍되었을 경우 발생할 수 있는 여러 질병들을 유전자 차원에서 치료하고, 유용 유전자 클로닝을 위한 기술 개발에 발판이 될 수 있을 것으로 기대된다. In this study, we sought to develop an effective cloning system by which human cytochrome b5 (cyt b5) is introduced and expressed in zebrafish. First, the 414 bp human cyt b5 gene was amplified from RNA extracts of HeLa cells using RT-PCR, and the amplicon was subsequently sequenced to confirm that it was intact. Next, cyt b5 was cloned into the pEGFP-N3 vector, which also encodes a fluorescent gene. One-cell stage zebrafish embryos were microinjected with the recombinant vector containing the cyt b5 gene. Fluorescence microscopy confirmed high expression of the fluorescent gene in the injected fry compared to the non-fluorescent control fry. Finally, we extracted RNA from the injected fry and performed RT-PCR to determine whether the human cyt b5 gene is expressed in the transgenic zebrafish. Sequencing analysis further confirmed that the cloned human cyt b5 gene was intact. The transgenic zebrafish model produced in this study will be a useful tool to study therapeutic approaches to cure various diseases related to the deficiency of functional human cyt b5 as well as tools for cloning useful genes in fish.
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오디추출물 투여가 류머티즘 요인이 있는 일부 한국 중년여성의 혈중 항산화 및 항염증 관련 지표수준에 미치는 영향
신정희(Shin, Jung-Hee),한세미(Han, Se-Mi),김애정(Kim, Ae-Jung) 한국산학기술학회 2012 한국산학기술학회논문지 Vol.13 No.8
본 연구의 목적은 오디가 류머티스 요인(Rheumatoid Factor: RF>10 u/mL)이 있는 중년여성의 혈중 항산화 및 항염증 지표수준에 미치는 영향을 알아보고자 32명의 중년여성을 2군 (NMG, AMG)으로 나누어 4주간의 오디 추 출물 투여 전·후로 체성분 측정 및 채혈을 통하여 혈청 산화(TBARS, FRAP) 및 염증성 지표물질(요산, C-reactive protein: CRP, RF 및 homocystein) 농도를 분석 및 비교하였다. 연구결과 오디 추출물 투여에 따른 NMG와 AMG간 의 체성분에는 차이가 없었다. AMG의 CRP 수준은 0.80±0.05 mg/dL에서 0.55±0.02 mg/dL로 유의적으로 감소하였다 (p<0.05). AMG의 오디 추출물 투여 전의 혈청 TBARS 수준(63.04±12.20 mol/L)은 투여 후(57.44±11.16 mol)와 유의 적인 차이는 없었으나, 감소하는 경향을 보였다. AMG의 혈청 FRAP 수준은 급여 전(1239.02±63.22 mol)에 비해 급 여 후(1556.21±11.16 mol) 유의적으로 증가되었다(p<0.05). AMG의 혈청 TNF-α가 8.78±0.12pg/mL에서 6.58±0.16 pg/mL로, IL-2 수준은 5.41±0.71 pg/mL에서 3.94±0.03 pg/mL로, IL-4 수준은 7.21±0.61 pg/mL에서 5.15±0.36 pg/mL 로 감소하여 오디 추출물 투여에 의한 항산화 및 항염증 활성이 규명되었다. 이상의 연구결과로 볼 때 오디는 류머 티즘 요인이 있는 중년여성의 항산화 및 항염증 활성을 강화시키는데 도움이 된 것으로 보인다. 따라서 산화 스트레 스 감소를 통한 염증조절물질로써 오디를 꾸준히 섭취한다면 류머티스 관절염(Rheumatoid Arthiritis: RA)환자의 질병 관리에 부작용 없이 도움이 될 것으로 사료된다. 본 연구를 기초로 후속적으로 RA 발병 유발인자인 사이토카인을 효과적으로 통제할 수 있는 오디를 활용한 치료식 개발 및 보급을 활성화하여 국내 오디 농가의 부가가치 창출에도 기여할 수 있을 것으로 기대된다. This study investigated the effect of mulberry fruit extract(MFE) on antioxidant and anti-inflammatory activities of middle aged women with rheumatoid factor (RF). Thirty two middle-aged subjects were divided into two groups which were normal middle-aged group (NMG) and abnormal middle-aged group whose serum RF level were > 10 u/mL (AMG). All groups had consumed MFE (100 mL/day) for 4 weeks. Anthropometric measurements, serum inflammatory factors, serum oxidative stress markers analyses were performed at baseline and then at 4 weeks following the study. There were no significant differences in anthropometric measurements, including BMI, WHR and body fat composition between two groups. But after 4 weeks MFE consumption, serum levels of C-reactive protein (CRP), ferric-reducing ability of plasma (FRAP), serum TNF-α, IL-2, IL-4 had significantly decreased (p<0.05) in AMG. These findings suggested that the MFE consumption as food may be protective against oxidation and inflammation like RA.
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왕경희 ( Kyung Hee Wang ),한세미 ( Se Mi Han ),이선영 ( Sun Young Lee ),송채은 ( Chae Eun Song ),박윤점 ( Yun Jum Park ) 한국화예디자인학회 2013 한국화예디자인학 연구 Vol.29 No.-
Hotel wedding flower arrangement analysis of traditional and modern types for virgin road decorated. The difference order category between traditional types is the symmetry and the modern type of asymmetry. Almost the same as a traditional type for all arrangements are decorative and modern type too. If the ratio was two different parts of the modern type was shown. Public and professional trends in the traditional design and modern design elements, has shown differences in the recognition. So, Hotel wedding flower arrangement decorate preference for design and trend appeared very similar, especially the preferences of contemporary type design with modern type trends appear largely to reflect higher, decorations can be seen that the preferred. Therefore the decoration techniques florist professional representation of design elements, rather than dealing with technique factors and virgin road decorated the proposed form, color, space, harmony, trend factors to the proposed wedding style, eco-friendly social trends , fashion and style to reflect the relevant details decorated by considering that it is more important to the design can be seen.
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